张孝勇
- 作品数：16 被引量：26H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 磁共振新序列在膝关节软骨成像中评估比较
- 2002年
- 张孝勇刘玉敏魏经国王玮蒋向农
- 关键词：关节软骨磁共振成像图像质量
- 高胆固醇血症兔SO细胞BK/_（Ca）通道β1亚基基因表达变化及该基因的克隆分析
- Oddi括约肌/(sphincter of Oddi,SO/)是包绕于胆管末端,具有自主舒缩功能的平滑肌结构,对控制胆汁流入十二指肠起到重要作用。已经证实胆固醇代谢紊乱是胆囊胆固醇结石形成的重要因素之一,而胆汁中过饱和的...
- 张孝勇
- 关键词：高胆固醇血症ODDI括约肌L型钙通道
- 文献传递
- 高胆固醇血症兔Oddi括约肌张力变化及其机制的研究
- 研究背景：Oddi括约肌/(sphincter of Oddi，SO/)包绕于胰胆管汇合进入十二指肠处，是独立于十二指肠壁平滑肌，具有精细分工的肌性结构，在神经与激素的共同作用下，产生协调的舒缩运动，对调节胆囊充盈、控制...
- 张孝勇
- 关键词：ODDI括约肌高胆固醇血症钙离子通道钾离子通道
- 文献传递
- 兔BK通道β亚基多克隆抗血清的制备被引量：1
- 2005年
- 目的:用小鼠制备抗兔BK通道β亚基的抗血清。方法:采用RT-PCR扩增编码兔BK通道β亚基胞内段的基因。在大肠杆菌中表达GST-β亚基融合蛋白。以从PAGE凝胶上切下的融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗血清。用ELISA和Westernblot鉴定抗血清的特异性。结果:用RT-PCR扩增出约300bp的兔BK通道基因。序列分析显示,扩增的序列与已发布的新西兰大白兔骨骼肌BK通道的序列完全一致。在E.coliDH5α成功地表达Mr约为37000GST-β亚基融合蛋白。ELISA和Westernblot检测证明,针对GST-β亚基融合蛋白的抗血清,不仅可特异性地识别GST-β,也可识别源于兔组织的β蛋白。抗血清的最高滴度达1∶128000。结论:克隆了编码兔BK通道β亚基胞内段的基因,并成功地获得可特异性识别新西兰大白兔BK通道β亚基的高滴度抗血清,为BK通道的进一步研究提供了物质基础。
- 王亚蓉魏经国孙强马克军张孝勇张艳霞韩骅
- 关键词：BK通道抗体
- 高胆固醇对兔oddi括约肌BK通道β1亚基蛋白表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:研究高胆固醇作用下兔oddi括约肌(SO)钙依赖性钾通道β1亚基蛋白水平的变化。方法:制备鼠抗兔SO细胞钙依赖性钾通道β1亚基抗血清,进行免疫组化染色,观察高胆固醇对oddi括约肌钙依赖性钾通道β1亚基蛋白表达的影响。结果:免疫组化染色显示,高胆固醇组SO细胞钙依赖性钾通道β1亚基的蛋白表达降低,半定量分析显示,高胆固醇兔oddi括约肌BKca通道β1亚基蛋白表达水平与对照组比较有统计学意义。结论:高胆固醇可下调兔oddi括约肌BKca通道β1亚基蛋白表达的水平,从而影响BKca通道的功能。
- 杜滂魏经国崔光彬王亚蓉张孝勇马克军
- 关键词：胆固醇Β1亚基ODDI括约肌
- 放射诊断科工程技术人员继续教育问题的思考
- ＜正＞ 医学影像技术学是当代医学影像学与微电子技术、计算机系统迅速发展的必然结果,具备了一套完整的理论内容,它是建立在理工学、医学基础上的一系列复杂的技术过程,为临床提供了更丰富、更精确的诊断信息,并包涵对各种成像设备、...
- 梁国民崔光彬魏经国宋立军张纪张孝勇
- 文献传递
- 兔大电导钙敏感性钾离子通道β亚基的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2007年
- 目的:克隆新西兰白兔大电导钙敏感性钾离子通道(BKCa)β亚基基因,观察其组织分布,并对其进行生物信息学分析.方法:采用3′及5′cDNA末端快速扩增(RACE)及RT-PCR技术从兔Oddi括约肌(SO)组织获得BKCa通道β亚基的全长cDNA序列.并应用生物信息学方法分析该基因的同源性、蛋白结构域及跨膜拓扑结构.结果:兔BKCa通道β亚基基因cDNA全长为1168bp,开放读窗长度为576bp,编码191个氨基酸.生物信息学分析表明该基因核酸序列及氨基酸序列与人类及其它哺乳动物有很高的同源性;拓扑结构为两次跨膜蛋白,具有4个功能结构域,含有1个磷酸化位点及2个N-糖基化位点.结论:首次成功地从兔SO组织克隆出BKCa通道β亚基基因,获得新GenBank号DQ821756,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.
- 张孝勇崔光彬杜滂马克军王亚蓉韩苇颜真张英起魏经国
- 关键词：CDNA末端快速扩增ODDI括约肌生物信息学
- 兔Oddi氏括约肌细胞BK通道Alpha亚基在Pichia酵母中的高效表达、纯化和鉴定
- 2005年
- 目的用巴斯德毕赤酵母系统表达兔Oddi氏括约肌(SO)细胞BK通道α亚基,并进行纯化和鉴定。方法采用RTPCR扩增编码兔SO细胞BK通道α亚基B细胞表位区基因的cDNA,经测序正确将其克隆入酵母表达载体pPIC9K,以电穿孔法转化酵母GS115。经MD平板筛选重组子、G418筛选鉴定后,甲醇诱导表达,镍离子亲合层析法对表达上清进行纯化,进行SDSPAGE和免疫印迹分析。结果用RTPCR扩增出约1497bp的兔SO细胞BK通道α亚基基因的cDNA。序列分析显示,扩增序列与已发布的新西兰大白兔骨骼肌BK通道α亚基的cDNA序列完全一致。SDSPAGE显示本系统表达的α亚基融合蛋白Mr约为55000,表达量约为55mg/L,纯度为96%。Westernblot检测证明,该α亚基融合蛋白可与兔BK通道α亚基多克隆抗体特异性结合。结论克隆了编码兔SO细胞BK通道α亚基B细胞表位区基因的cDNA,并在毕赤酵母中成功地表达了该蛋白,为进一步研究BK通道提供了物质基础。
- 王亚蓉魏经国樊建勇沈柱王秦芳张孝勇
- 关键词：分泌表达
- 高胆固醇血症兔Oddi括约肌细胞钾离子通道活性的改变被引量：2
- 2007年
- 目的:研究高胆固醇血症(hypercholesterolemia,HC)兔胆管Oddi括约肌(SO)收缩反应及钾离子通道活性的变化情况,并探讨其机制.方法:将24只新西兰雌兔随机分成两组,HC模型组和对照组各12只,分别取两组SO组织制备成离体肌环,观察SO肌环对KCl及钾离子通道阻断剂盐酸四乙铵(TEA)和4-氨基吡啶(4-AP)的收缩反应,并采用Western blot技术,检测两组兔SO组织中钾离子通道的表达情况.结果:60mmol/LKCl所诱发的HC组和对照组SO肌环的收缩力分别为1.23±0.08g和1.52±0.11g,HC组的收缩反应明显高于对照组(t=5.89,P<0.05).以1mmol/L为浓度梯度累积加入TEA,从3mmol/L至8mmol/L,HC组SO肌环对TEA的相对收缩反应在各个浓度点均明显低于对照组(t=2.72,P<0.05).以2mmol/L为浓度梯度累积加入4-AP,从8至18mmol/L,HC组SO肌环对4-AP的相对收缩反应在各个浓度点均较对照组显著降低(t=4.71,P<0.05).蛋白免疫印迹半定量分析显示HC组SO组织BKCa通道相对光密度为0.36±0.06,对照组为0.84±0.03,HC组BKCa通道蛋白表达量明显降低(t=3.18,P<0.05).结论:HC兔SO肌环的收缩反应增强,SO细胞BKCa及KV通道活性降低,BKCa通道蛋白表达量降低,这可能是导致HC兔发生SO功能紊乱的原因之一.
- 张孝勇马进杜滂马克军王亚蓉魏经国
- 关键词：高胆固醇血症ODDI括约肌钾离子通道
- bcr-abl融合基因特异性siRNA对K562细胞生物学特性的影响被引量：4
- 2005年
- 目的应用特异性siRNA(小干涉RNA)抑制慢性粒细胞白血病bcrabl融合基因表达,观察其对K562细胞生物学特性的影响。方法以慢性粒细胞白血病细胞系K562为研究对象,合成并转染针对K562细胞bcrabl融合基因融合位点的21ntsiRNA,应用Westernblot法检测bcrabl融合基因的表达;3HTdR掺入法检测K562细胞的增殖活性;AnnexinⅤFITC/PI染色法检测K562细胞的存活状况;流式细胞仪法检测K562细胞周期变化以及联苯胺染色法检测K562细胞的分化状况;应用Westernblot法检测凋亡相关蛋白BclxL/Bax的表达。结果(1)RNA干涉组K562细胞bcrabl融合基因的表达水平明显下降;(2)RNA干涉组的CPM值(每分钟脉冲数)在siRNA转染K562细胞第24h,48h,72h和96h均明显低于对照组(下降率依次为3306%,5225%,5764%,7087%),(3)RNA干涉组转染48h时有432%的K562细胞发生凋亡;(4)RNA干涉组K562细胞凋亡相关蛋白BclxL的表达水平下调,但Bax的表达无明显变化;(5)RNA干涉组K562细胞联苯胺染色阳性比例增加,部分K562细胞向红系分化;(6)RNA干涉组K562细胞出现明显的G1期阻滞。结论特异性siRNA分子可以显著抑制bcrabl融合基因的表达,影响K562细胞的基本生物学特性,最终导致K562细胞分化或凋亡。
- 王莎柴玉波刘飞张孝勇贾卫谢鑫于文强尚振川金伯泉孙秉中
- 关键词：K562细胞BCR-ABL融合基因特异性BLOT法小干涉RNARNA分子
