李壮
- 作品数:6 被引量:22H指数:2
- 供职机构:西北大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程医药卫生历史地理更多>>
- 铜绿假单胞菌丙酸代谢关键酶基因的克隆表达及生物信息学分析被引量:1
- 2023年
- 目的克隆表达丙酸代谢关键酶基因prpB、prpC和prpD,分析预测相应表达蛋白潜在的结构和功能,为铜绿假单胞菌新型抗菌靶点的开发奠定基础。方法对铜绿假单胞菌中丙酸代谢关键基因prpB、prpC、prpD克隆入大肠埃希菌,构建相应的基因工程重组菌,通过镍柱亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE检测PrpB、PrpC和PrpD蛋白的分子质量及纯度。利用生物信息学软件预测PrpB、PrpC和PrpD蛋白的理化性质、疏水性、信号肽、二级结构和三级结构。结果重组菌用0.5 mmol/L IPTG于16℃条件下诱导,表达的重组蛋白PrpB、PrpC和PrpD主要以可溶性形式存在于上清中,经Ni柱亲和层析纯化得到相对分子质量分别为32×10^(3)、42×10^(3)、55×10^(3)的目的蛋白,与预期一致。生物信息学分析PrpB、PrpC和PrpD蛋白分别由298、375、494个氨基酸组成,相对分子质量分别为32.14×10^(3)、41.69×10^(3)、54.88×10^(3),等电点分别为5.33、6.03、6.15。3种蛋白均为亲水性蛋白,无信号肽,无跨膜结构。蛋白亚细胞定位于细胞质中,α螺旋和无规则卷曲是PrpB、PrpC和PrpD二级结构的主要蛋白质元件。结论成功表达了重组蛋白PrpB、PrpC和PrpD并进行了纯化。生物信息学预测PrpB、PrpC和PrpD含有丰富的α螺旋和无规则卷曲结构,为揭示PrpB、PrpC和PrpD蛋白的结构及丙酸代谢在铜绿假单胞菌中的生物学功能奠定了理论基础。
- 崔国艳李壮崔佳刘建玲
- 关键词:铜绿假单胞菌蛋白表达生物信息学
- 光密度法测定蛋白核小球藻生物量被引量:18
- 2012年
- 目的修正传统光密度测定微藻生物量的方法。方法通过扫描并比较蛋白核小球藻藻液和总色素提取物在200~800nm范围内的吸光值,确定最佳波长以修正传统光密度法测定波长,绘制标准曲线来间接测定蛋白核小球藻的生物量。比较修正前后光密度法测定蛋白核小球藻生物量的精确性。结果 517nm下对应的吸光值与蛋白核小球藻的生物量有显著的线性关系。采用修正后光密度法测定干重量具有良好的线性关系:Y=0.257 8X-0.005 1(R2=0.995 6),相比传统光密度法具有更好的相关性;采用修正后光密度法测定细胞密度具有良好的线性关系:D=2 320.4X+0.030 6(R2=0.999 3),相比传统光密度法具有更好的相关性;修正后光密度法与干重法实时测定的蛋白核小球藻生物量结果基本一致,而传统光密度法与干重法具有一定的偏差。结论采用517nm修正传统光密度法测定波长,有效消除了色素干扰带来的误差,可以作为蛋白核小球藻生物量测定的特征波长。
- 王英娟贺敬李壮罗海羽
- 关键词:光密度法蛋白核小球藻
- 微藻光合作用产氢的研究进展被引量:2
- 2010年
- 化石燃料的枯竭和在燃烧过程中造成的严重环境污染使开发新能源的需求变得异常迫切。氢气由于具有热值高、来源广及无污染等优势,成为人们研究的热点;相比于传统的产氢方法,微藻产氢具有诸多优点而备受关注。文章在大量查阅文献的基础上,综述了微藻光合作用产氢,包括蓝藻固氮酶和可逆产氢酶的产氢过程,并阐明了可逆产氢酶产氢的机理;介绍了微藻基于硫饥饿的生理调控而发展起来的一步法与两步法的光解产氢方式,并指出其发展潜力;分析了当前实现微藻产氢存在的问题及展望。
- 李壮贺敬王英娟李花珍蒋海亮
- 关键词:固氮酶
- 微藻的固定化技术及应用研究
- 2010年
- 贺敬李壮王英娟马涛蒋海亮
- 关键词:微藻固定化
- 中国考古学碳十四年代学研究——以二里头遗址为例
- 本文立足考古学研究现状,从碳十四年代学近年出现的新老数据差异现象及其争议入手,通过分析碳十四年代学关键误差因素的变化、不同时期数据可靠性差异,确立了碳十四年代学1981年和1996年两个分期时间节点,提出对不同时期碳十四...
- 李壮
- 关键词:考古学二里头遗址
- 培养产油微藻的光生物反应器
- 本实用新型公开了一种培养产油微藻的光生物反应器,反应器筒体外罩为透明材料制作的双层结构,外层材料折射率小于内层材料折射率;反应器底面密布多个小突起,以使光线形成漫反射。本实用新型筒体采用不同折射率的双层透明材料,光线在筒...
- 王英娟李壮黄嘉骏贺敬唐泽丽吕腾李红伟
- 文献传递