吴卉娟
- 作品数：16 被引量：90H指数：6
- 供职机构：天津医科大学肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卵巢上皮性癌组织中轴突导向蛋白4D的表达与微血管密度的关系被引量：3
- 2010年
- 卵巢上皮性癌（卵巢癌）的病死率居妇科恶性肿瘤的首位，总的5年生存率仅为30％左右，其原因与癌组织血管丰富，易发生转移导致患者预后不良密切相关。卵巢癌组织中的微血管密度（microvessel density，MVD）是评价血管生成的重要指标。轴突导向蛋白（semaphorin）最初是在研究神经系统发育过程中发现的，参与轴突导向、纺锤体形成及神经信号通路的传导。semaphorin家族共有20多个成员，
- 陈颖张磊潘毅刘文欣吴卉娟郝权
- 关键词：卵巢上皮性癌组织微血管密度轴突导向蛋白卵巢癌组织妇科恶性肿瘤
- HIF-lα、VEGF和Sema4D蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义被引量：7
- 2011年
- 实体肿瘤在发展过程中，因体积增大、血液供应不足而出现缺氧，缺氧又通过关键的转录因子——缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor，HIF）使肿瘤血管增生、转移等恶性行为更加明显［1］。HIF－1α在恶性肿瘤发生、发展中所发挥的作用主要与其调节的下游基因，
- 陈颖张磊刘翔宇潘毅邱媛媛吴卉娟刘文欣郝权
- 关键词：卵巢癌组织VEGF缺氧诱导因子蛋白恶性行为
- PTEN基因对卵巢癌耐药细胞系C13K顺铂耐药性的影响
- 2007年
- 目的:探讨第10号染色体上PTEN对人卵巢癌顺铂耐药细胞株C13K顺铂耐药性的逆转作用。方法:将野生型PTEN基因真核表达质粒在脂质体介导下转染人卵巢癌耐药细胞系C13K细胞,同时以转染空载体和未转染C13K细胞作为对照,分别应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白印迹法(W estern blot)检测PTEN mRNA及蛋白表达水平,对转染细胞株进行四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)实验,观察PTEN基因对肿瘤细胞生长的抑制作用和C13K细胞对顺铂药物敏感性的影响,流式细胞仪(FACS)分析细胞的凋亡。结果:转染48 h后,与对照组相比,转染野生型PTEN基因能明显增加C13K细胞PTEN mRNA和蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05);MTT法显示,转染野生型PTEN基因的C13K细胞生长明显慢于转染空载体和未转染的C13K细胞,转染PTEN的C13K细胞对顺铂的敏感性显著增加;FACS分析显示,顺铂作用24h后,转染PTEN基因能够显著提高C13K细胞凋亡率。结论:转染野生型PTEN质粒能有效地提高C13K细胞内PTEN的表达,恢复细胞对顺铂的敏感性。
- 吴卉娟吴海涛翁丹卉邢辉卢运萍马丁
- 关键词：基因PTEN卵巢肿瘤顺铂多药
- 第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制被引量：8
- 2011年
- 目的探讨第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因（PTEN）对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制。方法将携带外源性人PTEN基因的野生型质粒（WT—PTEN）和磷酸酶域突变型质粒（C124A—PTEN）转入人卵巢癌细胞株A2780中，利用Transwell小室法和划痕愈合实验检测转染前后细胞侵袭和迁移能力的变化，应用Western blot检测各组细胞PTEN及其下游相关蛋白表达的变化。以空载体质粒和未转染细胞作为对照。结果细胞侵袭实验显示，WT-PTEN／A2780、C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞穿透Matrigel胶的细胞数，分别为（24．3±2．5）个、（43．7±3．8）个、（44．7±2．1）个和（45．0±3．0）个，WT-PTEN／A2780细胞的穿膜数明显少于其他各组（P〈0．05）。划痕愈合实验显示，WT—PTEN／A2780、C124A-PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞的迁移距离分别为（54．1±3．7）μm、（78．7±3．4）μm、（78．1±3．1）μm和（76．8±3．5）μm，WT-PTEN／A2780细胞的迁移速度明显慢于C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。WT-PTEN／A2780细胞中基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白的表达明显低于C124A．PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。结论野生型PTEN可有效抑制A2780细胞的侵袭和迁移，该抑制作用与A2780细胞中MMP-9表达下调有关。
- 吴卉娟郝权王珂刘文欣马丁
- 关键词：卵巢肿瘤基质金属蛋白酶9迁移
- PTEN基因逆转卵巢上皮性癌细胞耐药的机制研究被引量：9
- 2007年
- 目的通过检测 PTEN 基因在卵巢上皮性癌(卵巢癌)顺铂敏感细胞株 OV2008及OV2008配对的顺铂耐药细胞株 C13K 中的表达,探讨转染 PTEN 基因能否逆转 C13K 细胞对顺铂的耐药及其相关机制。方法半定量 RT-PCR 技术和蛋白印迹法检测 OV2008和 C13K 细胞中 PTENmRNA 和蛋白的表达。将野生型 PTEN 基因真核表达质粒在脂质体介导下转染 C13K 细胞,同时以转染空载体和未转染的 C13K 细胞作为对照,分别应用 RT-PCR 技术检测各组细胞 PTEN mRNA 表达的变化,应用蛋白印迹法检测各组细胞 PTEN、蛋白激酶 B(AKT)及磷酸化 AKT(p-AKT)蛋白表达的变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察转染 VFEN 基因后 C13K 细胞对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪分析顺铂作用后的细胞凋亡情况。结果 (1)PTEN mRNA 在 OV2008和 C13K 细胞中的表达水平分别为1.02±0.05和0.45±0.03,而 OV2008、C13K 细胞中 PTEN 蛋白的表达水平分别为1.02±0.07、0.55±0.03,两种细胞 PTEN mRNA 和蛋白的表达水平分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)PTEN 基因转染48 h 后,C13K 细胞中 PTEN mRNA、蛋白的表达水平分别为2.04±0.10和0.94±0.04,分别与转染空载体和未转染的 C13K 细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.01);p-AKT 蛋白的表达水平(0.94±0.07)较转染空载体(1.66±0.10)和未转染(1.68±0.14)的 C13K 细胞显著降低(P<0.05)。(3)转染 PTEN 基因的 C13K 细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC_(50))为(7.2±0.3)μmol/L,明显高于转染空载体和未转染的 C13K 细胞[分别为(12.7±0.4)、(13.0±0.3)μmo]/L,P<0.05]。(4)顺铂作用24 h 后,转染 PTEN 基因、转染空载体和未转染的 C13K 细胞的凋亡率分别为(41.7±0.9)%、(18.6±0.7)%和(15.3±0.8)%,前者明显高于后两者(P<0.01)。结论 PTEN 基因在 OV2008细胞中的表达明显高于 C13K 细胞。转染野生型 PTEN 基因能有效提高C13K 细胞内 PTEN 基因的表达,并通过降低 C13K 细胞中 AKT 磷酸化的水平�
- 吴卉娟吴海涛翁丹卉邢辉卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤顺铂抗药性肿瘤
- COX-2在宫颈癌中的表达及其与血管生成和细胞增殖的关系
- 目的：通过检测环氧合酶-2(COX-2)、微血管密度(CD34标记)和Ki67在宫颈癌中的表达，研究COX-2与宫颈癌患者的临床病理特征之间的关系及其与血管生成和细胞增殖的关系，探讨宫颈癌发生发展的机制。
方法：采...
- 吴卉娟
- 关键词：宫颈癌环氧合酶-2微血管密度血管生成
- 文献传递
- PTEN基因转染对卵巢癌A2780细胞周期和增殖能力影响的研究被引量：5
- 2007年
- 目的:研究外源性PTEN基因稳定转染对人卵巢癌A2780细胞周期和增殖能力的影响。方法:构建PTEN基因的野生型真核表达质粒pEGFP-C1-WT-PTEN和突变型表达质粒pEG-FP-C1-C124A-PTEN,以脂质体介导法转染体外培养的人卵巢癌细胞株A2780,同时转染空载体pEGFP-C1质粒,以未转染细胞为对照(转染成功后分别命名为WT-PTEN/A2780组、C124A-PTEN/A2780组、pEGFP-C1/A2-780组和A2780组。应用RT-PCR、Western blot方法分析目的基因及其蛋白表达,并采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期。结果:与对照细胞相比,WT-PTEN/A2780组和C124A-PTEN/A2780组PTEN mRNA及PTEN蛋白出现明显的高表达,与对照组细胞相比差异有统计学意义(t=5.300,P=0.034;t=11.963,P=0.007;t=7.869,P=0.016;t=22.421,P=0.002);WT-PTEN/A2780组细胞生长速度明显慢于未转染A2780细胞,然而C124A-PTEN/A2780组和pEGFP-C1/A2780组细胞生长速度无明显变化。流式细胞术显示WT-PTEN/A2780细胞G1期细胞数增加到(71.18±4.34)%,S期细胞数变为(17.48±1.96)%,与对照组相比差异有统计学意义(t=19.508,P=0.003;t=25.354,P=0.002),提示从G1期到S期发生抑制。结论:野生型PTEN可依赖其磷酸酶活性使A2780细胞在G1/S期发生细胞周期阻滞,并抑制A2780细胞增殖。
- 吴卉娟吴海涛翁丹卉邢辉卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤PTEN基因增殖细胞周期
- 宫颈癌中COX-2与p53、E-cadherin蛋白表达的关系被引量：22
- 2004年
- 目的 探讨宫颈癌组织中环氧合酶 2 (COX 2 )的表达与 p5 3、E cadherin蛋白表达的关系。 方法 采用免疫组织化学S P法检测 4 1例宫颈癌和 10例正常宫颈上皮组织中COX 2、p5 3、E cadherin蛋白的表达水平。结果 宫颈癌组织中COX 2、p5 3表达水平明显高于正常宫颈上皮 (P <0 .0 1) ,而E cadherin蛋白的表达水平明显低于正常宫颈上皮 (P <0 .0 1) ;COX 2的高表达与宫颈癌淋巴结转移和浸润深度有关 (P <0 .0 5 ) ,与患者年龄、临床分期、组织学类型、分化程度无关 (P >0 0 5 ) ;COX 2表达阳性组 p5 3的表达水平明显高于COX 2表达阴性组 (P <0 0 5 ) ,COX 2表达阳性组的E cadherin蛋白的表达水平则低于相对应阴性组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 在宫颈癌的发生发展中COX 2、p5 3、E cadherin可能起重要作用。COX 2通过使抑癌基因p5 3失活 ,降低细胞黏附分子E cadherin的水平促进宫颈癌的发生。
- 吴卉娟刘少扬江大琼曾俊龚玲玲
- 关键词：宫颈癌P53E-CADHERIN蛋白表达环氧合酶-2
- PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002对卯巢癌化疗增敏作用的研究被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002对卵巢癌化疗效果的影响,方法:将LY294002单独或与顺铂、紫杉醇联合作用于卵巢癌A2780、SKOV3细胞,MTT法检测DDP、顺铂单独或联合LY294002处理后对A2780、SKOV3细胞的抑制率;采用流式细胞技术检测药物单独或联合作用对A2780和SKOV3细胞凋亡的影响;应用Western blot检测A2780和SKOV3细胞中AKT及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达的变化。结果:联合应用LY294002能够显著提高DDP、paelitaxel对A2780和SKOV3细胞抑制率;LY294002与DDP、paclitaxel的协同治疗指数小于1,二者起协同治疗作用;联合LY294002能够增加A2780和SKOV3细胞的凋亡水平。LY294002干预组与对照组相比p-AKT蛋白的表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)结论:LY294002能够有效提高卵巢癌A2780和SKOV3细胞对化疗药物DDP和paclitaxel的敏感性,抑制PI3K/AKT介导的信号传导通路,可明显提高卵巢癌细胞的化疗效果。
- 吴卉娟王珂陈颖郝权刘文欣卢运萍马丁
- 关键词：LY294002卵巢癌PI3K/AKT顺铂紫杉醇
- 沉默轴突导向蛋白4D基因对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响被引量：6
- 2011年
- 摘要：目的 探讨沉默轴突导向蛋白4D（Sema4D）基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭、转移的影响,并验证Sema4D干扰RNA对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 针对Sema4D基因构建短发夹RNA（shRNA）重组载体pshRNA Sema4D-A、pshRNASema4D-B和pshRNASema4D-C质粒,并行酶切鉴定和测序分析.采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法筛选RNA干扰效果最佳的重组载体,通过脂质体介导转染卵巢癌SKOV3细胞（重组载体组）,并以空载体组（转染空载体pcDNA3.1质粒）和未转染组（未作任何处理）为对照.采用RT-PCR法和Westem blot法分别检测转染前后SKOV3细胞中Sema4D mRNA和蛋白表达,并榆测转染前后SKO3细胞的增殖、侵袭和转移能力.建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,将满足成瘤标准的15只裸鼠随机分为pshRNASema4D组（重组载体组）、空载体组和未转染组,每组5只,分别向瘤块内注射pshRNASema4D-B（50μg/次）、空载体（50μg/次）和磷酸盐缓冲液（PBS,100μl/次）,每3 d注射1次,共3周,观察移植瘤生长情况.结果 酶切鉴定和测序分析证实,靶向Sema4D的3个ShRNA重组载体pshRNASema4D-A、pshRNASema4D-B和pshRNASema4D-C质粒构建成功.RT-PCR法筛选显示,重组载体pshRNASema4D-B质粒干扰效果最佳.重组载体组转染24、48和72 h时,SKOV3细胞中Sema4DmRNA的相对表达水平分别为0.401.4±0.051、0.120±0.035和0.014±0.015,重组载体组转染72 h时的Sema4D mRNA相对表达水平明显低于空载体组（0.521±0.019）和未转染组（0.536±0.040,P〈0.05）.Western blot法检测显示,重组载体组转染24、48和72 h时,细胞中Sema4D蛋白的相对表达水平分别为0.196±0.023、0.074±0.015和0.040±0.014,重组载体组转染72 h时的Sema4D蛋门相对表达水平明显低于空载体组（0.275±0.009）和未转染组（0.282±0.015,P〈0.05）.与空载体组和未转染组比较,重组载体组细胞增殖、侵袭和迁移能力受到抑制（P〈0.05）.注射p
- 陈颖张磊吴卉娟刘文欣郝权
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰
