余坚
- 作品数：48 被引量：124H指数：6
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅科研项目湖南省自然科学基金湖南省科技厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 核酸疫苗佐剂的研究进展被引量：2
- 2010年
- 免疫佐剂是一种免疫调节剂,可增强抗原的免疫原性、提高免疫效果。为增强疫苗的免疫原性,在病毒性疫苗、DNA疫苗、多肽疫苗的研制中通常需加入免疫佐剂。随着DNA疫苗研究的深入和扩展,推动了用于提高DNA疫苗免疫效果的免疫佐剂的研究。本文就常用佐剂的研究进展作一综述。
- 余坚赵飞骏吴移谋
- 关键词：免疫佐剂免疫原性疫苗
- NO-1886调节糖代谢和脂代谢的作用及机制
- 王宗保尹卫东唐朝克席守民易光辉刘录山余坚
- 项目从“代谢征候群”研究的新进展出发，提出从改善脂代谢以改善糖代谢和治疗糖尿病的新策略，系统地对NO-1886这一新药的药理、药效进行了较深入的研究，对认识糖尿病、脂代谢紊乱机制有重要的学术意义，对临床防治糖尿病有开发应...
- 关键词：
- 关键词：糖代谢脂代谢
- 人CD98基因与宁乡花猪精子共孵育实验研究
- 目的 将精子与慢病毒载体共同孵育,探讨外源基因转染细胞的效率,优化筛选最佳条件.方法 1利用基因工程技术将目的基因SLC3A2序列片段连接到LV5载体上,构建其基因重组载体,然后进行病毒包装,最后用荧光定量PCR进行病毒...
- 王宗保丁婧璇肖国华姚艳余坚张素君王其保
- 关键词：精子载体法慢病毒载体基因
- 白介素2与梅毒螺旋体膜蛋白Gpd双价核酸疫苗的免疫活性及保护作用研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨白介素2（IL-2）基因与梅毒螺旋体（Treponema pallidum，Tp）Gpd抗原编码基因融合构建双价核酸疫苗免疫新西兰兔后的免疫应答效果及感染Tp后的保护作用。方法定向克隆构建真核表达重组体pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2，与先期构建的pcDNA3．1（＋）／Gpd真核表达重组体分别设为两个疫苗实验组，同时设pcDNA3．1（＋）空质粒对照组及PBS对照组，共4组，每组18只雄性新西兰兔，肌肉多点注射初次免疫，于初次免疫后第10周各实验组兔皮下接种Tp标准株进行感染实验，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同时间点免疫兔特异性抗体产生水平和脾细胞IL-2及干扰素γ（IFN-γ）诱导水平，噻唑蓝法检测兔脾淋巴细胞增殖水平。结果用pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2融合双价疫苗和pcDNA3．1（＋），Gpd单基因疫苗在免疫期间和感染期间均能检测到高滴度的IgG特异性抗体，最高滴度分别可达1：4096和1：1024（P值均〈0．01）；两疫苗组之间在免疫及感染期间不同时间点比较差异也有统计学意义（P值均〈0．01）；免疫后第8周双价融合核酸疫苗组及单基因核酸疫苗组兔脾细胞培养上清中IFN-γ分别为（447±22．4）μg／L、（225±17．6）μg／L，IL-2分别为（167±15．7）μg／L、（110±12．6）μg／L，均高于空质粒对照组和空白对照组（P值均〈0．01）；感染期间不同时间点兔脾细胞受相应蛋白刺激均有明显增殖反应，检测指标均显著高于空质粒对照组和空白对照组（P值均〈0．01）。早期感染皮损观察显示双价融合核酸疫苗组较之单基因疫苗组有着更低的皮损Tp检测阳性率（17．5％）、溃疡病灶发生率（15％）以及更短的皮损愈合时间。结论用pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2双基因融合疫苗在兔体内能更有效地诱导保护性体液免疫和细胞免疫应答。
- 余坚赵飞骏张晓红顾伟鸣刘双全曾铁兵张跃军裴瑞青吴移谋
- 关键词：GPD
- 高糖高脂联合低剂量STZ诱导版纳微型猪2型糖尿病动物模型的建立被引量：13
- 2012年
- 目的用云南版纳微型猪建立一种新的2型糖尿病模型,探讨高糖高脂联合链脲佐菌素(STZ)对糖、脂代谢及肝、肾、胰组织结构的影响。方法高糖高脂联合低剂量STZ诱导云南版纳微型猪2型糖尿病模型,观察其血糖、胰岛素、血脂的变化,并对其肝、肾、胰组织结构的病理改变进行研究。结果喂养12月后,与正常对照组比较,模型组空腹血糖值明显升高,血清总胆固醇、甘油三酯水平升高(P<0.05),胰岛β细胞受损,脂肪变性明显,胰岛数量明显减少,胰岛内细胞数目亦减少,胞核浓染、缩小,红染加深;肝脏脂肪样变性,肝细胞索排列紊乱,肝细胞肿胀呈气球样变,肾小球肥大,硬化,肾小球内细胞增多,空泡变性。结论高糖高脂联合STZ可诱导版纳微型猪发生胰岛素抵抗、糖尿病,既表现2型糖尿病的特征,又表现1型糖尿病的特征,成功模拟了人类2型糖尿病的发病过程。
- 肖国华张素君余坚高天舒王月婷张亚丽王宗保
- 关键词：链脲佐菌素2型糖尿病版纳微型猪
- 贵州小型猪2型糖尿病动物模型的建立被引量：15
- 2004年
- 目的 建立贵州小型猪 2型糖尿病模型 ,并观察其胰腺结构变化。方法 将贵州小型猪1 0头随机分为 2组 ,5只饲以基础饲料作为正常组 (A组 ) ,5只饲以高脂高糖饲料作为实验组 (B组 )。共观察 6个月。在 0 ,2 ,3,4,5 ,6月末采取动物禁食过夜后空腹血 ,测定血浆中血糖和血清中胰岛素。于第 6个月末 ,全部处死动物 ,取动物胰腺。取一部分胰腺用 1 0 %甲醛溶液固定 ,常规石蜡包埋切片 ,H .E染色 ,光学显微镜下观察 ;另一部分胰腺用 2 .5 %戊二醛固定 ,常规电镜样品制备 ,透射电镜下观察并照相。结果 实验组 2个月后即出现高血糖 ,并随时间延长而逐渐升高 ,对照组血糖未见升高 ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。实验组血清胰岛素稍有升高 ,3个月后逐渐降低 ,6个月后明显降低 ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。实验组胰腺组织表现为胰岛萎缩 ,胰岛边缘皱缩 ,胰岛数目减少 ,胰岛内细胞数量亦减少 ,多数细胞呈梭形 ,细胞核呈杆状 ,胰岛周围少量淋巴细胞浸润 ,出现空泡变性。透射电镜下观察到实验组胰岛 β细胞肿胀 ,部分结构溶解、细胞呈空化 ,细胞颗粒溶解或脱落 ,胰岛周围细胞内可见较大的脂滴。α细胞结构有局灶溶解呈空泡状结构 ,腺泡细胞内粗面内质网模糊 ,部分扩张严重。结论 高脂高糖饲料可诱发?
- 姚峰王宗保谭翔文余坚尹卫东
- 关键词：高脂高糖小型猪2型糖尿病胰腺
- IL-2基因佐剂强化梅毒螺旋体外膜蛋白Tp92 DNA疫苗的免疫保护性研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察IL-2基因佐剂与梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白Tp92抗原编码基因DNA疫苗联合免疫新西兰兔后对Tp皮肤感染的免疫保护效果。方法将体重约3kg的新西兰兔随机分为pcDNA3.1(+)/IL-2+pcDNA3.1(+)/Tp92联合免疫组,pcDNA3.1(+)/Tp92免疫组,pcDNA3.1(+)空质粒组及PBS空白组共4组,每组18只,每隔2周免疫一次,共免疫3次,初次免疫后第10周进行Tp皮肤感染,观察并记录感染早期各组家兔皮损情况;ELISA检测感染后不同时间点免疫兔血清特异性抗体水平和脾细胞IL-2及IFN-γ水平;MTT法检测感染后不同时间点兔脾淋巴细胞增殖水平。结果 IL-2+Tp92DNA疫苗联合免疫组在Tp感染后0～224d期间的不同时间点均检测到高滴度的特异性IgG,与Tp92DNA疫苗组及各对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);感染后第14d联合免疫组兔脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-2水平均显著高于Tp92单独免疫组(P<0.05)及空质粒对照组和空白对照组(P<0.01),感染后不同时间点兔脾细胞均有明显增殖反应,SI值显著高于同期Tp92单独免疫组(P<0.05)及空质粒对照组和空白对照组(P<0.01)。Tp感染早期联合免疫组家兔皮损Tp阳性率为20%,溃疡病灶形成率为10%,皮损愈合时间为48d。结论 IL-2基因佐剂和Tp92DNA联合免疫能有效地诱导新西兰兔在Tp感染期间产生稳定持久保护性免疫应答,并能阻止Tp皮肤感染部位病损的发展。
- 赵飞骏张晓红吴华曾铁兵刘双全曹训宇陈曦余坚
- 关键词：梅毒螺旋体IL-2联合免疫免疫保护
- 梅毒螺旋体膜蛋白抗原表位的筛选与鉴定
- <正>目的梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白Tp0751和TprF在诱导兔保护性免疫应答中发挥重要作用,是重要的梅毒候选疫苗分子。本研究筛选和鉴定Tp0751和TprF潜在的B细胞表位,为Tp...
- 曾铁兵蔡嘉怡姚玲赵飞骏余坚朱洪江银波吴移谋
- 文献传递
- 梅毒螺旋体重组蛋白Tp0608的表达与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的表达梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0608(rTp0608)并鉴定其抗原性,为深入探讨其在梅毒血清学诊断中的价值奠定基础。方法 PCR扩增Tp0608全长基因,构建原核表达重组体pET-28a(+)/Tp0608,转化宿主菌诱导表达rTp0608,Ni-NTA亲和层析法纯化蛋白,SDS-PAGE分析蛋白表达形式与纯度,Western blot鉴定rTp0608的抗原性。结果原核表达重组体pET-28a(+)/Tp0608在宿主菌内经诱导表达了分子量大约为38 kDa的重组蛋白,以包涵体表达形式为主,纯化蛋白的纯度>95%;Western blot结果显示纯化蛋白能被梅毒患者混合血清特异性识别。结论 PET-28a(+)表达载体高效表达了rTp0608,该重组抗原有良好的抗原性。
- 刘小军牛淑会蔡嘉怡赵飞骏余坚姚玲吴移谋曾铁兵
- 关键词：梅毒梅毒螺旋体重组抗原抗原性
- 抑制T细胞增殖的抗CD45单克隆抗体的建立
- 2014年
- 目的寻找能调节T细胞功能的相关分子,进行与T细胞介导的自身免疫性疾病相关的研究。方法从BALB/c小鼠骨髓中收集树突状细胞,免疫Wistar大鼠,进行细胞融合,建立杂交瘤细胞系。筛选得到很多株能调节T细胞功能的杂交瘤细胞系,对其中一株最能抑制T细胞增殖的杂交瘤细胞系进行了进一步的深入研究。结果显示其目标分子是CD45,同时增殖实验结果显示该抗体能显著抑制T细胞增殖反应。结论抗CD45单克隆抗体能有效抑制T细胞增殖,有望将本抗体用于T细胞介导的自身免疫性疾病的相关预防及治疗中。
- 苏泽红李亚林谭翔文余坚刘鑫袁月亲练高建
- 关键词：CD45单克隆抗体T细胞增殖树突状细胞小鼠
