宋丽敏 作品数:7 被引量:19 H指数:3 供职机构: 中国农业大学农学与生物技术学院植物病理学系 更多>> 发文基金: 科技基础性工作专项 国家重点基础研究发展计划 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
长春花花叶病病原物的分离和鉴定 2008年 长春花病原物采自海南省琼海市博鳌镇和广东省广州市星海公园,症状表现为系统花叶与畸形,对其进行染病外植体组织培养、鉴别寄主反应、传播方式鉴定、病毒粒体形态观察和血清学反应及病叶双链RNA(dsRNA)分析。引起长春花花叶病的病原物鉴定为黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV),克隆该病毒分离物外壳蛋白基因核苷酸序列,并对该核苷酸序列进行生物信息学分析,结果显示侵染我国长春花引起长春花花叶和畸形的CMV分离物应初步划归在CMVIB亚组。 曹言勇 施艳 范在丰 宋丽敏 田国忠关键词:花叶病 黄瓜花叶病毒 三七上番茄花叶病毒的初步鉴定 <正>三七(Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen)又名田七,金不换,主要产于云南文山。由于其分布范围的局限,迄今为止,国内外少有关于三七病毒病的报道。用从云南采集的表现明显皱缩(P1),蕨叶(P... 宋丽敏 梁文星 姜辛 范在丰 李怀方 陈树旋文献传递 三七Y病毒的分子鉴定与检测 三七(Panax notoginseng)是一种重要的中药材,具有药用和保健价值。近几年,在三七各主要种植区先后发生了危害严重的病毒病,引起的症状种类较多,常见的主要有皱缩、花叶等。三七病毒病严重影响三七的生活力,降低其... 燕照玲 宋丽敏 周涛 李怀方 范在丰文献传递 侵染节瓜的小西葫芦黄花叶病毒CP基因的克隆、表达及其抗血清的制备 被引量:6 2005年 通过鉴别寄主反应、病毒部分序列测定确定了采自广州白云区表现花叶、斑驳症状的节瓜上的病毒为ZYMV。采用RT PCR方法扩增和克隆了该病毒的外壳蛋白基因 ,连接到原核表达载体pET 2 2b(+)上。获得的重组子pET ZCP转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,用IPTG进行诱导表达。SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达 ,融合蛋白分子量约为 33 0kD。将融合蛋白纯化后免疫兔子 ,获得了特异性较高的抗血清。ELISA测定其效价为 1 4 0 宋丽敏 卢彩鸽 梁文星 黄金光 李怀方关键词:小西葫芦黄花叶病毒 外壳蛋白 抗血清 新疆杨胰蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达 被引量:7 2006年 杨树受损伤后能诱导一些基因的表达,其编码的蛋白质可能在杨树的防卫反应中起一定作用。用PCR方法从新疆杨叶片中克隆出一个损伤诱导型Kun itz胰蛋白酶抑制剂基因PaTI1。序列分析表明:此基因不含内含子,其翻译起点上游具有‘TATA’和‘CCAAT’等转录控制元件,包含的阅读框架能编码一个长为213个氨基酸的多肽。此多肽与克隆自美洲山杨的PtTI2和PtTI1氨基酸序列同源性最高,分别为95%和80%,其N端存在一长度为27个氨基酸的信号肽。将此基因以融合蛋白的形式在大肠杆菌中进行表达,纯化后的融合蛋白对胰蛋白酶的活性有抑制作用,每8.5μg融合蛋白可完全抑制1μg牛胰蛋白酶的活性。W estern b lot分析表明融合蛋白与PtTI2特异的抗体之间有明显的血清学反应。 梁文星 范在丰 李永 宋丽敏 李怀方 田国忠关键词:新疆杨 三七病毒病害病原的初步鉴定 本文以表现皱缩症状的三七叶片为研究对象,通过生物学、血清学、电镜观察及分子生物学方法初步证明表现该种症状的三七中含有包括一种马铃薯Y病毒属病毒在内的至少3种不同病毒,采用RT-PCR方法自扩增出小西葫芦黄花叶病毒(Zuc... 宋丽敏关键词:病毒病 病原 原核表达 文献传递 紫藤脉花叶病毒cp基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备 被引量:4 2004年 采用RT-PCR方法自紫藤脉花叶病毒北京分离物(WVMV-BJ)的基因组中分离出其CP基因,连接到原核表达载体pET22b(+)上。获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot分析表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白分子量约为34.4kDa。将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性较高的抗血清。微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1/1024,酶联法(enzyme-linkedimmunosorbantassay,ELISA)测定的效价为1/8192。 梁文星 宋丽敏 黄金光 田国忠 李怀方 范在丰关键词:外壳蛋白 原核表达 抗血清 ELISA