刘兴宝
- 作品数：15 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国科学院大连化学物理研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划中国科学院知识创新工程大连市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学化学工程更多>>
- 一种来源于Leifsonia shinshuensis DICP 16菌体的β-D-木糖苷酶的分离纯化及其性质被引量：9
- 2008年
- 采用盐析、DE52、Q-SepharoseFast Flow阴离子交换层析、Toyopearl Butyl 650C疏水层析以及Sephacryl S-300HR凝胶过滤层析联用的方法,从Leifsonia shinshuensis DICP 16菌体中纯化出一种β-木糖苷酶。分离后该酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带,通过SDS-PAGE和凝胶过滤层析法,测得该酶是一个由两个分子量约为91kD的相同亚基组成的同源二聚体。其水解对硝基苯酚木糖苷（pNPX）的最适反应温度为55°C,pH值为7.0。该木糖苷酶在45°C以下,pH6.0-11.0之间具有很好的稳定性。在45°C,pH值为7.0的条件下,水解pNPX的Km,Vmax分别为1.04mmol/L,0.095mmol/（min·mg）。研究不同的金属离子对该酶的活性影响,发现Fe^2＋和Cu^2＋是很强的抑制剂。通过对天然木糖苷化合物的水解测试,发现该酶可以水解人参皂苷Rb3的木糖基,产生人参皂苷Rd,却不能水解紫杉烷木糖苷的木糖基。
- 栾宏伟胡莹刘兴宝郝大程杨凌
- 关键词：Β-木糖苷酶分离纯化
- 一种紫杉醇的制备方法
- 本发明提供一种紫杉醇的制备方法，将原料7-木糖-10-去乙酰紫杉醇（10DAXT）经过预处理转化得到紫杉醇混合物（预处理步骤包括臭氧氧化、C-7位去木糖基反应、C-10位引入乙酰基反应等步骤），将得到的紫杉醇混合物进行柱...
- 杨凌杜逊甫刘兴宝盛武林
- 文献传递
- 大孔吸附树脂提取7-木糖-10-去乙酰紫杉醇酶解产物10-去乙酰紫杉醇被引量：4
- 2009年
- 本研究利用大孔树脂富集7-木糖10-去乙酰紫杉醇的酶解产物10-去乙酰紫杉醇。首先以10-去乙酰紫杉醇(10-DAT)绝对含量为指标,通过HPLC测定比较HP20、XAD4、XAD16、XAD1600四种大孔树脂对10-去乙酰紫杉醇的吸附与解吸性能力,筛选出最佳树脂XAD1600进行实验。最佳的吸附解吸条件为:树脂柱高径比10∶1,吸附流速20mL/min,吸附量23.85mg/mL,以6倍柱床体积的90%乙醇为洗脱液,洗脱流速20mL/min。经XAD1600型树脂富集后10-去乙酰紫杉醇回收率达96.5%,含量20.5%。且树脂柱重复使用3次后,其吸附能力仅降低5%。
- 刘兴宝栾宏伟葛广波闫黎杨凌
- 关键词：大孔树脂
- 一种制备高纯度五味子甲素的方法
- 一种制备高纯度五味子甲素的方法，将含有五味子甲素的粗提物经过硅胶柱，再用不同比例的溶剂进行洗脱，合并含有目标物组分，蒸干后进行结晶及重结晶，最终得到五味子甲素纯品。本发明方法载样量大，分离效率好，回收率高，成本低廉，可实...
- 杨凌刘兴宝王子阳刘勇刘爽
- 文献传递
- 一种木糖苷酶Xyl_S及其编码基因与应用
- 一种木糖苷酶Xyl_S及其编码基因与应用，该木糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，其核苷酸编码序列如SEQ ID NO.1所示。该酶可以采用基因工程方法或者人工合成方法制备，具有β-木糖苷水解酶和β-葡萄糖苷...
- 杨凌窦同意栾宏伟刘兴宝李世阳
- 文献传递
- 一种纤维化纤维微细菌菌株及其应用
- 一种纤维化纤维微细菌菌株及其应用，该菌株为纤维化纤维微细菌（Cellulosimicrobium cellulans）菌株F16，保藏号为CCTCC M2013201，保藏日期为2013年5月；该菌株F16或其发酵产生的...
- 杨凌窦同意栾宏伟刘兴宝侯琨
- 文献传递
- 一种紫杉醇木糖苷化合物的制备方法
- 本发明涉及一种紫杉醇木糖苷化合物的制备方法，该方法是从可再生红豆杉资源中制备7-木糖10-去乙酰紫杉醇化合物，以高产7-木糖10-去乙酰紫杉醇化合物的可再生红豆杉如南方红豆杉（<I>Taxus Chinesis var ...
- 杨凌刘兴宝栾宏伟杜逊甫
- 文献传递
- 紫杉醇的工业色谱制备技术
- 杨凌何克江杨义刘兴宝都绛瑛
- 以工业色谱技术系统为基础、技术原则为指导，开发了除杂彻底、回收率高、操作简便的前处理技术HY，建立了可规避溴化的具有高度选择性的色谱系统HY1、HY2和HY3，实现了紫杉烷系列化合物的回收利用，从而建立了具有自主知识产权...
- 关键词：
- 关键词：收率紫杉醇
- 纤维化纤维单胞菌、水解酶及其在紫杉烷转化方面的用途
- 本发明提供了有效转化紫杉烷木糖苷为紫杉醇或其类似物的纤维化纤维单胞菌及其水解酶，并提供了一种新的通过生物转化反应制备紫杉醇及其类似物的有效方法。此方法可以高效、廉价、环保的制备紫杉醇及其类似物，为充分利用紫杉烷资源提供了...
- 杨凌栾宏伟刘兴宝
- 文献传递
- 工业色谱法分离制备7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇酶解产物10-去乙酰紫杉醇被引量：3
- 2012年
- 基于工业色谱法分离制备抗癌药物紫杉醇的半合成前体10-去乙酰紫杉醇(10-DAP)。7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇(10-DAXP)在我国特有红豆杉品系(中华红豆杉)枝叶中含量丰富,以其为原料可制备紫杉醇最理想的半合成前体——10-DAP。本研究以部分纯化后的7-木糖基-10-去乙酰紫杉烷为原料,通过β-木糖苷酶水解该粗提物中的主要成分10-DAXP及其两个微量类似物7-木糖基-10-去乙酰三尖杉宁碱(10-DAXC)和7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇C(10-DAXP C),脱去其C-7位上的木糖基,水解产物采用大孔吸附树脂吸附,正相快速柱分离和反相制备色谱分离,可获得高纯度的目标物10-DAP,产物纯度为96%,整个工艺的收率大于75%。该方法适合以10-DAXP为原料大规模制备紫杉醇的半合成前体化合物10-DAP,为工业化生产紫杉醇开辟了一条新途径。
- 刘兴宝栾宏伟葛广波侯琨杜逊甫杨凌
- 关键词：制备色谱紫杉醇
