丁洁
- 作品数：14 被引量：27H指数：3
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省“泰山学者”建设工程项目山东省科技攻关计划山东省卫生厅科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胎肝滤液诱导大鼠胎盘间充质干细胞向肝细胞的分化被引量：1
- 2011年
- 目的探讨PDMSCs向肝细胞增殖和分化的体外培养条件及方法。方法孕20 d的大鼠无菌条件下取胎盘,经胶原酶消化、密度离心、贴壁筛选法分离培养胎盘源间充质干细胞,并对其表面抗原进行鉴定。在体外培养体系中加入胎肝滤液,模拟体内肝脏微环境,诱导PDMSCs向肝细胞定向分化,以免疫细胞化学检测干细胞标志物;PAS检测糖原表达。结果在体外培养条件下,PDMSCs贴壁生长为成纤维样细胞,CD44表面标志物检测阳性;PDMSCs经胎肝滤液诱导14d时细胞呈现圆形、卵圆形的特征性改变,AFP、CK19表达阳性。结论胎肝滤液能够诱导PDMSCs定向分化为肝细胞样细胞。
- 王晓萃吴金生于树娜蒋吉英丁洁
- 关键词：胎盘间充质干细胞诱导分化肝细胞
- 连接蛋白26在肝细胞癌中的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的：研究Cx26在肝细胞癌及正常肝组织中的表达情况。方法：免疫组化和RT-PCR检测Cx26和PCNA的表达。结果：①Cx26mRNA在正常肝组织组和肝癌组的表达水平分别为0．82±0．37和0．38±0．10；Cx26mRNA在HCC高分化组中的表达高于其在低分化组中的表达水平，分别为0．48±0．12和0．21±0．05。②Cx26在所有正常肝组织中均高表达，其在肝癌组织中的阳性率为64．71％，Cx26的表达随着肝癌分化程度的增加而增强。③在肝癌组织中，PCNA-LI在Cx26蛋白阳性表达组和阴性表达组分别为32．72％±4.21％和56．67％±7．21％，Cx26蛋白阳性者的PCNA-LI明显低于阴性者，PCNA表达水平与Cx26蛋白表达呈负相关。结论：①在肝癌组织中，Cx26的表达随着组织分化程度的降低而降低。②Cx26可作为评价肝癌预后的指标之一。
- 魏德全杨展蒋吉英郑洁于树娜丁洁李进
- 关键词：增殖细胞核抗原肝细胞癌
- HepG2细胞在不同琼脂糖浓度下克隆形成能力的比较被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨分离细胞克隆的最佳细胞密度和最适琼脂浓度,为肿瘤干细胞的筛选提供更广阔的思路.方法:将HepG2单细胞悬液与10g/L的琼脂糖相混合,在2g/L(A组)和3g/L(B组)琼脂中接种不同密度的HepG2细胞,14d后观察克隆形成.结果:100-1000个/孔的各个实验组中,A组细胞的克隆数高于B组,差异有统计学意义(t=4.36,P<0.05);在细胞密度为100-500个/孔时,A、B组细胞克隆形成率随着细胞密度的增加逐渐增加;600-1000个/孔,A、B组均随着细胞密度的逐渐加大,克隆形成率呈现下降趋势.结论:在进行软琼脂克隆形成实验时,可以采用2g/L的上层琼脂浓度,并采用10g/L的琼脂糖凝胶作为储备胶,HepG2细胞在500个/孔时的克隆形成率最高.
- 丁洁魏德全蒋吉英王宝松姜栋栋于树娜王晓萃
- 关键词：HEPG2细胞克隆形成率
- LRP、GST-π在肝细胞癌中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨LRP、GST-π在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测LRP和GST-πmRNA及蛋白在34例的肝细胞癌、19例正常肝组织中的表达。结果:LRP和GST-πmRNA的表达在肝癌组为0.53±0.28、0.75±0.19,正常肝组织组为0.22±0.10、0.26±0.12,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,LRP和GST-π的阳性表达率在肝癌组为55.88%、67.65%,在正常肝组织组为21.05%、31.58%,差异有统计学意义(P<0.05)。LRP、GST-πmRNA和蛋白在肝癌组的表达高于正常肝组织组,且低分化(Ⅲ、Ⅳ级)肝癌组织的表达高于高分化者(Ⅰ、Ⅱ级)(P<0.05),LRP与GST-π之间的表达无线性相关。结论:在肝细胞癌中存在原发性多药耐药现象,且多种耐药机制并存。LRP、GST-π在肝细胞癌中高表达,且随着肿瘤分化程度的增高而降低。
- 于树娜蒋吉英赵世福魏德全丁洁王宝松姜栋栋
- 关键词：多药耐药肝细胞癌免疫组织化学染色
- HepG2及其克隆形成细胞的耐药特征和对奥沙利铂的药敏异质性研究
- 2011年
- 目的 探讨HepG2细胞及克隆形成细胞的耐药特征及其对奥沙利铂的药敏异质性.方法利用软琼脂克隆形成实验分离克隆形成细胞,检测奥沙利铂对HepG2及其克隆形成细胞的抑制率和P-gp的表达.结果HepG2细胞的生长较克隆形成细胞慢；奥沙利铂对HepG2细胞的抑制作用高于克隆形成细胞；P-gp蛋白在HepG2细胞的表达较克隆形成细胞低.结论①P-gp蛋白的表达以及HepG2细胞对奥沙利铂的反应存在异质性.②克隆形成细胞具有肿瘤干细胞的耐药特征.
- 赵金岭姜红心丁洁史才兴于树娜王宝松蒋吉英
- 关键词：多药耐药HEPG2细胞奥沙利铂
- 三种因子联合诱导对大鼠胎盘间充质干细胞向肝细胞分化的研究
- 王晓萃丁洁王宝松姜栋栋赵金岭
- ABC转运蛋白在肝细胞癌中的表达及意义被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨P-gp、MRP1、BCRP等ABC转运蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测P-gp/MDR1、MRP1、BCRP等mRNA及蛋白在34例的肝细胞癌、19例癌旁肝组织中的表达。结果:MDR1、MRP1、BCRP等mRNA在肝癌组的相对表达水平分别为1.15±0.24、0.64±0.33、1.07±0.32,在癌旁肝组织组的相对表达水平分别为0.36±0.14、0.19±0.06、0.31±0.09。MDR1、MRP1、BCRP在肝细胞癌中低分化组(Ⅲ、Ⅳ级)为1.38±0.26、0.73±0.35、1.34±0.21,在高分化组(Ⅰ、Ⅱ级)分别为0.74±0.32、0.30±0.11、0.45±0.13。P-gp、MRP1、BCRP等的阳性反应产物主要分布于细胞膜和胞浆内;在肝癌组和癌旁肝组织组的阳性表达率分别为82.35%、58.82%、79.4l%和42.11%、26.32%、36.84%。P-gp、MRP1、BCRP在肝细胞癌中低分化组(Ⅲ、Ⅳ级)的阳性表达率分别为100%、81.25%、100%,在高分化组(Ⅰ、Ⅱ级)的阳性表达率分别为66.67%、38.89%、61.11%。RT-PCR及免疫组织化学均显示,P-gp、MDR1、MRP1、BCRP mRNA和蛋白在肝癌组的表达均高于癌旁肝组织组,且在低分化(Ⅲ、Ⅳ级)肝癌组织的表达高于高分化者(Ⅰ、Ⅱ级),差异有统计学意义(P<0.05)。MDR1、MRP1、BCRP之间的表达无线性相关。结论:在肝细胞癌中存在原发性多药耐药现象,且多种耐药机制并存。P-gp、MDR1、MRP1、BCRP等与肝细胞癌的耐药有关,在肝癌组的表达高于癌旁肝组织组,且在肝细胞癌中的表达随着肿瘤分化程度的增高而降低,可作为肝细胞癌多药耐药性作用的靶点。
- 于树娜蒋吉英赵世福魏德全丁洁王宝松姜栋栋
- 关键词：多药耐药肝细胞癌免疫组织化学染色
- 芦荟大黄素、阿霉素联合应用对肝癌HepG2细胞增殖的影响被引量：3
- 2009年
- 目的体外观察芦荟大黄素(AE)、阿霉素(ADM)单用及联合应用对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法采用MTT法观察不同浓度AE、ADM单独和联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用,并计算两药相互作用系数(CDI),检验两药联合协同性。结果两药单独作用48 h对HepG2细胞的抑制率,随着药物浓度的增加均相应增加,呈剂量依赖性。两药联合作用48 h对HepG2细胞的抑制率,较同剂量单独用药亦有相应增加;CDI分析显示两药联用在相应浓度下具有协同性,而且两个联合用药组表现为协同性显著。结论芦荟大黄素、阿霉素单用及联用对人肝癌HepG2细胞有增殖抑制的作用,且两药联合具有协同性。
- 蒋杰宋春明李建华丁洁
- 关键词：芦荟大黄素阿霉素肝癌HEPG2细胞MTT法
- 三种因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化
- 2009年
- 背景:间充质干细胞的生物学特性及影响分化调控因子的研究认为,体外原代培养的间充质干细胞自然分化为肝细胞的比例较低,选择一种合适的诱导剂提高其分化为肝细胞的比例尤为必要。目的:以肝细胞生长因子、表皮生长因子及成纤维生长因子体外联合,验证其诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-08在潍坊医学院实验中心完成。材料:Sprague-Dawley大鼠40只,由潍坊医学院实验动物中心提供。方法:采用贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,取传至第3代细胞,设立2组:空白对照组加入含体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养基;联合诱导组在此基础上,另加入10μg/L成纤维生长因子、8μg/L肝细胞生长因子、8μg/L表皮生长因子。主要观察指标:倒置显微镜观察诱导后细胞形态变化,免疫荧光染色观察甲胎蛋白及白蛋白的表达,PAS检测糖原的表达,靛青绿摄入情况,酶学检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶的水平。结果:联合诱导组细胞呈多角形、卵圆形或圆形细胞的特征性改变,空白对照组骨髓间充质干细胞仍保持梭形或纺锤形。联合诱导组培养14d可见白蛋白和甲胎蛋白免疫反应阳性细胞;诱导7d时偶见PAS阳性细胞与靛青绿阳性细胞,随诱导时间延长,阳性细胞逐渐增多;诱导14d时开始检测到谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶的合成,21d达高峰,之后下降。上述各指标空白对照组细胞均呈阴性。结论:成纤维生长因子、肝细胞生长因子与表皮生长因子体外联合应用,能够成功诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化。
- 吴金生朱建祥蒋吉英王晓萃丁洁于树娜魏德全王宝松
- 关键词：骨髓间充质干细胞成纤维生长因子肝细胞生长因子表皮生长因子肝细胞
- 骨髓干细胞向肝细胞分化的研究进展
- 2007年
- 杨展魏德全于树娜丁洁蒋吉英
- 关键词：肝细胞分化骨髓干细胞血管内皮细胞软骨细胞胚胎干细胞骨骼肌细胞
