周菲
- 作品数：20 被引量：26H指数：3
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 1种简单快速高效的双靶点CRISPR/Cas9载体构建方法被引量：1
- 2020年
- 基于Golden Gate载体构建过程,对CRISPR/Cas9双靶点敲除技术的载体构建系统进行了优化,建立了一种简单快速高效且无PCR扩增的双靶点CRISPR/Cas9载体构建方法。在本方法中,只需将设计好的2个靶点DNA小片段和1个外源片段用T4 DNA连接酶构建到CRISPR/Cas9载体上即可。用本方法对10个已报道的水稻基因构建了20个双靶点CRISPR/Cas9载体,阳性率为100%,测序结果显示无突变。该载体系统非常适合大批量CRISPR/Cas9载体的构建,同时也为其他植物中构建双靶点CRISPR/Cas9载体提供借鉴。
- 张扬黄维峰周菲林拥军
- 关键词：水稻基因敲除双靶点
- 我国作物新种质创制研究进展
- 2022年
- 作为人口和农业大国,我国政府历来重视农业问题和粮食安全。基于人口众多、耕地资源有限的国情限制,我国把依靠科技发展提升单产水平作为保证我国粮食安全的主要手段。在国家的积极布局和大力支持下,近年来我国在作物育种理论和技术上不断突破和创新。作物重要农艺性状的解析和具有育种价值的等位基因利用、基因编辑技术的创新和应用、基因组育种和从头驯化策略以及转基因大豆和玉米产业化试点等为我国作物新种质的创制提供了新思路和新策略。梳理和回顾了我国在此领域取得的一些具有代表性的成果,并对发展前景进行了总结和展望。
- 陈浩周菲林拥军
- 关键词：生物育种转基因
- 一种耐除草剂的水稻羟基苯丙酮酸双加氧酶突变体及应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种通过基因突变技术对来源于水稻的对羟基苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)进行定向进化，以对其HPPD抑制剂类除草剂抗性进行改良，并进一步公开了该突变体及其编码基因在新型耐HPPD抑制剂作物...
- 吴高兵杨庆贺覃妙玲周菲林拥军
- 植物质体基因工程：新的优化策略及应用被引量：6
- 2015年
- 植物质体转化技术通过同源重组实现定点整合,与细胞核基因工程相比,使外源基因表达更为精确、安全和高效。该技术在基础研究中为叶绿体功能基因组研究提供了有效手段,同时在应用方面为外源基因表达提供了理想的平台,已成为植物遗传育种的一种新策略。本文总结了近年来质体基因工程在转化体系的建立和优化上的新思路,着重阐述了利用质体转化技术在遗传育种中提高作物抗性、改良品质等应用领域的最新研究进展。克服质体转化技术在作物遗传育种中面临的难题,必将为作物育种的发展带来新的绿色革命。
- 周菲路史展高亮张娟娟林拥军
- 关键词：遗传育种
- 在质体中表达EPSPS赋予烟草草甘膦抗性
- 2021年
- 在烟草质体中应用来源于玉米的复合型顺式表达元件驱动来源于Isoptericola variabilis的新型耐草甘膦EPSPS基因AroA_(I.va*)的表达,使其在叶片及非绿色组织中同时高效表达。对获得的同质化质体转化植株进行转录及蛋白水平分子检测,结果表明:AroA_(I.va*)基因在转基因植株叶片及根部组织中均得到有效表达;达到同质化的烟草转基因植株pLSZ3#2和pLSZ3#3的T_(0)代种子可耐受高于12 mmol/L(2000 mg/L)的草甘膦处理,在温室中培养的转基因植株可耐受1800 mg/L剂量的草甘膦喷施处理。野生型与转基因植株的正反交实验证实通过质体转化获得的草甘膦抗性转基因植株具有母性遗传的特点。
- 李凡路史展刘羽鑫林拥军吴高兵周菲
- 关键词：烟草母系遗传
- 水稻新型核转化筛选标记基因的鉴定及应用被引量：2
- 2015年
- 将人工合成的来自Escherichia coli的dsdA基因与来自Schizosaccharomyces pombe的dao1基因,通过农杆菌侵染方式转化到水稻中花11中。对转化植株进行分子生物学检测表明,目的基因整合到了水稻核基因组中,其中获得转化dsdA的单拷贝植株7个,转化dao1的单拷贝植株6个。通过对单拷贝转基因家系表达量检测及T0代种子萌发测验发现,dao1基因在2个(编号6,7)转基因家系中表达量显著,T0代种子在含D-Ala的培养基上,具有明显抗性。dsdA基因在所有的转基因家系中表达量相对偏低,在含D-Ser的培养基上,T0代种子有一定抗性。
- 张娟娟林拥军周菲
- 关键词：水稻转基因筛选标记基因D-氨基酸生物安全
- 一种抗草甘膦基因以及转基因抗草甘膦烟草的培育方法
- 本发明提供了一种抗草甘膦基因及其在调控烟草对草甘膦抗性中的应用。所述基因的核苷酸序列如Seq ID No.1所示。本发明提供了一种转基因抗草甘膦烟草的培育方法，转基因抗草甘膦烟草pLSZ1#1植株达到了同质化，且获得的性...
- 周菲路史展林拥军刘子铎刘嘉琪李旻祺代兴丽
- “神奇的植物再生——组织培养”微课教案
- 2019年
- 教学背景细胞工程学是应用细胞生物学和分子生物学的原理与方法,在细胞水平上研究和改造生物遗传特性,以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的一门学科。它是现代生物技术的重要组成部分,同时也是现代生物学研究的重要技术工具,是现代生物技术的桥梁和纽带。细胞工程学是生物技术专业学生的必修专业基础课,也是其他生物类本科专业学生的重要专业选修课。细胞工程主要包含植物细胞工程和动物细胞工程两大主要内容。
- 谢婷婷陈浩李运广周菲杜鹃齐迎春柳俊
- 关键词：植物细胞工程现代生物技术分子生物学教案细胞生物学
- 一种高耐受草甘膦的EPSP合酶及其克隆、表达与应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种新型高耐受草甘膦的EPSP合酶(5‑烯醇式莽草酸‑3‑磷酸合成酶)突变体，并进一步公开其编码基因在新型耐草甘膦作物培育领域中的应用。本发明从海洋菌株Halomonassp.克隆一个...
- 吴高兵何云浩华雨陈心怡林拥军周菲阮丽芳
- 一种简单快速高效的CRISPR/Cas9载体构建方法及应用
- 本发明提供一种简单快速高效的CRISPR/Cas9载体构建方法及应用，包括：构建骨架载体并对骨架载体进行线性化处理得到线性化的骨架载体，制备靶点引物后将所述靶点引物接入所述线性化的骨架载体中得到连接产物，将所述连接产物转...
- 林拥军黄维峰周菲
- 文献传递
