杨建民
- 作品数：112 被引量：224H指数：9
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 实时荧光定量PCR检测PrP基因在金黄地鼠脑组织的动态表达被引量：1
- 2007年
- 金黄地鼠是研究动物传染性海绵状脑病的理想模型动物之一,其脑组织内朊蛋白基因动态表达数据的测定对探讨该类疾病的发生、发展和分子致病机理具有重要意义。我们利用实时荧光定量RT-PCR技术,对不同年龄金黄地鼠大脑、小脑、丘脑和脑干PrP基因的表达进行了定量。结果发现,脑的四个检测部位都呈现高的表达量,但是同一年龄段不同组织每纳克总RNA中朊蛋白基因的表达量和每毫克组织中朊蛋白基因的表达量有显著的差别,不同组织在不同年龄出现表达高峰。本研究的结果对于探讨朊蛋白的基本功能和脑组织在传染性海绵状脑病病理发生中的作用,提供了基础数据。
- 宁章勇赵德明杨建民周向梅于博孔小明尹晓敏
- 关键词：金黄地鼠朊蛋白基因表达
- 利用SYBR Green检测衣原体Real-Time PCR方法的建立被引量：2
- 2006年
- 利用SYBR Green建立了检测种特异性衣原体的Real-Time PCR方法。本方法应用衣原体种特异性的高度保守特异引物，能够扩增627bp特异片段；使用定量标准基因组DNA，本方法能准确检测最少250fg衣原体DNA。Real-TimePCR方法与免疫荧光方法的检测结果表明：检测4种衣原体临床样本，Real-TimePCR敏感性均在96％～98%；特异性均为100％；这两种方法符合率达97％以上（n=60）；批内和批间重复性试验结果表明，本方法具有良好的准确性。本方法的建立对于快速、准确检测临床样本种特异性衣原体提供了一种切实有效的方法。
- 杨建民郝永新赵德明何诚
- 关键词：SYBR衣原体REAL-TIMEPCR
- PrPc重组蛋白脑内接种金黄地鼠对mRNA表达的影响
- 目的为了观察PrPc重组结构蛋白的病原特征及病理组织改变特点,同时探求PrPc重组结构蛋白对PrPc基因表达的影响,为进一步研究PrPc生物学特性奠定基础。方法将PrPc重组蛋白颅内接种至金黄地鼠,临床观察记录。经过10...
- 杨建民赵德明李宁吴长德宁章勇郝永新韩彩霞
- 关键词：传染性海绵状脑病组织病理学分析实时荧光定量RT-PCR
- 文献传递
- RNAi抑制PrP表达载体的构建及其在PrP功能研究中的初步应用
- 2008年
- 本文旨在构建有效抑制朊蛋白(Prion protein,PrP)表达的重组质粒,并以此为工具控制PrP表达,从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段(shPrP),退火后与表达载体pG-super(Hairpin siRNA expressing vector)定向连接,构建重组质粒pG-super-shPrP。对重组子进行PCR鉴定,测序正确后,脂质体法转染C6细胞,采用实时荧光定量RT-PCR检测PrP mRNA的表达水平,以验证pG-super-shPrP的抑制效率;结果表明:重组质粒pG-super-shPrP构建成功,且显著降低C6细胞PrP mRNA表达(P<0.05),抑制效率为34.2%。利用pG-super、pG-super-shPrP分别转染C6细胞,并检测细胞SOD总活性及SOD表达水平,探讨PrP对细胞SOD活性的影响及其作用机制,结果表明PrP促进细胞SOD的活性(P<0.01),但对细胞SOD的表达量无影响,即PrP对SOD活性的促进作用与SOD1的表达量无关。本研究在成功构建了PrP的RNA干扰表达质粒的基础上,利用此质粒,在细胞水平上揭示了PrP对细胞SOD活性的促进作用。
- 李玉荣周向梅尹晓敏杨建民乔俊文赵德明
- 关键词：RNAIC6细胞朊蛋白超氧化物歧化酶
- PrP106-126毒性多肽影响小胶质细胞IL-1β、TNF-α的mRNA表达量变化的研究
- 体外合成的人PrP106-126毒性多肽具有PrPSc类似的特性,如富含β折叠,具有部分蛋白酶抗性,可以在脑组织内沉积形成淀粉样斑块等等。因此PrP106-126可作为替代PrPSc研究TSE发病机制的理想模型。PrP1...
- 杨利峰周向梅杨建民尹晓敏赵德明
- 关键词：小胶质细胞细胞因子
- 文献传递
- 人兽共患病的现状与防制(四)——疯牛病被引量：1
- 2005年
- 牛海绵状脑病(BSE),俗称“疯牛病”(MCD),属于可传播性神经退化性疾病(TSE)的一种。TSE是人和动物界中的一类遗传性、传染性和散发性的中央神经系统退行性脑病,最终可以导致患者死亡。动物的TSE除疯牛病外,还包括羊瘙痒病、水貂传染性脑病、猫科海绵状脑病及麋鹿慢性退行性疾病;人类的TSE则包括克雅氏病、库鲁病、吉斯综合征和致死性家族性失眠症。
- 杨建民苏敬良
- 关键词：人兽共患病疯牛病防制朊蛋白症状
- 鸡传染性囊病病毒青岛分离株VP2基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2009年
- 为了克隆传染性囊病病毒青岛分离株(IBDV-QD)的VP2基因及对其高变区序列进行分析,首先根据GenBank上已经发表的传染性囊病病毒(IBDV)UK661株的核苷酸序列,设计并合成了一对特异性的扩增IBDV-QDVP2基因的引物。以IBDV-QD株基因组为模版,利用RT-PCR技术扩增出长约1.5kb的基因片段,将其连接到pGEM-T-Easy载体上。经酶切分析、PCR鉴定及核苷酸序列测定,成功获得该分离株VP2基因的重组质粒。将IBDV-QD株VP2基因的高变区核苷酸序列及推导出的氨基酸序列与GenBank中公布的14株IBDV相应序列应用软件进行同源性比较,并构建系统进化树。同源性比较和进化树分析表明,IBDV-QD与IBDV超强毒株(vvIBDV)关系最近,与标准强毒株、弱毒株、变异株相差较远;并且我国不同地区的vvIBDV存在差异,这为我国传染性囊病的流行病学调查奠定了基础。
- 苏晓鸥乔俊文李玉荣赵德明杨利峰尹晓敏周向梅杨建民
- 关键词：VP2基因
- 酶联免疫吸附试验检测禽脑脊髓炎抗体方法的研究被引量：7
- 2002年
- 利用鸡胚成纤维细胞 (CEF)繁育禽脑脊髓炎病毒 (AEV) ,取其培养物 ,经差速离心提纯 ,做为酶联包被杭原 ,建立了检测AEV抗体的间接酶联免疫吸附试验 ,初步确定了各种反应条件 :抗原包被浓度 16 7μg/ml,待检血清 1∶10 0稀释 ,酶标抗体工作浓度 1∶5 0 0。以阴性血清OD值平均值加上 2个标准差作为界值 ,当待测样品OD值大于界值 0 2 7时 ,判为阳性 ,否则判为阴性。经交叉试验、阻断试验、重复试验和平行试验 。
- 秦卓明赵继勋杨建民金维江张世栋贾强
- 关键词：禽脑脊髓炎鸡胚成纤维细胞酶联免疫吸附试验抗体检测
- 牛结核病特异性诊断试剂和ELISA诊断试剂盒的
- 赵德明徐广贤郝俊峰李晶晶王金秀周向梅尹晓敏杨建民赵化阳
- 该成果首次对牛结核分枝杆菌哺乳动物细胞侵入蛋白（Mce4 E）和牛结核分枝杆菌复苏因子C进行体外重组表达，并应用于牛结核分枝杆菌诊断抗原的研究，同时我们也对牛结核分枝杆菌优势血清蛋白MPB83进行了研究，创造性的将三种重...
- 关键词：
- 关键词：牛结核病ELISA诊断试剂盒
- 朊病毒致病机理研究进展被引量：5
- 2004年
- 朊病毒病是由一种新型蛋白感染因子引起的人和动物可转移神经退化性疾病 ,又称海绵状脑病 ,最终可导致患者死亡。作者就朊病毒的致病机理 ,从朊病毒学说 ,致病性、生物学特性进行阐述 ,并从病原基因遗传结构特点 ,致病蛋白的结构特点和形成机制作以综述 ,为该类疾病的防治提供理论依据。
- 杨建民郝永新宁章勇赵德明
- 关键词：朊病毒致病机理疾病特征分子生物学
