方志锴
- 作品数：37 被引量：40H指数：3
- 供职机构：福建省微生物研究所更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项福建省属公益类科研院所基本科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一种嗜铁素类化合物Fradiamine C及其发酵菌株与发酵方法
- 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种新型嗜铁素类化合物，并进一步公开了可发酵所述化合物的链霉菌，以及基于所述菌株进行发酵制备所述嗜铁素类化合物的方法。本发明所述嗜铁素类化合物Fradiamine C为新型结构嗜铁素...
- 陈名洪江红陈建伟呙瑜琪方志锴
- 嗜盐糖单孢菌FIM SY0001-1次级代谢产物的研究被引量：3
- 2017年
- 目的本研究对采自青海湖的嗜盐糖单孢菌FIM SY0001-1发酵液中的次级代谢产物进行提取分离纯化。方法采用大孔树脂吸附、硅胶柱层析、反相柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20及制备HPLC等方法分离纯化次级代谢产物,并通过MS和NMR等数据解析其结构。结果从该菌株发酵液中分离纯化得到6个化合物,其结构分别鉴定为N-甲基-3-甲酰胺-1H-吲哚(1)、N-乙酰基色胺(2)、β-卡巴林(3)、(Z)-9-十八碳烯酸(4)、(Z)-9-十八碳烯酸甲酯(5)、甘油醇-α-单油酸酯(6)。结论 6个化合物均为首次从该种糖单孢菌中分离得到。活性分析表明生物碱1~3具有一定的抑菌活性。
- 陈丽赵薇陈名洪方东升方志锴江红连云阳
- 关键词：分离纯化抑菌活性
- 大环内酯类化合物产生菌的基因筛选及其代谢产物研究被引量：5
- 2017年
- 应用Ⅰ型聚酮合酶(PKS-I)基因筛选体系从32株海洋放线菌中寻找大环内酯类化合物的潜在产生菌,通过DNA序列相似性比对从5株阳性菌株中筛选获得了游动放线菌Actinoplanes sp.FIM060065。采用HPLC制备色谱从该菌株发酵液中分离纯化得到一个大环内酯类化合物FW060065,紫外、质谱以及核磁共振波谱分析表明它与台勾霉素B同质,药敏实验表明其对艰难梭菌、消化链球菌、双歧杆菌等革兰氏阳性厌氧菌显示出较强的抗菌能力。本研究通过基因筛选获得了台勾霉素的产生菌及其相应的代谢产物,为Ⅰ型聚酮合酶基因与大环内酯类化合物之间的联系提供了证据。
- 江宏磊方志锴陈名洪彭飞江红连云阳
- 关键词：聚酮合酶基因筛选代谢产物
- 海洋青铜小单孢菌菌FIM02-523全基因组序列测定及分析
- 周剑方志锴孙菲
- 31-去甲氧基-他克莫司的突变生物合成
- 2017年
- 目的通过突变生物合成获得31-去甲氧基-他克莫司。方法针对大环内酯类免疫抑制剂他克莫司的聚酮链起始底物4,5-二羟基-1-烯-环己酸(DHCHC)合成酶fkbO基因,构建基因敲除载体pFIM412-fkbO并对他克莫司产生菌Streptomyces sp.FCZ-0311 fkbO基因进行框内缺失。结果获得突变株Streptomyces sp.OD14-1,经摇瓶发酵和产物HPLC分析,该突变株完全丧失了合成他克莫司的能力。在OD14-1摇瓶发酵36h后添加DHCHC类似物反式-4-羟基环己烷羧酸,发酵6d后经HPLC-MS检测发现分子量为773的他克莫司衍生物31-去甲氧基-他克莫司。结论构建了可用于他克莫司突变生物合成的基因工程菌Streptomyces sp.OD14-1,并通过外源物质的添加获得31-去甲氧基-他克莫司。
- 方志锴吴声栋江红严凌斌连云阳
- 关键词：他克莫司
- 一种发酵产Rakicidin A的海洋小单孢菌株及其应用
- 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种发酵产Rakicidin A的海洋小单孢菌株及其应用。本发明通过对现有产Rakicidins化合物的海洋小单孢菌株FIM02523进行诱变育种，得到一株高产Rakicidin A...
- 周剑林风江红连云阳江宏磊陈丽赵薇方志锴
- 文献传递
- 两株来源于海洋的神经氨酸酶抑制剂产生菌的鉴定被引量：1
- 2019年
- 对分离自台湾海峡海底沉积物样品的两株神经氨酸酶抑制剂产生菌FIM09-1157及FIM09-0041进行分类鉴定。采用GA、YM212、HV琼脂培养基分离海洋放线菌,对FIM09-1157及FIM09-0041采用形态学、培养特征、生理生化、细胞化学组分及16S rRNA基因序列分析进行初步的分类鉴定。结果显示,菌株FIM09-1157归属于链孢囊菌属,定名为Streptosporangium vulgare FIM09-1157;菌株FIM09-0041归属于链霉菌属,定名为Streptomyces fradiae FIM09-0041。研究结果为开发新型神经氨酸酶抑制剂提供了新的种质资源。
- 谢阳彭飞江宏磊方志锴赵薇林如江红
- 关键词：神经氨酸酶抑制剂海洋放线菌多相分类鉴定
- 绛红色小单孢菌G1008接合转移体系的构建被引量：10
- 2011年
- 目的构建绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)的接合转移体系,并对该体系进行优化。方法以绛红色小单孢菌G1008染色体DNA为模板,经PCR扩增甲基化酶基因gntK的上下游序列各2000bp左右作为同源交换臂,并将红霉素抗性基因作为筛选标记插入两交换臂之间。以温敏型质粒pKC1139作为基本载体,构建重组质粒pFD306。借助接合转移技术,将该质粒导入绛红色小单孢菌G1008。结果经抗性筛选,得到一株阳性菌株,命名为GK1008,经PCR鉴定和测序,验证了重组质粒已整合到染色体上。GK1008菌株对红霉素和安普霉素的抗性均超过500μg/mL。结论绛红色小单孢菌接合转移体系的构建达到了预期目的,并实现了对该体系的优化,这为其它小单孢菌的分子遗传学操作提供了借鉴。
- 严凌斌洪文荣方志锴封成军
- 关键词：庆大霉素
- 子囊霉素产生菌吸水链霉菌FIM260840基因转移系统的建立被引量：2
- 2014年
- 目的:建立子囊霉素产生菌吸水链霉菌FIM260840的接合基因转移体系,以便基因敲除和外源基因表达等遗传操作。方法:以整合型质粒p SET152为出发质粒,通过接合转移构建并子囊霉素产生菌FIM260840的基因转移系统。结果:12.5μg/m L安普霉素可有效筛选接合子。经PCR验证,质粒成功整合到菌株FIM260840基因组DNA中,所获接合子的安普霉素抗性高达400μg/m L以上。接合子经多次传代后,导入的质粒p SET152仍稳定整合于接合子基因组DNA上。结论:建立了高效、简便的吸水链霉菌FIM260840的基因转移系统,为该菌的生物合成基因改造奠定了基础。
- 方志锴赵薇彭飞连云阳
- 关键词：吸水链霉菌P
- 一种发酵产Rakicidin A的海洋小单孢菌株及其应用
- 本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种发酵产Rakicidin A的海洋小单孢菌株及其应用。本发明通过对现有产Rakicidins化合物的海洋小单孢菌株FIM02523进行诱变育种，得到一株高产Rakicidin A...
- 周剑林风江红连云阳江宏磊陈丽赵薇方志锴
