张曼夫
- 作品数:64 被引量:335H指数:11
- 供职机构:中国农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河北省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白G对病毒吸附、侵入、复制和细胞间接合传染的影响被引量:1
- 2005年
- 利用分离纯化的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)天然糖蛋白G及其制备的抗体处理,测定对ILT病毒(E3毒株和Zhonghai毒株)吸附、侵入、复制和病毒从细胞到细胞直接感染的影响.结果证明,ILTV天然糖蛋白G及抗糖蛋白G抗体对病毒的吸附和侵入无明显影响.添加糖蛋白G对病毒从CEL细胞到CEL细胞直接感染和病毒在CEL细胞上的复制的影响不明显,但添加抗糖蛋白G大鼠IgG却显著抑制病毒的复制,表现为噬斑变小,病毒复制曲线降低.激光共聚焦扫描显微镜观察结果显示ILTV糖蛋白G存在于鸡原代肝细胞核外周质及细胞膜上,并且糖蛋白G聚集在细胞融合部位.推测糖蛋白G可能促进了细胞的融合或参与病毒从细胞到细胞的直接感染,从而影响病毒复制和噬斑的形成.
- 孙照刚张曼夫
- 关键词:鸡传染性喉气管炎病毒细胞间ILTV显微镜观察肝细胞核细胞融合
- 等电聚焦电泳制备绿色木霉纤维素酶被引量:5
- 1994年
- 采用颗粒胶平板等电聚焦电泳技术从绿色木霉的纤维素酶粗酶液中分离纯化了11个酶组分并测定了它们的分子量、等电点及其对数甲基纤维素、微晶纤维素、对硝苯基葡萄糖苷和纤维二糖等的酶活性。
- 俞莲君张曼夫陈红英
- 关键词:纤维素酶绿色木霉
- 牧羊犬IFN-β基因的克隆和序列分析
- 2011年
- 为对犬干扰素-β(IFN-β)进行研究,用PCR技术从犬血细胞基因组DNA中扩增了牧羊犬IFN-β基因,并克隆到pGEM-T载体,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,阳性克隆经PCR和酶切鉴定后进行测序。结果表明:牧羊犬IFN-β基因含561bp,编码186个氨基酸,前21个为信号肽。成熟蛋白理论分子量为20kD,等电点为5.737,有2个潜在磷酸化位点、5个N糖基化位点和4个半胱氨酸残基,大部分为亲水区。二、三级结构预测显示,蛋白主要由5段α螺旋组成。犬IFN-β基因与赤狐的完全相同,与貉、雪貂和猫的同源性很高(85%~98.4%),在进化树中处于同一分支,而与禽类和鱼类的同源性仅为2.9%~8.6%。
- 夏润玺张曼夫
- 关键词:基因克隆
- 传染性法氏囊病病毒抗原性研究进展被引量:3
- 1995年
- 传染性法氏囊病病毒抗原性研究进展江青艳,张曼夫(北京农业大学)传染性法氏囊病(IBD)是严重危害养鸡业的一大疫病,其病原为IBD病毒(IBDV)。IBDV在分类上属于双RNA病毒科,病毒基因组共编码出VP1、VP2、VP3和VP4四种主要的病毒蛋白,...
- 江青艳张曼夫
- 关键词:鸡病IBD病毒抗原性
- DNA序列测定质粒模板法的改良被引量:1
- 1994年
- 研究了以质粒为模板Sanger双脱氧链终止法测定DNA序列的操作条件。用本实验改良的制备质粒模板方法和测序反应程序,使以32P为DNA合成标记、双链质粒为模板的测序结果基本达到以35S以33P为标记、M13单链DNA为模板的测序效果,实验操作简便、成本低。
- 王建荣张曼夫杨颐龚晓磊张平沈建英顾朝旭赵洪兴
- 关键词:质粒DNA
- IBDV强毒株与弱毒株对SPF鸡侵染过程的研究被引量:11
- 2003年
- 用DIG标记PS19探针和异硫氰酸荧光素标记的鸡抗IBDVIgG,对人工接种IBDV强毒株Hrb和弱毒细胞适应株Ts后不同时间段的法氏囊、盲肠扁桃体、脾、肾、肝、胸腺、大腿及胸部肌肉的石蜡切片分别进行原位杂交和荧光抗体检测。同时将各时间段每种组织的石蜡切片进行HE染色以观察组织破坏情况。结果发现,用原位杂交和荧光抗体两种方法首先分别于接种Hrb后8h和16h在法氏囊中检测到IBDV的阳性信号,然后依次是盲肠扁桃体、脾、肾、肝、胸腺。侵害程度以法氏囊最重。实验结果表明:Hrb毒株在组织中复制速度快,并迅速在SPF鸡体内传播。Ts毒株侵染较轻,对器官组织无损伤。
- 乔素兰张曼夫黄广明
- 关键词:弱毒株SPF鸡侵染过程原位杂交荧光抗体
- 利用原位杂交技术检测新疆牛结核病标本中结核菌的研究被引量:6
- 1999年
- 采用原位杂交技术将地高辛标记的牛结核杆菌特异性探针即248bp基因片段用于检测10份患病牛肺病变组织福尔马林固定切片标本。结果表明:基因探针原位杂交技术对切片标本的检出率较常规涂片染色高,分别为80%和50%,其定位观察到组织切片中的结核杆菌,又能获得有关细菌及其周围组织的原有位置关系,是一种敏感、特异的诊断方法,适应于固定标本、涂片标本的结核菌检测。
- 蔡宏呼西旦李淑霞武坚李君莲张曼夫
- 关键词:结核杆菌病组织切片基因探针原位杂交
- 绿色木霉纤维素酶CBHII基因的分子克隆被引量:28
- 1994年
- 本文以噬菌体lambda EMBL3 DNA为载体,通过克隆绿色木酶(Trichoderma viride)高分子量基因组DNA的部分酶解片段,并将重组分子进行体外包装后侵染Escherichia.coli K802,由此构建了绿色木霉基因文库。以李氏木霉(Trichoderma reesei)纤维素酶CBHII基因的末端片段为探针,用轮迥噬菌斑原位杂交从文库中筛选出CBHII基因的阳性克隆5个,随机取其中3个克隆用上述探针作斑点杂交,结果进一步证明克隆了全长或近全长的绿色木霉CBHII基因,用李氏木霉CBHI基因的末端片段探针作斑点杂交,结果提示CBHI与CBHII基因的末端序列之间无同源性存在。从斑点杂交的阳性克隆中提取DNA,酶切鉴定插入片段的长度,并克隆于质粒pUC19,Southern杂交结果证明获得了含绿色木霉CBHII基因的重组质粒pCBHII-14。
- 王建荣张曼夫
- 关键词:木霉纤维二糖水解酶纤维素酶
- 应用生化遗传标记选育北京黑猪瘦肉系的研究
- 本文介绍了以猪脂肪组织中NADPH-生成酶活性作为生化遗传标记,结合常规育种技术,对北京黑猪连续选育五个世代,达到提高其瘦肉率保持其优良品质的目的.
- 张曼夫王凤来刘芃芃陈清明樊生南
- 关键词:脂肪合成北京黑猪生化遗传生物育种
- 文献传递
- 基因重组狂犬病疫苗研究进展被引量:4
- 1999年
- 李伟张曼夫王树惠
- 关键词:狂犬病疫苗基因重组疫苗