周安宇
- 作品数：5 被引量：161H指数：4
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- AngRem104基因与绿色荧光蛋白融合基因表达载体的构建及在COS-1细胞中的表达定位被引量：6
- 2003年
- 构建以绿色荧光蛋白 (Greenfluorescenceprotein ,GFP)为报告基因的重组表达质粒AngRem10 4 pEGFP N1,利用脂质体转染体外培养的COS 1细胞 ,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察AngRem10 4 EGFP融合蛋白在细胞中的分布和定位 ,用RT PCR和Westernblot方法验证其mRNA和蛋白的表达。结果表明在空载体pEGFP N1转染组中 ,COS 1细胞内绿色荧光呈弥散分布 ;重组质粒AngRem10 4 pEGFP N1转染组中 ,绿色荧光集中在细胞核中 ,随着表达量的增高 ,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状、颗粒状。RT PCR的结果表明AngRem10 4在重组质粒转染组中的表达明显高于空载体和空白对照组。Westernblot的结果也确证了AngRem10 4 EGFP融合蛋白的表达。提示新基因AngRem10 4 /pEGFP融合基因真核表达载体在真核细胞COS 1中获得了表达 ,细胞所表达的融合蛋白具有An gRem10 4和EGFP的双重活性 ,可用荧光显微镜直接观察其表达情况及亚细胞定位 ,为基因功能研究提供了线索。
- 梁秀彬张宏周安宇王海燕
- 关键词：绿色荧光蛋白基因表达
- 基因差异表达研究方法的进展及其在肾脏科学研究中的应用被引量：4
- 2002年
- 代表性差异分析、抑制性削减杂交、DAN芯片技术等研究基因表达改变的新方法较传统的类似方法有诸多的优越性 ,但也存在着一些缺点。本文就这些方法的原理、技术要点、优缺点和在肾脏发育。
- 周安宇张宏王海燕
- 关键词：MRNA差异显示肾脏
- 黄芪当归合剂防治肾病综合征鼠进行性肾小管间质损伤被引量：140
- 2000年
- 目的探讨黄芪当归合剂对肾病综合征鼠肾小管间质损伤的影响及其机制。方法采用嘌呤霉素肾病模型，以依那普利作阳性对照，观察黄芪当归合剂对肾功能和结构的影响，及其与肾组织局部肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）、细胞浸润、转型的关系。结果黄芪当归合剂具有与血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）相似的防止和减轻肾功能恶化、肾组织病理改变尤其是小管间质损伤的作用（Ｐ＜０．０５）。这作用与局部ＲＡＳ无关，而与其抑制肾组织单核巨噬细胞的浸润（Ｐ＜０．０１）和肾小球系膜细胞、间质成纤维细胞转型（Ｐ＜０．０１）有关。结论黄芪当归合剂明显减轻小管间质损伤，这与其肾功能保护作用相一致。
- 余凌张俊峰李惊子周安宇邹万忠王海燕
- 关键词：肾病综合征肾小管间质损伤黄芪当归合剂
- 肿瘤坏死因子α介导内皮素所致人肾小球系膜细胞增殖被引量：5
- 2001年
- 目的 :探讨内皮素 1(endothelin 1,ET 1)致人肾小球系膜细胞 (humanmesangialcell,HMC)增殖的介导途径。方法 :用ET 1和抗肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNFα)中和抗体孵育HMC ,3 H 胸腺嘧啶参入法测定HMC增殖 ,Northern杂交方法测定mRNA表达及放射免疫法测定TNFα蛋白质水平。结果 :10 -7mol·L-1ET 1能刺激HMC增殖 ,使TNFαmRNA表达上调及TNFα蛋白质分泌增多 (12、2 4h两组与对照组比较 ,差异有显著性 ) ;抗TNFα中和抗体 (0 .10～ 1.0 0mg·L-1)能部分抑制ET 1所致HMC增殖 ,但对ET 1所致HMCTNFαmRNA表达上调无明显影响。结论 :ET 1能够刺激HMC增殖并使HMC合成和分泌TNFα ;ET
- 周安宇谌贻璞高进
- 关键词：肾小球系膜药物作用内皮缩血管肽类系膜细胞增殖肾小球肾炎
- 血管紧张素Ⅱ上调人肾小球系膜细胞硬化相关基因的克隆被引量：9
- 2002年
- 目的 筛选和鉴定培养的人肾小球系膜细胞（MsC）在血管紧张素Ⅱ（Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ）作用下,产生以纤连蛋白（Fibronectin,FN）为代表的细胞外基质成分的过程中上调表达的基因,寻找Ang Ⅱ致细胞外基质堆积作用的相关基因,为探讨Ang Ⅱ在肾小球硬化发展过程的分子机制奠定基础。方法 人MsC经Ang Ⅱ（10-6mol/L）刺激24h后,采用抑制性消减杂交（suppressionsubtractive hybridization,SSH）获得Ang Ⅱ相关的差异表达的cDNA,经纯化克隆到pGEM-Teasy Vector并转化大肠杆菌;随机选择120个克隆,经反向Northern筛选上调表达的基因cDNA片段,并以Northern杂交验证,然后进行DNA序列测定和同源性比较。采用5＇-和3＇-RACE及长距离PCR的方法获得新基因的全长cDNA。结果 在120个随机选择的克隆中,反向Northern结果表明有55个克隆表达明显上调。挑选其中20个克隆进行DNA序列测定,结果显示18个为独立的基因片段序列（有两个序列为双拷贝）,其中15个为已知基因,包括细胞外基质成分:如血小板反应素Ⅰ、Ⅰ型胶原α2;细胞骨架及结合蛋白:如平滑肌肌动蛋白α、钙调蛋白1、γ-胞浆型肌动蛋白等;合成和代谢相关蛋白:如醛缩酶A、延长因子1-γ、arnesyl pyrophosphate synthetase等;蛋白分解相关蛋白:如组织蛋白酶。
- 周安宇张宏梁秀彬侯平王海燕
- 关键词：细胞外基质系膜细胞肾小球硬化相关基因
