黄成斌
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
- 供职机构：安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程生物学医药卫生更多>>
- 传染性法氏囊病毒VP2蛋白的表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：5
- 2011年
- 建立以传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白为诊断抗原的传染性法氏囊病(IBD)血清学检测方法,研究了VP2蛋白的编码基因,并在原核表达系统中表达了VP2蛋白。用表达的VP2蛋白建立了IBDV间接ELISA检测方法。抗原最佳包被量为每孔174.67 ng,血清最佳稀释度为1:40。对采自安徽部分地区的979鸡血清样品进行检测,IBDV抗体阳性率为39.73%。结果证实,间接ELISA法用于IBD血清抗体的监测具有良好的特异性,是一种快速简便的血清学方法,值得在基层推广应用。
- 宋军黄成斌单雪芹潘玲
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2蛋白间接ELISA抗体检测
- 用噬菌体肽库筛选IBDV单克隆抗体的模拟表位被引量：2
- 2012年
- 目的:筛选法氏囊病毒(IBDV)单克隆抗体所针对的模拟抗原表位。方法:以纯化的3株IBDV单克隆抗体为靶分子用噬菌体12肽库筛选相应抗原模拟表位;应用间接和竞争ELISA鉴定所筛选的阳性样品;最后对与抗体高亲和结合的噬菌体进行测序分析。结果:经过四轮淘洗,随机挑取30个克隆经间接ELISA鉴定,发现其中22个克隆结合活性较高。进一步应用竞争ELISA,获得14个噬菌体克隆,其抑制率高达50%以上。对这些噬菌体进行DNA测序,并分析比对了IBDV相应序列,确定了3个抗原模拟表位。结论:通过噬菌体随机肽库成功筛选出3个IBDV模拟表位,为进一步研究IBDV抗原性质奠定了基础。
- 李向红陈芳芳黄成斌余为一
- 关键词：噬菌体肽库单克隆抗体IBDV模拟表位
- 抗传染性法氏囊病毒单抗的制备和VP2基因的序列分析
- 为了获得抗传染性法氏囊病毒/(Infectious bursal disease virus,IBDV/)的单克隆抗体,并对单抗进行分析鉴定,为传染性法氏囊病的诊断以及其抗原表位等研究提供依据。研究用传染性法氏囊病毒B8...
- 黄成斌
- 关键词：VP2高变区
- 文献传递
- 种鸡鸡白痢血清学调查被引量：14
- 2008年
- 2007年12月笔者对安徽省宣城地区7个鸡场的种鸡随机抽取血样992份,采用血清平板凝集试验进行鸡白痢抗体检测,结果表明,该地区种鸡群鸡白痢阳性率为10.9%,其中公鸡阳性率为11.2%,母鸡阳性率为10.6%,表明该地区鸡群中鸡白痢的感染率较高,已成为危害当地养鸡业的重要疾病之一。
- 吴萍萍潘玲毛火云黄成斌
- 关键词：鸡白痢血清学调查
- 两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较被引量：1
- 2010年
- [目的]比较以原核表达蛋白与纯化病毒制备单克隆抗体的特性。[方法]RT-PCR扩增IBDVVP2基因,通过原核表达系统表达目的蛋白,并亲和纯化重组蛋白。尿囊液扩增IBDV,并通过超速离心纯化病毒。分别用纯化的重组VP2蛋白和IBDV免疫Balb/c小鼠,ELISA筛选杂交瘤细胞株。[结果]获得了2株分泌VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价均为1∶2×104;4株分泌IBDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价分别为1∶2×106,1∶6×104,1∶1×105,1∶4×103。所有单克隆抗体均与其制备用免疫原反应,不与空载体或其他病毒抗原反应。经10～20次传代,仍保持稳定的效价。[结论]纯化的原核表达VP2蛋白和IBDV均能诱导小鼠产生免疫应答;用原核表达的VP2蛋白作为免疫原,可以获得特异的VP2抗体。
- 黄成斌潘玲余为一
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2蛋白纯化抗原单克隆抗体
- Ⅰ型鸭病毒性肝炎的逆转录套式PCR检测
- 2009年
- 黄成斌潘玲毛火云黄显明
- 关键词：套式PCR检测鸭病毒性肝炎逆转录CDNA文库VIRUS
- 间接ELISA检测抗传染性法氏囊病病毒抗体方法的建立被引量：2
- 2011年
- 采用原核表达的传染性法氏囊病毒(IBDV)核衣壳蛋白VP2作为诊断抗原,建立检测IBD血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔174.67ng,待检血清最佳稀释度为1∶40,待检血清样品的D492nm≥0.43Dpos+0.57Dneg判为阳性,反之判为阴性。对采自安徽省部分地区的979鸡血清样品进行检测,IBDV抗体阳性率为39.73%。结果证实,间接ELISA法用于IBDV血清抗体的监测具有良好的特异性,是一种快速简便的血清学方法,值得在基层推广应用。
- 宋军黄成斌潘玲
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2蛋白间接ELISA抗体检测
- 两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较
- 比较了用两种来源的抗原制备IBDV单克隆抗体。一是通过自行设计的引物扩增VP2保守区部分基因片段，将其插入原核表达载体中，通过诱导表达获得目的蛋白，并经亲和层析对重组蛋白纯化作为抗原。二是经尿囊液扩增并超高获得IBDV抗...
- 黄成斌潘玲余为一
- 文献传递
- 内固定技术治疗犬猫股骨骨折被引量：5
- 2008年
- 黄成斌潘玲蒋书东
- 关键词：股骨骨折犬猫外科疾病固定物复位内固定
- 两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较
- 本文比较了用两种来源的抗原制备IBDV单克隆抗体。一是通过自行设计的引物扩增VP2保守区部分基因片段,将其插入原核表达载体中,通过诱导表达获得目的蛋白,并经亲和层析对重组蛋白纯化作为抗原。二是经尿囊液扩增并超离获得IBD...
- 黄成斌潘玲余为一
- 关键词：原核表达单抗ELISA
- 文献传递
