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- 作品数：6 被引量：50H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 2012-2013年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gE、TK、gD基因序列分析
- 2012年伊始,猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由,对2012年3月至201 3年6月间采集的疑似PR病料接种Vero细胞并经PCR鉴定,分离到4株伪狂犬病病毒(Pseu...
- 余秋颖陈陆常洪涛陈文定明星郑关民张玉娟韩莎王川庆
- 关键词：伪狂犬病病毒TKGD基因
- 细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用被引量：2
- 2013年
- 为研究细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用,分别用酪氨酸蛋白激酶、酪氨酸蛋白磷酸酶、蛋白激酶C、Ca2+通道等信号转导抑制剂染料木黄酮、原钒酸钠、星状孢子素、硝苯地平和微丝蛋白聚合抑制剂细胞松弛素B处理鸡肠上皮原代细胞后,采用细胞免疫组织化学染色检测人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮原代细胞侵袭率,用间接免疫荧光双重标记检测ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞后F-肌动蛋白分布的变化。结果显示,染料木黄酮、硝苯地平和细胞松弛素B能显著抑制人源福氏志贺菌ZD02株内化,星状孢子素和原钒酸钠对ZD02株的内化无影响,人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞时F-肌动蛋白发生聚集。本研究表明人源福氏志贺菌ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞过程中需要酪氨酸蛋白激酶、Ca2+通道活化以及细胞微丝重排。
- 师润杨霞陈陆刘红英常洪涛余秋颖明星郑关民王川庆
- 关键词：细胞信号转导
- 细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用
- 前言志贺菌属肠杆菌科革兰氏阴性兼性厌氧菌,是人类和非人类灵长类动物细菌性痢疾的主要病原。许兰菊、王川庆等于2004年首次报道鸡志贺菌病例,主要以雏鸡脓血痢为特征,病死率可达3.84%～33.3%,耐过鸡生长缓慢。之前研究...
- 师润陈陆杨霞刘红英常洪涛明星余秋颖王川庆
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、A群轮状病毒和嵴病毒多重RT-PCR检测方法的建立及临床应用被引量：11
- 2013年
- 本研究建立了可同时检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis Virus,TGEV)、A群轮状病毒(Group A rotavirus,GARV)和猪嵴病毒(Porcine kobuvirus)的多重RT-PCR方法。检测中,建立的多重RT-PCR方法能够检测到500pg的TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒等量混合RNA模板,与常规的单一RT-PCR检测结果基本相同(检测TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒的灵敏性分别为100%、100%、93.33%和96.67%,特异性均为100%)。结果表明,建立的多重RT-PCR方法敏感性和特异性良好,可作为临床上猪病毒性腹泻病因快速、高效的诊断工具。应用该方法对2010-2012年华中地区190份腹泻仔猪样本进行检测,PEDV、TGEV、GARV和猪嵴病毒的阳性率分别为62.11%、0.53%、7.37%和82.11%。混合感染方面,PEDV和猪嵴病毒混合感染率为47.89%,PEDV和GARV混合感染率为4.74%,GARV和猪嵴病毒混合感染率为7.37%,PEDV、GARV和猪嵴病毒混合感染率为4.74%,未发现TGEV与其它3种病毒的混合感染情况。另外,有27份样本中仅检出PEDV(14.21%),57份样本只检出猪嵴病毒(30%)。分析表明,我国自2010年底大面积暴发的病毒性腹泻是多病原混合感染造成的,主要病原为PEDV,猪嵴病毒在其中所起作用尚待进一步验证和研究。
- 霍金耀郑逢梅陈陆余秋颖常洪涛陈文定明星郑关民赵军王川庆
- 关键词：PEDVTGEV
- 雏鸡肠组织β1基因的鉴定及时空表达特性
- 2014年
- 设计1对引物，建立RT—PCR方法对β1基因mRNA进行鉴定；以GAPDH基因为内参，建立检测鸡β1基因表达水平的sYBRGreenI实时荧光定量PCR方法，并用此方法测定1～20日龄雏鸡不同肠段组织81基因表达水平。结果显示，从鸡肠组织成功鉴定出β1基因mRNA；检测内参基因GAPDH和目的基因β1的实时荧光定量PCR方法扩增效率一致（扩增曲线斜率差〈0．1），满足使用比较Ct值法对B1基因mRNA进行相对定量分析的前提；扩增曲线、熔解曲线及凝胶电泳结果提示该方法特异性好。实时荧光定量PCR检测结果表明，1日龄雏鸡十二指肠和盲肠、10日龄雏鸡空肠和直肠、5日龄雏鸡回肠组织中β1基因相对表达量最高。结果表明，鸡肠组织中存在β1基因表达，并在不同日龄不同肠段表达水平存在差异。
- 师润吕文强陈陆杨霞刘红英余秋颖明星王川庆
- 关键词：雏鸡Β1基因实时荧光定量PCR
- 2012-2013年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gE、TK、gD基因序列分析被引量：37
- 2014年
- 2012年伊始,猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由,对2012年3月至2013年6月间采集的疑似PR病料接种Vero细胞并经PCR鉴定,分离到4株伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)。同时对该4株病毒的gE、TK和gD基因进行PCR扩增、克隆、测序及分析。序列分析显示:4株PRV河南分离株的gE、TK、gD基因有些核苷酸及氨基酸发生变化,不同于参考毒株;遗传进化分析显示:4株PRV河南分离株形成单独1个小亚群,与中国其他地区分离株之间的亲缘关系较近,与欧洲、南美洲分离株之间的亲缘关系较远,推测此4株河南分离毒株是新型国内流行株。
- 余秋颖常洪涛陈文定陈陆明星郑关民张玉娟韩莎王川庆
- 关键词：伪狂犬病病毒
