李智涛
- 作品数：46 被引量：55H指数：5
- 供职机构：河南科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 对临床诊断中先进技术的哲学思考被引量：3
- 2009年
- 临床诊断中先进技术的广泛应用开阔了医生的视野,但多年以来临床误诊率却居高不下。本文对此现象进行了辨证思考,指出临床医生应加强综合素质的培养,不断提高自身科学思维方法的修养,用科学的哲学思维方法驾驭先进的技术手段。
- 李智涛谢向波张芳伍军魏世梅
- 关键词：哲学
- 激活蛋白-1与p53基因启动子结合的染色质免疫沉淀技术分析
- 2008年
- 目的 检测肺腺癌A549细胞内的转录因子激活蛋白-1（AP-1）与p53基因调控区的结合情况。方法采用染色质免疫沉淀技术，用c-jun特异性抗体沉淀DNA，聚合酶链反应（PCR）技术检测p53基因5’端特异性序列。结果在c-jun特异性抗体免疫沉淀的DNA片段中扩增出p535’端的特异性序列。结论AP-1在A549细胞内结合于p53基因的调控区，参与该基因的表达调控。
- 沈飞李智涛吴逸明吴卫东
- 关键词：转录因子AP-1沉淀素试验
- 用ChIP技术分析A549细胞中AP-1与cyclinD1和caspase3基因转录启动子的结合
- 目的:检测肺腺癌A549细胞内的转录因子-激活蛋白1(AP-1)与cyclinD1和caspase3基因转录启动子的结合情况。方法:采用染色质免疫沉淀技术,用c-jun特异性抗体沉淀DNA,PCR技术检测cyclinD1...
- 沈飞李智涛赵瑞红吴逸明吴卫东
- 关键词：染色质免疫沉淀AP-1CYCLIND1CASPASE3
- 文献传递
- 一种Taq DNA聚合酶冷启动活性检测方法
- 发明是一种TaqDNA聚合酶冷启动活性检测方法，根据模板设计引物和假模板，将与假模板5’端部分互补的正义引物或反义引物混合后进行变性退火反应，得到二者的混合物；然后将所得混合物与PCR反应所需要的各种成分，模板DNA，5...
- 李智涛任爱红高秀菊张王丽王丽军冯艳铭
- 食管癌患者中牙龈卟啉单胞菌fimA基因的检出率和基因型分布
- 2019年
- 目的分析牙龈卟啉单胞菌fimA基因在食管癌患者和牙周健康人群口腔中的检出率和基因型分布。方法收集74例食管癌患者和135例牙周健康者口腔牙龈标本,PCR扩增fimA基因并测序,结果与标准菌株进行比对分型,并对实验数据进行统计分析。结果口腔内fimA基因PCR扩增结果为:食管癌组阳性52例(70.27%),牙周健康组阳性56例(41.48%)。食管癌组检出率明显高于牙周健康组(P<0.01)。食管癌组fimA基因测序成功49例,各型分布为:Ⅰ型2例(4.08%),Ⅰb型7例(14.29%),Ⅱ型31例(63.27%),Ⅲ型7例(14.29%),Ⅳ型2例(4.08%),Ⅴ型未检出。牙周健康组测序成功53例,各型分布为:Ⅰ型2例(3.77%),Ⅰb型14例(26.42%),Ⅱ型27例(50.94%),Ⅲ型6例(11.32%),Ⅳ型3例(5.66%),Ⅴ型1例(1.89%)。两组人群中均以fimAⅡ型占比最高,但两组人群fimA基因各型别之间构成差别无统计学意义(P=0.59)。结论食管癌患者口腔中牙龈卟啉单胞菌fimA基因的检出率明显高于牙周健康人群,但两组人群fimA基因各型别之间构成差异无统计学意义。
- 袁林超李智涛詹煜慧教杨高社干
- 关键词：食管癌牙龈卟啉单胞菌FIMA基因型
- 一种含诺如病毒RNA片段的假病毒颗粒及其制备方法
- 一种含诺如病毒RNA片段的假病毒颗粒及其制备方法，该假病毒颗粒是由MS2噬菌体外壳蛋白包裹诺如病毒RNA的一种RNA-蛋白复合体，RNA-蛋白复合体的形状为球状；设计并人工合成引物通过PCR的方法得到目的基因MS2，将其...
- 李智涛白永杰高秀菊董璠冯艳铭
- 文献传递
- α-常春藤皂苷对小鼠急性肝损伤自噬相关蛋白表达的影响被引量：2
- 2023年
- 目的 研究α-常春藤皂苷(α-hederin)对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤自噬相关蛋白表达的影响。方法 按体重将ICR小鼠随机分为正常组(等体积2%吐温80溶液),模型组(急性肝损伤模型,等体积2%吐温80溶液),低、高2个剂量实验组(急性肝损伤模型,40,80 mg·kg^(-1)α-常春藤皂苷)和阳性对照组(急性肝损伤模型,150 mg·kg^(-1)联苯双酯)。酶法测定血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活力,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的水平。苏木精-伊红染色(HE)观察组织病理变化。蛋白质印迹法检测肝组织中细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3β-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)和血管内皮组织酵母自噬基因-1(Beclin-1)蛋白表达水平。结果 在CCl4所致急性肝损伤小鼠实验中,正常组、模型组、低剂量实验组、高剂量实验组和阳性对照组小鼠血清GPT酶活力分别为(10.12±3.86),(97.96±17.07),(48.76±22.23),(34.80±14.38)和(51.57±17.13)U·L^(-1);血清GOT酶活力分别为(14.56±3.13),(39.04±6.21),(27.93±6.66),(24.39±2.60)和(31.44±3.32)U·L^(-1);正常组、模型组、低剂量实验组、高剂量实验组和阳性对照组小鼠血清中TNF-α含量分别为(110.73±24.54),(187.55±28.08),(160.51±14.30),(121.96±20.50)和(114.90±24.65)pg·mL^(-1);这5组小鼠血清中IL-6量分别为(26.38±3.11),(42.01±5.47),(34.13±3.89),(28.62±5.15)和(29.62±4.25)pg·mL^(-1);正常组、模型组和低、高2个剂量实验组LC3BⅡ蛋白表达量分别为2.23±0.36,1.00±0.17,2.47±0.62和3.41±0.49;这4组Beclin-1蛋白表达量分别为1.51±0.14,1.00±0.03,1.23±0.10和1.38±0.12。上述指标,模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);低、高2个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 α-常春藤皂苷对小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗炎症反应有关;α-常春藤�
- 刘宇王园园李智涛王梅林
- 关键词：急性肝损伤肿瘤坏死因子Α
- 煤焦沥青烟提取物致BEAS-2B恶性转化细胞中心体及其调控蛋白的变化被引量：1
- 2013年
- 目的 分析煤焦沥青烟提取物诱导人支气管上皮细胞BEAS-2B恶变过程中细胞内中心体及其调控蛋白的变化,探讨中心体在煤焦沥青烟提取物致肺癌中的作用及机制.方法 用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B的恶性转化模型,作为煤焦沥青烟提取物染毒组（煤焦沥青组）,设溶剂对照组和正常对照组平行传代培养,用细胞爬片间接免疫荧光法检测中心体改变,用实时定量反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测相关基因的mRNA表达;细胞爬片免疫组化半定量法检测相关蛋白表达.结果 煤焦沥青组第20代细胞中心体总异常率为6.56％±1.01％,明显高于正常对照组（3.40％±0.86％）和溶剂对照组（3.14％±0.59％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.与正常对照组（4.34％±1.04％）和溶剂对照组（4.33％±1.20％）比较,煤焦沥青组第30代细胞中心体总异常比例（22.39％±9.5％）明显增大,差异有统计学意义（P＜0.05）.煤焦沥青组第20、30代细胞的P53、P21基因和蛋白表达明显降低,Cyclin E基因和蛋白表达明显升高,与正常对照组相和溶剂对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 在煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞恶性转化过程中,中心体异常出现在细胞恶性改变前.中心体异常可能是通过P53/P2 1/CyclinE通路异常而引起.
- 李智涛冯艳铭王威燕贞王丽霞祝寒松赵勇吴拥军吴逸明
- 关键词：煤焦沥青中心体细胞周期蛋白质类
- IFN-λ1在HEK293T细胞中表达纯化及活性检测
- 2022年
- [目的]构建IFN-λ1真核表达质粒,利用人胚胎肾HEK293T细胞表达系统,获得具有良好生物学活性的IFN-λ1重组蛋白。[方法]将IFN-λ1目的基因克隆到pcDNA3.1+载体NheⅠ与XhoⅠ多克隆位点构建pcDNA3.1-IFN-λ1分泌表达质粒,并将其转染到HEK293T细胞中;采用Ni-NTA亲和层析方法分离纯化重组蛋白,SDS-PAGE和蛋白免疫印迹(Western Blotting)检测IFN-λ1的表达与纯度;采用qPCR、WB结合显微镜观察检测IFN-λ1的生物学活性。[结果]IFN-λ1真核表达质粒构建正确,而且能够在HEK293T细胞中分泌表达重组蛋白,分离纯化的IFN-λ1能够有效地诱导ISG15、ISG54、ISG56、OAS1、TNFα、MX1和TRAIL等凋亡相关基因的表达,激活p38促凋亡信号通路,抑制水泡性口炎病毒对BHK-21细胞的感染。[结论]成功构建了pcDNA3.1-IFN-λ1真核表达质粒,能够在HEK293T细胞中分泌表达IFN-λ1重组蛋白;分离纯化的IFN-λ1重组蛋白具有潜在的抗肿瘤和抗病毒生物学活性,为进一步研究IFN-λ1的功能和临床应用奠定了基础。
- 连丹花任蕾颖崔晓希邵晓亚李智涛蒙雪琼陈义祥
- 关键词：纯化生物学活性
- 煤焦沥青烟提取物致BEAS－2B恶性转化细胞端粒蛋白的变化被引量：2
- 2011年
- 目的通过检测端粒保卫蛋白复合体中端粒保卫蛋白1（POT1）、端粒重复序列结合因子1（TRF1）和TRF2在煤焦沥青烟致永生化人支气管上皮细胞（BEAS－2B）癌变细胞中的表达变化，探讨其在煤焦沥青烟致肺癌发生中的作用。方法用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂，建立BEAS－2B的恶性转化模型，用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应法（RT—PCR）检测POTI、TRF1和TRF2基因mRNA表达水平；细胞爬片免疫组化半定量法检测其蛋白表达改变。结果BEAS－2B恶性转化细胞POT1和TRF1基因mRNA表达水平（分别为：0．63±0．04，0．36±0．01）和蛋白表达水平（分别为：0．36±0．05，0．09±0．03）均下调，与正常对照组（mRNA：POT1：1．00±0．04，TRF1：1．01±0．16；蛋白：POT1：0．55±0．07，TRF1：0．27±0．07）和二甲亚砜溶剂对照组（mRNA：POT1：0．89±0．12，TRF1：0．90±0．08；蛋白：POT1：0．55±0．10，TRF1：0．26±0．04）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。BEAS-2B恶性转化细胞TRF2基因mRNA表达水平（1．45±0．07）和蛋白表达水平（0．88±0．06）均上调，与正常对照组（mRNA：1．00±0．07，蛋白：0．48±0．06）和二甲亚砜溶剂对照组（mRNA：1．00±0．06，蛋白：0．50±0．06）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论在煤焦沥青烟致支气管上皮细胞恶性演化过程中，POT1、TRF1和TRF2基因和蛋白表达水平发生变化。
- 王威李智涛祝寒松赵勇王丽霞燕贞李时恩许东吴卫东吴拥军吴逸明
- 关键词：煤焦油端粒
