卢艳
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：国家人类基因组北方研究中心更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人类新细胞因子筛选及功能研究 ——人CLPSL3及其同源基因克隆和功能筛选
- 目前,功能基因组学已成为生物学和医学研究的重点。本室(国家人类基因组北方研究中心)经过序列校正与分析,已构建了1000个以上未知功能基因为主的人类基因全长ORF及其不同剪接体的真核表达文库。本课题对其中的一员hCLPSL...
- 卢艳
- 关键词：克隆
- 文献传递
- 人辅脂酶样3基因hCLPSL3及其同源基因cDNA克隆及鉴定
- 2012年
- 为发现新的辅脂酶样家族成员,通过EST拼接获得1个新的人类辅脂酶样蛋白编码基因hCLPSL3(human colipase-like 3);同时,通过同源性分析,对小鼠(Mus musculus)、大鼠(Rattus norvegicus)同源基因Clpsl3的完整编码区进行分析和预测。利用RT-PCR技术以人细胞系cDNA为模板成功扩增到hCLPSL3的2个转录变异体,即hCLPSL3-v1和-v2,前者包含完整的开放阅读框架(ORF),后者ORF被提前终止密码子(premature stop codon,PTC)中断;hCLPSL3-v1包含159个氨基酸,含有1个典型的信号肽,2个高度同源的内部序列重复区以及2个不完整的辅脂酶样结构域。通过真核表达载体构建,在人293T细胞中以过表达方式证实了hCLPSL3-v1能够分泌。通过RT-PCR技术,在小鼠肾、结肠和脾脏组织中各获得1个Clpsl3转录变异体序列,分别称为mCLPSL3-v1、-v2和-v3,其中mCLPSL3-v1包含完整的编码区,编码产物含161个氨基酸,而mCLPSL3-v2和-v3的ORF均被PTC中断;从大鼠结肠和小肠组织中克隆到大鼠Clpsl3的cDNA序列,即rCLPSL3,其编码162个氨基酸。此外,CLPSL3在哺乳动物中广泛存在,基因结构相似,均含有高度保守的18个半胱氨酸,推测与二硫键形成有关。这些工作为CLPSL3的功能研究奠定了基础。
- 卢艳薛永常于鹏王平章
- 关键词：克隆
