孙燕飞
- 作品数：10 被引量：39H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：高等学校学科创新引智计划国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小麦过敏性诱导反应基因TaHIR4的克隆及序列分析被引量：1
- 2010年
- 【目的】克隆条锈菌诱导的小麦过敏性反应(Hypersensitive induced reaction,HIR)基因TaHIR4,分析其编码蛋白的结构、进化与功能。【方法】采用电子克隆、RT-PCR技术,从条锈菌侵染的小麦中,分离过敏性诱导基因TaHIR4,并对其进行克隆和序列分析;利用InterProScan、TMpred、SignalP 3.0、PSORT等在线分析工具,预测TaHIR4蛋白的保守结构域、跨膜结构、信号肽、细胞定位等特征;采用DNASTAR软件分别进行氨基酸序列同源性比对和进化树分析。【结果】分离到小麦过敏性诱导基因,命名为TaHIR4(867bp,GenBank注册号为FJ028663),该基因编码1条由288个氨基酸组成的多肽;TaHIR4蛋白含HIR蛋白家族的保守SPFH(Stomatins,Prohibitin,Flotillins,HflK/C)、PHB(Prohibitin homologues)结构域,有4种典型的motifs(蛋白激酶、酪蛋白激酶Ⅱ、酪氨酸激酶磷酸化和N-豆蔻酰化位点),N末端的19个氨基酸序列内部存在跨膜信号肽结构,可能属于分泌蛋白;TaHIR4与HvHIR4蛋白的亲缘关系最近,同源性最高(98%),其次为OsHIR4,同源性为91%。【结论】分离到1个条锈菌诱导的小麦HIR基因TaHIR4,其编码蛋白可能属于分泌蛋白,在胞外行使功能。
- 张岗孙燕飞李依民董艳玲夏宁王晓杰黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌过敏性反应电子克隆
- 含CBS结构域的小麦TaCDCP1基因的克隆及其表达分析被引量：1
- 2010年
- 利用电子克隆和RT-PCR技术,在本实验室前期构建的非亲和互作的SSH文库基础上,从条锈菌侵染的小麦水原11叶片中首次分离出一个含CBS结构域蛋白的基因,暂命名为TaCDCP1（Triticum aestivum CBS domain containing protein 1）。TaCDCP1包含一个完整的654 bp的开放阅读框,编码217个氨基酸。推测该基因拟编码的蛋白具有2个CBS保守结构域,不含跨膜区且无信号肽,定位在叶绿体基质内;经过同源比对,小麦TaCDCP1氨基酸序列与大麦、水稻和玉米等的同源序列的相似性较高;该基因表达量在小麦叶中显著高于在根和茎中;在小麦与条锈菌的非亲和、亲和组合中,TaCDCP1基因均受到条锈菌诱导,分别在接种后18 h和96 h达到表达高峰,非亲和组合表达量在侵染前期（接种后1848 h）高于亲和组合,而在侵染后期（接种后96120 h）低于亲和组合;外源植物激素脱落酸诱导该基因上调表达,苄基腺嘌呤,乙烯,赤霉素,茉莉酸甲酯和水杨酸处理后其表达量在不同程度上受到抑制;TaCDCP1在低温和干旱条件下表达量上升,在机械伤害和高盐处理下表达量无明显差异。表明TaCDCP1可能通过脱落酸等信号途径参与小麦对条锈菌的防御反应,同时参与低温和干旱环境下的信号转导途径。这些结果对于明确CBS结构域的功能以及CBS结构域蛋白尤其是TaCDCP1在小麦与条锈菌互作中的作用奠定了基础。
- 王晓敏冯浩孙燕飞刘博王晓杰徐亮胜于秀梅魏国荣黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌非生物胁迫基因表达
- 草酸氧化酶基因转化烟草的研究被引量：11
- 2004年
- 为研究草酸氧化酶基因(OxO)对植物抗病的作用,将含有CaMV35s启动子的植物表达载体以根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导的叶盘方法,转化了烟草97131。具有卡那霉素抗性的再生植株经PCR检测,得到了与阳性对照一致的470bp的片段,进一步对PCR产物测序表明OxO基因已整合进烟草基因组中。在对草酸的耐受性实验中,转基因烟草对草酸的抗性明显高于未转化烟草。
- 景岚康振生孙燕飞张岗
- 关键词：根癌农杆菌介导转化转基因烟草
- 油菜遗传转化体系中卡那霉素浓度的筛选及抑菌剂的选择被引量：6
- 2008年
- 利用根癌农杆菌(Agribacterium tume faciens)介导的下胚轴转化方法,将一抗病基因转化甘蓝型油菜。在遗传转化体系的建立过程中进行了卡那霉素(Km)浓度的筛选及抑菌剂的选择,以确定合适的选择压力及适宜的杀菌剂。试验结果表明:选择培养基中附加25 mg/L Km较适宜;抗性苗筛选过程中羧苄青霉素(Cb)对芽苗分化影响较小,且在500 mg/L时能够很好的抑制农杆菌的过度生长。生根培养基中添加头孢霉素(Cef)和Cb对根分化的影响没有明显差异。
- 景岚孙燕飞张岗康振生
- 关键词：农杆菌介导法卡那霉素抑菌剂
- 草酸氧化酶基因转化甘蓝型油菜（Brassica napus L.）的研究
- 甘蓝型油菜是世界重要的经济作物之一,但是由于长期受到菌核病等多种病害的危害,其产量和品质受到严重影响。在中国,油菜菌核病居油菜三大病害之首,严重影响了我国的油菜生产。目前,其近缘种中还没有发现完全抗或免疫的种质资源,油菜...
- 孙燕飞
- 关键词：分子植物育种抗病基因
- 文献传递
- 84K杨基因转化受体系统的建立被引量：3
- 2005年
- 以84K杨为研究对象,通过建立叶片再生系统及卡那霉素敏感性试验,确立了稳定高效的基因转化受体系统。结果表明,以MS培养基为基本培养基,0.5～1.0mg/L6-BA+0.01～0.1mg/LNAA组合时,叶片出芽率不到50%,每叶平均生芽数5～6个;1.0～1.5mg/L6-BA+0.02mg/L2,4-D组合时,叶片出芽率达90%～100%,每叶平均生芽数约20个。用后者附加不同质量浓度梯度卡那霉素,确定叶片外植体芽诱导卡那霉素临界筛选质量浓度为20mg/L。利用对84K杨芽生根效果较好的培养基GMS+0.01mg/LNAA+0.25mg/LIBA,附加不同质量浓度梯度卡那霉素,筛选出芽生根卡那霉素临界质量浓度亦为20mg/L。
- 张岗康振生孙燕飞韩青梅芦晓飞
- 关键词：84K杨基本培养基MS培养基叶片外植体出芽率生芽
- 白粉菌诱导的小麦类萌发素蛋白的克隆、定位及表达分析被引量：6
- 2009年
- 【目的】克隆受白粉菌诱导的小麦类萌发素蛋白基因,分析其在感、抗病单株中的表达模式,探讨其在小麦抗白粉病过程中的作用机制。【方法】根据基因芯片结果,结合电子克隆与RT-PCR方法,克隆到一个受白粉菌诱导的小麦类萌发素蛋白基因。通过中国春缺体-四体系对获得的基因片段进行定位。运用荧光定量PCR方法分析了该基因片段在抗病植株、感病植株白粉菌诱导的时空表达模式。【结果】获得了一个具有完整开放阅读框的小麦类萌发素蛋白基因片段,命名为TaGLP5(GenBank登录号为FJ594470)。系统进化分析表明该基因片段与已知的来自禾本科的萌发素蛋白分属不同的进化分支,很可能是新的小麦萌发素蛋白成员。通过中国春缺体-四体系将该基因片段定位在小麦的5A染色体上。定量PCR分析结果表明,该基因的表达受白粉菌诱导,且在接菌后的24h以前抗病中的表达量高于同期感病株。【结论】本实验获得的类萌发素蛋白是一个新的成员。该类萌发素蛋白在感、抗植物受白粉菌诱导上调表达,但是表达量、表达时间上存在差异。推测该基因参与了小麦对白粉菌的防御反应。
- 王俊美孙燕飞刘红彦康振生徐红明
- 关键词：白粉菌克隆染色体定位
- MircoRNA156家族在小麦非生物胁迫中的表达分析被引量：5
- 2013年
- MircoRNA（miRNA）作为一类20碱基左右的非编码RNA，它在转录水平调控基因的表达，在植物抗逆境胁迫的调节网络中发挥了重要作用。通过对小麦miRNAs的研究，可以扩展小麦抵抗自然灾害的途径，减少损失。有报道表明miRl56作为保守的miRNA在多种植物中参与到抗逆反应，
- 王冰宋娜孙燕飞冯浩王晓杰康振生
- 关键词：非生物胁迫小麦MIRNAS家族调控基因转录水平
- 小麦TaMlo8基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2011年
- 【目的】克隆小麦Mlo基因家族新成员,分析其编码蛋白的结构、进化地位以及其在小麦根、茎、叶组织和生物胁迫下的表达模式。【方法】采用电子克隆、RT-PCR技术,从小麦品种"水源11"中分离出1个Mlo的cD-NA序列基因,对其进行克隆和序列分析;利用InterProScan、TMpred、SignalP等在线分析工具,预测TaMlo蛋白的保守结构域、跨膜结构、信号肽、细胞定位等特征;采用DNASTAR软件分别进行氨基酸序列同源性比对和进化树分析,并利用qRT-PCR技术对其表达谱进行分析。【结果】以玉米ZmMlo8基因为种子序列,克隆了小麦新基因TaMlo8(暂命名)cDNA序列,该序列长1 897bp,ORF为1 497bp,编码499个氨基酸;InterProScan和SignalP预测结果显示,其为Mlo家族成员,含信号肽和7个跨膜区;BLASTX结果显示,TaMlo8与玉米ZmMlo8蛋白的相似性达78%;系统进化树显示,TaMlo8与玉米ZmMlo8处于同一分支下,而与小麦其他Mlo家族成员处于不同的分支上,进一步说明TaMlo8为小麦Mlo家族的新成员;表达谱分析表明,TaMlo8是组成型低表达,在小麦根、茎、叶组织中的表达量基本一致,在小麦与条锈菌互作的非亲和体系中诱导表达,在小麦与白粉菌的感病反应中诱导表达。【结论】克隆到1个小麦Mlo基因新成员TaMlo8,其在小麦与条锈菌的抗性反应和小麦与白粉菌的感病反应中起一定作用,说明TaMlo8基因对条锈菌和白粉菌的抗病路径可能不同,为进一步研究其在小麦生物胁迫反应中的潜在功能奠定了基础。
- 孙燕飞李延生夏宁张岗王俊美王晓杰魏国荣康振生
- 关键词：小麦条锈菌小麦白粉菌MLO基因电子克隆结构域
- 转草酸氧化酶基因的甘蓝型油菜(Brassica napus L.)的苗期人工春化条件探索被引量：1
- 2005年
- 对4种转草酸氧化酶基因甘蓝型油菜(Brassica napus L.)苗期人工春化条件进行研究的结果表明,春性和冬性半冬性转基因油菜移栽后,4～6叶期经适当低温处理后均可正常开花结实;转基因苗不移栽直接在试管中经适当低温处理也可以通过春化阶段;春性转基因油菜的春化处理时间长短与开花时间早晚有关,春化处理时间最长的,开花也最早,与开花株率关系不大;冬性半冬性转基因油菜的开花株率与春化处理时间长短呈正相关;4～6叶期转基因半冬性油菜通过春化阶段需时35～40 d以上,转基因冬性油菜通过春化阶段需时50 d,且适当延长春化时间能促进花期提前.
- 孙燕飞康振生张岗韩青梅
- 关键词：甘蓝型油菜转基因试管苗
