刘乐和
- 作品数：21 被引量：42H指数：4
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- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 人脐静脉内皮细胞的培养和连续传代被引量：2
- 1993年
- 本实验用新生小牛视网膜提取物作血管内皮细胞生长促进剂,成功地使人脐静脉内皮细胞在体外连续培养23代以上。细胞倍增时间平均为16.6h,细胞传代时间平均为5 d,传代比率为1:2～1:3。用ABC法证明细胞内存在Ⅷ因子相关抗原(FⅧr-Ag),透射电镜下可见胞浆内含WP(Weibe1-Palade)小体,证实所培养的细胞为血管内皮细胞。
- 江丽芳刘乐和郭辉玉
- 关键词：人脐静脉内皮细胞胞浆细胞内连续传代透射电镜
- EBV转化淋巴细胞与EBV相关细胞核基质蛋白分析被引量：2
- 1999年
- ［目的］研究脐淋巴细胞与ＥＢＶ转化淋巴细胞（ＬＣＩｓ），ＥＢＶ相关细胞核基质蛋白（ＮＭＰｓ）之间的关系，分析鉴定ＥＢＶ感染细胞后的ＮＭＰｓ特异性改变，探讨ＮＭＰｓ与ＥＢＶ转化及肿瘤形成的关系。［方法］ＥＢＶ转化淋巴细胞；改良方法提取ＮＭＰｓ；制备ＮＭＰｓ免疫小鼠血清；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳及双波长蛋白薄层扫描方法分析ＮＭＰｓ；免疫蛋白印迹分析ＮＭＰｓ与抗ＮＭＰｓ的阳性血清之间的反应性。［结果］获得ＥＢＶ转化淋巴细胞。获得五种细胞ＮＭＰｓ。各细胞间分子量相同的蛋白约占各自细胞组分的５２．１％～５９．６％。脐淋巴细胞３０ＫＤ～４０ＫＤ蛋白较多，而ＬＣＬｓ和ＥＢＶ相关淋巴细胞中，高分子量的蛋白比较多。－６４ＫＤ ＮＭＰ特异地存在于ＬＣＬｓ及ＥＢＶ相关细胞中。ＮＰＣ病人血清中能够检出抗ＬＣＬｓ的ＮＭＰｓ抗体。［结论］ＬｅｕＬｅｕ－ＯＭｅ和环孢菌素Ａ结合使用，可促进ＥＢＶ转化。低分化的脐淋巴细胞比高分化ＬＣＬｓ有更稳定的核基质网架结构。推测相同分子量ＮＭＰｓ构成核基质的结构成分；ＥＢＶ感染细胞后，ＮＭＰｓ有明显的变化。ＮＭＰｓ的特异性与ＥＢＶ感染高度相关；ＥＢＶ转化与ＮＰＣ的发生有一定关系。
- 施文钧刘乐和
- 关键词：核基质蛋白
- 硕士生医学微生物学教学的思考被引量：2
- 2000年
- 黄俊琪江丽芳赖小敏方丹云陈元晏辉钧刘乐和郭辉玉
- 关键词：医学微生物学教学改革
- 食管癌转移淋巴结放免显像定位的研究被引量：2
- 2000年
- 目的：为放射免疫显像在诊断食管癌淋巴结转移中的应用，提供基础研究支持。方法：①免疫组化(LSAB法)测定不同组织冷冻切片和抗人食管鳞癌单抗G9的反应；②125I标记G9，形成标记化合物，在荷食管癌裸鼠腹腔注射125I-G9后的连续3天内，测定各主要组织、器官的放射性。结果：①LSAB显示，食管癌原发灶和转移淋巴结呈阳性反应，正常食管和无转移淋巴结阴性。②125I-G9在裸鼠体内分布显示，肿瘤组织的放射性计数均明显高于其它器官/组织；各器官/组织的T/NT值在2～7之间；放射自显影的结果也显示，肿瘤部位有大量的放射性浓集。结论：①单抗G9能选择性定位于食管癌原发灶与转移淋巴结的癌细胞胞膜。②125I-G9在荷食管癌裸鼠有肿瘤组织导向作用，显像效果良好，提示放射免疫显像在食管癌转移淋巴结定位，有潜在的临床应用前景。
- 戎铁华林鹏张昌卿肖锡宾刘长征何军芳梁昌盛叶燕丽刘乐和
- 关键词：放射免疫显像食管肿瘤淋巴结转移
- 牛视网膜提取物对人-鼠杂合细胞抗体产生的影响
- 1999年
- 目的：探讨牛视网膜提取物对人－鼠杂合细胞抗体产生的影响。方法：在ＰＲＭＩ１６４０完全培养基（ＣＭ）中加入２０ｍｇ／Ｌ牛视网膜提取蛋白，配成牛视网膜培养基（ＢＲＥＭ）。用ＭＴＴ测定、细胞克隆技术、夹心ＥＬＩＳＡ方法和染色体分析，比较人－鼠杂合细胞Ｇ１２在两种培养条件下的细胞活力、克隆效率、人ＩｇＭ分泌和人染色体阳性细胞比率之间的差异。结果：用ＢＲＥＭ培养的Ｇ１２细胞活力高于用ＣＭ培养（Ｐ＜００５）。用ＢＲＥＭ培养的Ｇ１２细胞克隆中分泌人ＩｇＭ者占１２／２４，用ＣＭ培养的克隆只占２／４７。Ｇ１２细胞传代培养３个月后，用ＢＲＥＭ培养的上清人ＩｇＭ水平Ａ４９０为０３３５±００５０，用ＣＭ培养的上清为００７０±００２７（Ｐ＜００５）。前者含人染色体阳性的细胞为２０％，后者２５％，两者间没有差异（Ｐ＞００５）。结论：添加牛视网膜提取物的培养基可以提高人－鼠杂合细胞的活力和人ＩｇＭ抗体的分泌能力。维持人源性ＩｇＭ持续分泌的条件不仅取决于杂合细胞中人染色体的存在和稳定，还有其它未知因素在起作用，牛视网提取蛋白可以提供这方面的需要。
- 张昌卿刘乐和肖锡宾何凤仪高世梅方丹云欧深明
- 关键词：抗体BRE
- 食管癌旁组织核基质蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：1
- 2000年
- 目的制备抗食管癌旁组织核基 质蛋白的特异性单抗。方法SDS-PAGE分析正常食管 组织、食管癌旁组织及食管癌组织核基质蛋白间的差异。用食管癌旁组织核基质蛋白做免疫 原免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备了5株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并 对9-1-2/D、9-1-7/D 2株细胞作了初步鉴定。结果免疫组化分析发现9-1-2/D单抗与食管癌及正常食管组织均有反应,而9-1-7/D单抗 只与食管癌组织反应,与正常食管组织无反应。Western Blotting分析显示:9-1-2/D 单抗与电泳图谱上正常食管组织核基质和食管癌旁组织核基质52 kD的蛋白反应,而与食 管癌组织核基质55 kD的蛋白反应。9-1-7/D单抗只与电泳图谱上食管癌旁组织及癌组织 核基质46 kD的蛋白反应,与正常食管组织核基质无反应。结论本实验为食管癌的早期诊断作了初步有意义的探讨。
- 张新梅林汉良刘乐和张昌卿钟叔平曾金云郑克立
- 关键词：食管癌核基质蛋白癌旁组织
- 急性单核细胞白血病细胞核基质蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2001年
- 目的 :制备抗急性单核细胞白血病细胞核基质蛋白的特异性单抗。方法 :SDS- PAGE分析正常骨髓细胞与急性单核细胞白血病细胞核基质蛋白的差异。用急性单核细胞白血病细胞核基质免疫 Balb/ c小鼠 ,利用杂交瘤技术制备了一株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 8E7,并对其作了初步鉴定。结果 :免疫组化结果显示 ,8E7单抗与急性单核细胞白血病细胞核仁和胞质反应 ,与正常骨髓单核细胞胞核及红白血病细胞株 K5 6 2细胞胞质反应。Western Blotting结果表明 ,8E7单抗与电泳图谱上急单白血病细胞核基质 94k D的蛋白反应 ,与正常骨髓细胞核基质 2 7k D的蛋白反应。结论 :对 8E7单抗反应蛋白的进一步研究有助于阐明白血病的发病机制。
- 张新梅李娟刘乐和杨国平童秀珍洪文德区深明
- 关键词：核基质急性单核细胞白血病单克隆抗体
- 抗2型登革病毒特异性免疫球蛋白重链可变区基因的扩增与纯化
- 1999年
- 提取抗２ 型登革病毒单克隆抗体杂交瘤细胞ｍ ＲＮＡ 和总ＤＮＡ，反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ ＰＣＲ） 和ＰＣＲ 扩增并纯化特异性免疫球蛋白重链可变区（ＶＨ） 基因。琼脂糖凝胶和聚丙烯胺凝胶电泳观察结果，该ＶＨ 基因约４５０ ｂｐ 。实验证明，上述两种方法均是分离和扩增ＶＨ 基因的有效方法，但提取ＤＮＡ 后进行ＰＣＲ 较提取ｍＲＮＡ 进行ＲＴ－ ＰＣＲ经济、简单。
- 左丽刘乐和郭辉玉
- 关键词：重链可变区基因单克隆抗体登革热病毒
- 放射免疫显像在食管癌分期中的应用被引量：1
- 2001年
- 目的探讨放射免疫显像(RII)在食管癌分期的应用。方法1LSAB法测定组织切片和抗人食管鳞癌单抗G9的反应;2125I标记G9,在荷食管癌裸鼠腹腔注射125IG9后的连续3d内,测定各主要组织、器官的放射性;3食管鳞癌术前经纤维食管镜在原发灶周围黏膜下注射131IG9后行RII;4对清扫淋巴结行放射性测定。结果1LSAB显示癌原发灶和转移淋巴结呈阳性,正常食管和淋巴结阴性;2125IG9在裸鼠体内分布显示,肿瘤组织的放射性计数均明显高于其它器官/组织;3镜下注药48h时RII在食管旁纵隔、贲门旁、胃小弯旁出现散在的细点状放射性浓集,浓集区域所清扫的淋巴结中,包含有转移淋巴结;无浓集区域,未发现转移淋巴结;4全部有转移淋巴结的放射性比活度均比无转移者高,且均数高出两倍多。结论1单抗G9能选择性定位于食管鳞癌细胞膜;2125IG9在荷食管癌裸鼠有肿瘤组织导向作用,显像效果良好;3用131IG9在食管鳞癌行RII,对转移淋巴结有定位作用可作为cTNM分期的选择手段。
- 林鹏戎铁华刘长征樊卫刘乐和何军芳张昌卿肖锡宾
- 关键词：放射免疫显像食管肿瘤淋巴结转移
- 两种免疫方法用于制备抗肝癌NMP mAb的比较
- 1999年
- 黄俊琪刘乐和
- 关键词：单克隆抗体免疫方法
