周建嫦
- 作品数：34 被引量：108H指数：7
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 非整倍体毒剂和染色体断裂剂的FCM微核检测区分方法研究
- 2006年
- 目的研究流式细胞术(flow cytometry,FCM)微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法。方法采用CD71荧光抗体和碘丙啶(PI)双染色,通过FCM检测环磷酰胺(CP)和秋水仙素(COL)诱导的NIH小鼠外周血含微核网织红细胞的PI荧光强度,比较它们与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值,以探索通过FCM微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法。结果染色体断裂剂CP诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较低,非整倍体毒剂COL诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较高,两者间差异有统计学意义(P<0．01)。结论通过FCM检测微核PI染色强度,可初步判断诱导微核形成的因素是否具有染色体断裂剂和非整倍体毒剂毒性。
- 杨明杰周建嫦李志杨杏芬黄俊明谭小华曹佳曾瑞萍
- 关键词：微核流式细胞术
- 镉染毒小鼠网织红细胞微核流式细胞术研究被引量：2
- 2005年
- 目的 通过流式细胞术 (FCM )检测外周血微核方法 ,研究氯化镉 (CdCl2 )染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率 ,评价流式细胞术在微核检测中的应用价值及探讨氯化镉的致突变作用。方法 采用转铁蛋白受体CD71荧光抗体和碘化丙啶 (PI)染色 ,并以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核模式生物调校流式细胞仪 ,检测 10～ 6 0mg/kg环磷酰胺染毒和 5 0～ 4 0 0 μg/kg氯化镉染毒对小鼠的外周血含微核网织红细胞率的变化。 结果 不同剂量环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率和骨髓含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠 ,且二者之间相关性良好 (r =0 95 5 ) ;不同剂量氯化镉染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率未见明显升高。结论 FCM测定外周血含微核网织红细胞率可替代传统显微镜检查骨髓含微核网织红细胞率用于遗传毒性评价 ;在本研究条件下未观察到氯化镉有明显的诱导小鼠外周血含微核网织红细胞形成的作用。
- 杨杏芬杨明杰李志周建嫦黄俊明谭小华曹佳曾瑞萍
- 关键词：微核流式细胞术
- 适体及其在流式细胞术检测中的应用被引量：2
- 2003年
- 适体是一种本质为RNA或DNA的小分子 ,它们能以配基形式像抗体一样与靶蛋白呈高亲合力特异性结合 ,可在一定程度上取代抗体用于检测和治疗。就适体筛选的指数富集配基系统进化技术原理。
- 杨明杰周建嫦
- 关键词：适体流式细胞术检测靶蛋白核酸
- 一种简便的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法被引量：7
- 2007年
- 背景:原代培养的人正常胃黏膜上皮细胞与体内姊妹细胞相似,是进行胃生理和病理研究的理想工具,但我国尚未见简便、可靠的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法的报道。目的:探讨简便的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法。方法:以胶原酶Ⅱ和分散酶磁性搅拌分离人正常胃黏膜上皮细胞。以甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测细胞活力,以观察细胞大体生长过程;以溴脱氧尿苷(BrdU)标记法检测S期细胞数量,以观察细胞微观增殖能力。以PAS染色鉴定胃黏膜上皮细胞黏原颗粒;以细胞角蛋白(CK)-18免疫荧光染色鉴定上皮细胞。以光学显微镜和透射电子显微镜观察细胞形态结构。初步观察传代细胞的贴壁生长情况。结果:培养第2～3d,胃黏膜上皮细胞活力增幅最大,第4d达最高点,之后逐渐下降;BrdU孵育18h后,33.3%的细胞处于和曾经处于S期。接种密度高时,细胞PAS染色均呈紫红色,可见细胞核旁黏原颗粒;接种密度低时,仅成团细胞PAS染色呈阳性;培养第3d,绝大部分细胞CK-18阳性。接种第2d,胃黏膜上皮细胞成团簇状生长,增殖迅速,第4d后逐渐停止生长,第5d开始出现漂浮死亡细胞,最终完全被成纤维细胞取代;透射电子显微镜可见微绒毛、分泌颗粒、连接复合体等上皮细胞特征。传代胃黏膜上皮细胞增殖、铺展能力较原代细胞降低。结论:磁性搅拌酶分离培养可得到数量多、纯度高的人正常胃黏膜上皮细胞。
- 程永波房殿春郭立萍王自强罗元辉周建嫦
- 关键词：上皮细胞胃黏膜细胞培养技术
- 幽门螺杆菌CagA抗原性多态性分析被引量：2
- 2001年
- 目的 了解我国幽门螺杆菌CagA抗原性的多态性 ,为临床血清学诊断CagA阳性菌株感染提供实验依据 ,以及是否存在特定胃十二指肠疾病相关的CagA抗原性型提供线索。方法 采用Westernblots方法 ,比较 38株我国幽门螺杆菌分离株的CagA与 3种不同胃肠疾病分离株兔免疫血清的反应强度。分析不同抗原性类型CagA与疾病的关系。结果 任何一种血清均不能识别所有CagA ,但任一CagA至少可被一种血清识别 ,多数菌株CagA的抗原性与CAPMN6 2接近 ;抗原性与NCTC116 37接近的CagA可能与消化性溃疡相关 ,但不显著。结论 我国不同幽门螺杆菌菌株CagA抗原性存在明显多态性 ,血清学方法诊断CagA阳性菌株感染时应至少使用 3种抗原或抗体 ,不同抗原性类型CagA与胃十二指肠疾病的关系有待进一步研究。
- 周建嫦张建中徐采朴何利华张茂俊盛涛郭浩岩
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA抗原多态性胃粘膜萎缩
- 转基因食品检测方法被引量：12
- 2002年
- 周建嫦杨杏芬凌文华
- 关键词：转基因食品转基因成分食品卫生
- PCR法筛选检测转基因食品被引量：3
- 2004年
- 目的 通过PCR检测花椰菜花叶病毒 (camv) 35S启动子和胭脂碱合酶 (nos)终止子建立筛选食品中有无转基因成分的方法。方法 用改良溴化十六烷三甲基铵 (CTAB)法制备转基因抗除草剂〔大豆RoundUpReadyTMSoybean(RRS)〕和转基因抗虫玉米系列标准品Bt176Maximaizer的DNA ,PCR检测其内参照基因及camv 35S启动子和nos终止子。结果 改良CTAB法制备的DNA用作PCR模板均可扩增出内参照基因 ,PCR扩增camv35S启动子可检测出含量为 0 5 %的RRS和Bt176Maximaizer,而PCR扩增nos终止子可检测出含 1%RRS的食品样品。结论 改良CTAB法制备的DNA可用作PCR模板 ,建立的PCR检测camv
- 周建嫦黄俊明杨杏芬凌文华杨明杰黄琼李文立
- 关键词：转基因食品PCR
- 幽门螺杆菌cagA基因全长克隆及序列分析被引量：2
- 2005年
- 目的 探索扩增cagA基因全长的PCR方法 ,克隆中国 2株胃癌幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)分离株和1株十二指肠溃疡分离株及国际标准株SS1的cagA基因 ,初步探讨cagA序列和磷酸化位点变异及其临床意义。方法 针对已知cagA基因两侧及cag致病岛右侧反转重复序列设计PCR引物 ,扩增cagA基因并克隆测序 ,分析已知cagA序列同源性及其酪氨酸磷酸化位点。结果 3株中国Hp分离株cagA氨基酸序列的同源性约为 94% (93 9%、94%、94 5 % ) ,并都有pY117/118/12 2和EPIYA A、B、D 4个酪氨酸磷酸化位点。SS1株cagA与西方菌株同源性大于 85 % ,而与中国菌株的同源性小于 80 % ,具有pY117/118/12 2和EPIYA A、B、C 4个酪氨酸磷酸化位点。结论 建立的PCR方法可扩增cagA基因全长。CagA序列变异和磷酸化位点具有地区聚类特征 ,但与Hp感染临床结局无特殊关联。
- 周建嫦张建中徐采朴何利华
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA基因CAGA蛋白
- 氯化镍染毒对小鼠外周血网织红细胞微核形成的影响被引量：4
- 2006年
- 目的研究氯化镍(NiCl2)诱导小鼠外周血网织红细胞微核形成的作用。方法将30只健康的成年雄性NIH小鼠随机分为6组,设生理盐水对照组、秋水仙素阳性对照组(剂量为0.75mg/kg)、环磷酰胺阳性对照组(剂量为40.0mg/kg)和NiCl2染毒组(剂量分别为5.0、10.0、20.0mg/kg),分2次腹腔注射染毒,间隔24h,每次按0.1ml/10g体重腹腔注射。采用转铁蛋白受体荧光抗体和碘化丙碇染色,以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核生物模型,调校流式细胞仪,检测秋水仙素、环磷酰胺和0、5.0、10.0、20.0mg/kgNiCl2染毒后小鼠外周血含微核网织红细胞率的变化。结果秋水仙素和环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠(P<0.01),但不同剂量NiCl2染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率均未见明显升高(P>0.05)。结论该研究条件下未观察到氯化镍有明显的诱导小鼠外周血网织红细胞微核形成的作用。
- 李志杨明杰黄俊明杨杏芬周建嫦谭小华曹佳曾瑞萍
- 关键词：镍流式细胞术微核网织红细胞
- PCR法检测食品和动物饲料中的转基因成分被引量：11
- 2005年
- 目的初步调查广州市场上含大豆及玉米原料的食品和饲料中转基因成分的存在情况。方法通过PCR检测camv35S启动子和nos终止子,筛选食品中是否含转基因成分,并进一步通过PCR检测RoundUpReadyTMSoybean(RRS)、Bt176Maximaizer和Mon810YieldGard的特异DNA片段,判断是否含这三种成分。结果从22份市售食品和3份动物饲料,检测出1份玉米汤和2份鲜黄豆样品、1份薯条、及1份大鼠和1份豚鼠饲料中含转基因成分;其中的阳性鲜黄豆和饲料样品含有RRS,而阳性玉米汤和饲料样品中未检测到Bt176Maximaizer和Mon810YieldGard。结论部分未标识市售食品和动物饲料中含转基因成分。
- 周建嫦杨明杰杨杏芬黄俊明凌文华
- 关键词：ROUNDUPSOYBEAN
