- 一种利用pSilencer质粒快速构建siRNA载体的方法
- 本发明公开了一种利用pSilencer质粒快速构建siRNA载体的方法。包括亚克隆载体的构建，用于快速筛选过程中的siRNA的合成方法，对含有siRNA的阳性克隆的快速筛选方法等步骤。相对于常规的载体构建方法，此方法能够...
- 孙汶生张之勇韩丽辉曹莉莉鞠瑛杜娟马恬侯楠曲忠花刘玉刚崔敏梁晓红
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- HBV核心抗原(HBc)转染抵抗TRAIL诱导Bel／7402肝癌细胞的凋亡及分子机制研究
- 目的:观察HBV核心抗原(HBc)对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体TRAIL(TNF-relatecd apoptosis inducing ligand)诱导Bel-7402肝癌细胞凋亡的影响及其机制的研究。方法:构建...
- 杜娟梁晓红张艳刘华崔敏曲忠花孙汶生
- 关键词：凋亡
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- 乙肝病毒核心蛋白真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建2种包含乙肝病毒核心蛋白(HBc)基因的真核表达载体,检测其在人肝癌细胞系BEL7402中的表达。方法以质粒pUC19/3.0HBV作为模板,PCR扩增HBc基因,分别以pcDNA3.0和pEGFP-N1为母本,构建含HBc基因的真核表达载体pcDNA-HBc-HA及pEGFP-HBc。通过单、双酶切、PCR及DNA测序鉴定其正确性。利用脂质体将其分别转染入人肝癌细胞系BEL7402,并采用RT-PCR、Western blot及荧光显微镜观察的方法,分别检测其mRNA、蛋白质水平的表达。结果获得与预期分子量大小一致的DNA片段,转染2种质粒的BEL7402细胞均可高水平表达HBc mRNA,而空载体转染组则无表达,转染pEGFP-HBc转染组及pEGFP-N1转染组,均有较强的绿色荧光表达,pcDNA-HBc-HA转染组细胞可检测到HBc-HA融合蛋白的表达。结论成功构建2种携载HBc基因的真核表达载体,并可在人肝癌细胞系BEL7402中有效表达。
- 赵培庆曲忠花盖潇潇张晓宁高立芬梁晓红
- 关键词：病毒核心蛋白质类基因表达
- 抑制Bax基因表达的siRNA和表达载体及其作为乙型病毒性肝炎治疗药物的应用
- 本发明公开了一种抑制人、小鼠Bax基因表达的siRNA及其针对Bax基因的shRNA表达载体，并且进一步提供了Bax基因的shRNA表达载体作为乙型病毒性肝炎保肝治疗药物的应用。本发明利用shRNA表达载体在体内进一步表...
- 孙汶生梁晓红刘玉刚崔敏曹莉莉侯楠马恬杜娟曲忠花刘华张之勇
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- 肝癌细胞转移机制及基因治疗对策研究
- 韩丽辉孙汶生张之勇曹莉莉马春红刘华梁晓红刘玉刚杜娟曲忠花
- 肿瘤细胞获得对失巢凋亡（anoikis）的抵抗性是肿瘤能够在脉管系统存活、并向远处转移的首要条件。本项目组对肝癌细胞在失巢压力下的生物学活性进行了探讨。我们建立了使肝癌细胞失巢的模型，发现肝癌细胞可以通过Synoikis...
- 关键词：
- 关键词：肝癌细胞基因治疗
- 获取体外转染成功的实体瘤细胞的方法
- 本发明公开了一种获取体外转染成功的实体瘤细胞的方法，包括以下操作步骤：1)取对数生长期单细胞悬液，用有血清培养液37℃培养20h；2)在无菌EP管中混合反义寡核苷酸；3)在另一支无菌EP管中混合脂质体，混匀后室温放置5m...
- 孙汶生韩丽辉曹莉莉梁晓红杜娟张之勇曲忠花刘玉刚刘素侠石永玉高立芬
- 获取体外转染成功的实体瘤细胞的方法
- 本发明公开了一种获取体外转染成功的实体瘤细胞的方法，包括以下操作步骤：1)取对数生长期单细胞悬液，用有血清培养液37℃培养20h；2)在无菌EP管中混合反义寡核苷酸；3)在另一支无菌EP管中混合脂质体，混匀后室温放置5m...
- 孙汶生韩丽辉曹莉莉梁晓红杜娟张之勇曲忠花刘玉刚刘素侠石永玉高立芬
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- 一种动态模拟人神经胶质瘤细胞转移的体外模型
- 本发明公开了一种动态模拟人神经胶质瘤细胞转移的体外模型，由人神经胶质瘤细胞系U251细胞以抗细胞附着的模型建立、人神经胶质瘤细胞体外转移模型的建立、对所构建的人神经胶质瘤细胞体外转移模型鉴定的步骤构建而成。本发明的模型可...
- 韩丽辉孙汶生张之勇曹莉莉梁晓红曲忠花杜娟马恬侯楠郭春刘玉刚
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- HBV对补体杀伤作用的影响及LPS对胞内DNA免疫的作用研究
- 第一部分:HBV及其片段HBc、HBx对补体介导的肝细胞杀伤作用的影响研究
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)在感染肝细胞中极易发生基因片段的整合从而导致病毒在机体内长期存在不易被清除,如今...
- 曲忠花
- 关键词：HBVCD59HBCLPSI型干扰素
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- 一种动态模拟人肝癌转移的体外模型
- 本发明公开了一种动态模拟人肝癌转移的体外模型，由高转移性的人肝癌细胞系BEL7402细胞以抗细胞附着的模型建立、肝癌细胞体外转移模型的建立、对所构建的肝癌体外转移模型鉴定的步骤构建而成。本发明的模型可以进行原位癌和转移过...
- 孙汶生韩丽辉张之勇曹莉莉梁晓红曲忠花杜娟马恬侯楠郭春刘玉刚
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