李德芳
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属金山医院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 锚钉修复外踝骨折合并三角韧带损伤的疗效被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨锚钉修复外踝骨折合并三角韧带损伤的疗效。方法:对29例外踝骨折合并三角韧带损伤的患者均行外踝骨折内固定,同时对其中14例患者行三角韧带修复(手术修补组),对其余15例未行三角韧带修复(对照组)。术前采用重力位X线测距骨倾斜角度评估三角韧带损伤,术后11～16周采用美国足踝外科协会(American Orthopaedic Foot and Ankle Socie-ty,AOFAS)评分评估关节的临床功能,术后1年再次采用重力位X线片测距骨倾斜角度。结果:29例患者均获随访,修补组和对照组术前距骨倾斜角度分别为(11.57±0.97)°和(12.02±1.06)°,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);术后11～16周AOFAS功能评分显示,修补组和对照组的优良率分别为85.7%和53.3%(P<0.05);1年后修补组和对照组距骨倾斜角度分别为(1.28±0.11)°和(5.88±0.61)°,两组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:在骨折内固定的同时应充分重视三角韧带修复。
- 丁磊吴靖平李德芳曾庆敏
- 关键词：带线锚钉外踝骨折三角韧带
- 大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型的建立被引量：5
- 2015年
- 目的建立大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型。方法为了充分模拟退变椎间盘内营养缺乏的微环境,本实验分别采用含1%,3%,5%,8%,10%胎牛血清的DMEM培养基培养椎间盘髓核细胞,筛选最佳促凋亡浓度,分别检测髓核细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Bax、bcl-2、caspase-3酶的表达、细胞增殖曲线及免疫荧光分析。结果流式细胞仪测得髓核细胞凋亡率随着胎牛血清(FBS)浓度降低而升高,3%FBS为最有效诱导凋亡浓度;Western blot示Bax、caspase-3酶表达在3%FBS组明显高于10%FBS组,同时bcl-2表达下降;CCK-8检测结果显示含3%FBS的培养基内,随着凋亡率的增长,髓核细胞增殖的速率越来越慢;免疫荧光分析3%FBS组FAS表达量明显比10%FBS组增高。结论 3%FBS能诱导髓核细胞发生凋亡,最终会导致细胞功能丧失,caspase家族参与并执行了这一过程。
- 王厚磊卢伟李德芳丁磊吴靖平
- 关键词：椎间盘退变髓核细胞凋亡
- 猪髓核基质成分诱导骨髓间充质干细胞分化为脊索样细胞被引量：3
- 2019年
- 背景:脊索细胞对椎间盘内严酷的内环境有良好的抵抗性,或许是治疗椎间盘退变性疾病合适的种子细胞来源。猪髓核终生含有大量脊索细胞,其基质内含有多种细胞因子可以促进骨髓间充质干细胞向脊索样细胞分化。目的:观察猪髓核基质对骨髓间充质干细胞分化的影响。方法:体外分离、培养、鉴定猪骨髓间充质干细胞;制备猪髓核粉末,并用配置好的DMEM完全培养基重悬粉末制备成含猪髓核组织的DMEM培养基,对骨髓间充质干细胞进行诱导3周,RT-PCR检测脊索细胞标记性基因鼠短尾突变体表型(T)、细胞角蛋白8及细胞角蛋白18的表达。该实验经复旦大学附属金山医院动物实验伦理委员会批准。结果与结论:(1)原代培养的骨髓间充质干细胞具有贴壁生长能力,在特定诱导条件下具有成骨、成脂分化能力,且能表达间充质干细胞表面标记物CD90、CD105;(2)在猪髓核基质成分诱导下骨髓间充质干细胞形态发生变化,表达鼠短尾突变体表型、细胞角蛋白8、细胞角蛋白18;(3)结果显示,猪髓核基质成分能诱导骨髓间充质干细胞分化为具有脊索细胞表型的脊索样细胞,为椎间盘退行性疾病治疗提供可靠的种子细胞。
- 李德芳江增鑫曾庆敏吴靖平谢晓诚
- 关键词：椎间盘退变骨髓间充质干细胞髓核
- 大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡体外模型的建立被引量：3
- 2013年
- [目的]建立大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡体外模型。[方法]为了模拟椎间盘内部低营养低代谢环境,采用低胎牛血清培养法培养椎间盘软骨终板细胞分别含0%,1%,3%,5%,8%,10%胎牛血清,设置不同浓度梯度筛选最佳浓度,检测凋亡率、凋亡蛋白表达及caspase酶活性。[结果]低胎牛血清培养组细胞发生形态改变,DAPI染色阳性细胞增多;流式细胞仪检测凋亡率随着FBS浓度降低而升高,1%为最有效诱导凋亡浓度;Western blot示FAS、caspase-3、PARP、细胞色素C表达在1%FBS组明显高于10%时,同时caspase-3/8/9酶活性增高。[结论]低胎牛血清培养法能诱导体外培养的软骨终板细胞发生凋亡,最终会引起细胞功能丧失和椎间盘退变,caspase家族可能参与了这一过程。
- 李德芳吴靖平朱斌丁磊卢伟
- 关键词：凋亡CASPASES
- 大鼠半胱氨酸蛋白水解酶-3基因真核表达质粒和RNA干扰质粒的构建及鉴定
- 2011年
- 目的构建SD大鼠半胱氨酸蛋白水解酶（Caspase）-3的真核表达质粒和干扰质粒，探究干扰质粒对Caspase-3表达的干预效应。方法从SD大鼠软骨终板细胞中获得模板cDNA并扩增，约834bp。克隆至载体pEGFP—N1，获得重组质粒pEGFP-N1-Caspase-3。针对Caspase-3设计4对RNAi靶点序列，克隆至载体pcDNA6．2。成功构建pcDNA6．2-caspase．3．1、pcDNA6．2-caspase-3-2、pcDNA6．2-Caspase-33、pcDNA6．2-caspase-3-4，构建对照质粒pcDNA6．2-HIiRNA。将5个干扰质粒分别与pEGFP．N1．Caspase_3（用量比为7：1）共转染至293T细胞，qPCR检测转染48h后对caspase．3表达的干预效应。结果通过菌落聚合酶链反应（PCR）、酶切及测序表明pEGFP-N1-Capase-3和干扰质粒构建成功；共转293T细胞后，qeCR示pcDNA6．2-Caspase-32、pcDNA6．2-Caspase-3-3干预组的caspase-3的表达高于对照组，分别为33％和8％，而pcDNA6．2-Caspase-3-1、pcDNA6．2-Caspase-34干预组的caspase-3的表达与对照组比较明显减少，抑制效率分别为24％和67％（P〈0．05）。结论成功构建了Caspase．3的表达质粒和干扰质粒，并证实pcDNA6．2-Caspase-34对Caspase-3的表达具有明显的抑制效应。
- 吴靖平朱斌丁磊李德芳
- 关键词：RNA干扰质粒
- 大鼠髓核细胞体外衰老模型的建立被引量：1
- 2016年
- 目的:建立大鼠椎间盘髓核细胞体外衰老模型。方法:提取大鼠椎间盘髓核细胞,在完全培养基中培养,作为对照组;在对照组基础上加入终浓度为100μmol/L三丁基过氧化氢(t-BHP)培养2 h,构建髓核细胞体外衰老模型(衰老模型组)。采用Western印迹法检测两组髓核细胞的衰老相关指标微囊蛋白-1(caveolin-1)、β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)的表达量,同时采用CCK-8细胞增殖实验检测两组的细胞活性。结果:与对照组比较,t-BHP作用2 h后,衰老模型组caveolin-1、SA-β-gal表达量明显升高,且髓核细胞增殖速率减慢,细胞活性明显降低。结论:采用t-BHP诱导的方法能成功构建髓核细胞体外衰老模型,caveolin-1在此过程中诱发了髓核细胞的衰老。
- 王厚磊卢伟李德芳丁磊吴靖平
- 关键词：髓核细胞衰老
- 股骨取头器
- 本实用新型公布了一种股骨取头器，包括开槽的螺旋形股骨取头器，以及与其配套使用的防旋钢片；所述开槽的螺旋形股骨取头器包括横杆以及纵杆，横杆和纵杆一体成型，呈倒T字型；所述股骨取头器的头部呈螺旋形，该股骨取头器的头部位于所述...
- 吴靖平卢伟曾庆敏李德芳
- 文献传递
- Caspase-9抑制剂对SD大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨caspase-9抑制剂对低胎牛血清培养诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡影响的研究。方法取3月龄SD大鼠椎间盘软骨终板,序贯消化法获取细胞原代培养,以1%FBS培养48 h为诱导凋亡条件。实验分为1%FBS凋亡组、caspase-9抑制剂组(Z-LEHD-FMK)及DMSO对照组,分别处理细胞48 h,后经流式细胞仪检测细胞凋亡率、Western blot检测procaspase-9,active caspase-9及active caspase-3的表达。结果流式细胞仪检测显示,caspases-9抑制剂组细胞凋亡率(26.3±2.56)%与1%FBS组(40.8±0.84)%及DMSO组(40.2±1.56)%相比凋亡率较低,有显著统计学差异(P<0.05);Western blot检测caspases-9抑制剂组active caspase-9及active caspase-3较1%FBS凋亡组及DMSO对照组表达均明显减少,有显著统计学意义(P<0.05)。结论 Caspase-9抑制剂能明显抑制低胎牛血清培养诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡,有望成为治疗椎间盘退变的新型药物。
- 卢伟李德芳朱斌吴靖平
- 关键词：胎牛血清软骨终板凋亡
- 自制增高笼具结合双后肢大鼠建立椎间盘退变动物模型的影像学及形态学研究
- 2024年
- 目的:探索自制笼具建立双后肢大鼠椎间盘退变动物模型的影像学和形态学特点。方法:将新生幼鼠自肱骨上段用丝线结扎,然后截去双前肢。用特制的可不断加高笼饲养,改变其饲养条件,迫使大鼠只有依靠双后肢站立才能进食和饮水的活习惯,以此训练大鼠类似于人类直立活动。2周、4周、8周、24周摄腰椎侧位片及磁共振成像检查,测定椎间隙高度指数,按Pfirrmann分级。制作组织切片,HE染色后进行组织学评估。结果:造模2周X射线片显示,腰椎生理弯曲正常,椎间隙未见明显狭窄。随着时间延长,24周时椎体边缘变锐,终板软骨下骨密度增加,部分出现骨赘。磁共振成像时椎间盘信号改变,严重者出现“黑椎间盘”。Pfirrmann分级明显增加。组织学评分不断升高。结论:特制增高笼具结合双后肢大鼠可以建立椎间盘退变动物模型,使其更接近于人体自然退变,可用于椎间盘退变的研究。
- 李德芳蒋理想
- 关键词：椎间盘退变动物模型
