杨胜辉
- 作品数：20 被引量：65H指数：5
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金湖南省自然科学基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 7种抗生素体外抗淋球菌的活性研究
- 2004年
- 目的 了解江门地区淋球菌流行株对抗生素的敏感性，为淋病的防治提供实验依据。方法 采用琼脂稀释法对1999年。2000年间广东江门地区分离出的95株淋球菌临床分离株进行了药物敏感性测定。结果 测定的7种抗生素中，对淋球菌敏感性较高的5种抗生素依次为阿奇霉素、罗红霉素、红霉素、头孢曲松和壮观霉素，其敏感率分别为100．0％、98．9％、98．9％、95．8％和94．7％。而淋球菌耐药性较高的2种抗生素依次为交沙霉素和头孢唑啉，耐药率均为8．4％。结论 阿奇霉素、头孢曲松和壮观霉素仍可作为江门地区淋病治疗的首选药物，但已出现耐药株，应引起临床医师的高度警惕；罗红霉素、红霉素可作为江门地区淋病治疗的替代性药物。
- 杨胜辉余敏君吴移谋胡四海曾铁兵谭立志
- 关键词：抗生素淋球菌淋病药物敏感性性传播疾病
- 淋球菌对7种抗菌药物敏感性的测定被引量：2
- 2004年
- 目的 了解江门地区淋球菌流行株对抗生素的敏感性 ,为淋病的防治提供试验依据。方法采用琼脂稀释法对 95株淋球菌临床分离株进行了药物敏感性测定。结果 在测定的 7种抗生素中 ,对淋球菌敏感性较高的 5种抗生素依次为阿奇霉素、罗红霉素、红霉素、头孢曲松和壮观霉素 ,其敏感率分别为 1 0 0 .0 %、98.9%、98.9%、95 .8%和 94.7%。而淋球菌耐药性较高的 2种抗生素依次为交沙霉素和头孢唑啉钠 ,耐药率均为 8.4%。结论 阿奇霉素、头孢曲松和壮观霉素仍可作为江门地区淋病治疗的首选药物 ,但淋球菌对头孢曲松和壮观霉素已出现耐药株 ,应引起临床医师的高度警惕 ;罗红霉素、红霉素可作为江门地区淋病治疗的替代性药物。
- 杨胜辉吴移谋余敏君胡四海谭立志黄■杰
- 关键词：淋病奈瑟菌琼脂稀释法抗生素敏感性
- 淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的克隆表达与鉴定
- 2004年
- 目的 构建表达淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法 用PCR方法从淋病奈瑟菌WHO标准株E株基因组扩增出PorB基因片段 ,插入 pUCm T载体中 ,序列测定正确后 ,将其亚克隆到表达载体 pQE3 0中 ,进一步测序正确后在大肠杆菌M 15中表达。 结果 获得淋病奈瑟菌PorB蛋白基因 ,经序列测定与GenBank公布的序列同源性高达 99% ;表达蛋白经SDS PAGE分析 ,相对分子质量与预期大小一致 ;重组蛋白经Western印迹法鉴定 ,在 3 4kD位置有特异条带 ,PorB蛋白在宿主菌中高表达。结论 基因重组表达的融合蛋白将有利于进一步研究淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的功能 。
- 陆春雪谭立志朱翠明万艳平余敏君杨胜辉
- 关键词：淋病奈瑟菌外膜蛋白克隆基因表达
- 淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2004年
- 目的 获取淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因 (porB)并构建其重组表达质粒。 方法 根据porB已知序列 ,设计合成一对引物 ,用PCR方法从淋病奈瑟菌基因组DNA中扩增出 porB基因片段 ,克隆到原核表达质粒 pQE3 0中 ,转化大肠埃希菌M15感受态细胞 ,经酶切和PCR鉴定 ,然后进行测序。 结果 porB基因体外扩增产物大小约为 911bp。重组质粒经双酶切和PCR鉴定表明为正确重组子 ,测序结果与已知序列基本吻合。 结论 成功克隆了淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因 ,为下一步PorB蛋白的功能研究和淋病奈瑟菌蛋白质疫苗的研制提供了基本的物质基础。
- 陆春雪谭立志尹卫国杨胜辉
- 关键词：淋病奈瑟菌编码基因克隆疫苗
- 淋病奈瑟球菌表面蛋白A基因疫苗的构建及其诱导小鼠的免疫应答被引量：5
- 2007年
- 目的构建淋病奈瑟球菌表面蛋白A(NspA)基因疫苗,并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法将NspA基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/NspA,并经PCR、双酶切及测序鉴定。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法分别检测NspA基因转染细胞后mRNA和蛋白的表达。以pcDNA3.1(+)/NspA重组质粒免疫45只雄性BALB/c小鼠,试管凝集法检测免疫小鼠抗体滴度,EIASA检测IFN-γ水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测脾淋巴细胞增殖。提取接种部位股四头肌总DNA,PCR检测BALB/c小鼠肌细胞内NspA基因。结果成功构建pcDNA3.1(+)/NspA基因疫苗,能在真核细胞中转录和表达。pcDNA3.1(+)/NspA免疫组的抗体滴度达1:640,pcDNA3.1(+)和PBS免疫组均无特异性抗体检出。空载体pcDNA3.1(+)组IFN-γ为(23.79±11.85)pg/mL,pcDNA3.1(+)/ NspA免疫组为(169.71±30.52)pg/mL(P<0.01);脾淋巴细胞增殖的刺激指数(SI)分别为1.05±0.30和1.94±0.74(P<0.01)。并证实NspA基因可在小鼠肌细胞中稳定存在。结论构建淋病奈瑟球菌NspA基因疫苗,将其免疫BALB/c小鼠可诱导特异性体液和细胞免疫应答,为进一步用于淋病预防奠定了基础。
- 谢良伊胡四海唐湘云杨胜辉余敏君韩福郎
- 关键词：膜蛋白质类抗体生成
- 2001～2002年江门市淋球菌对抗生素耐药性结果分析
- 2005年
- 目的了解江门地区淋球菌流行株对抗生素的耐药性及产青霉素酶淋球菌(PPNG)和高水平耐四环素淋球菌(TRNG)的流行状况。方法采用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)以及用改良碘法检测β-内酰胺酶。结果84株淋球菌共检出PPNG20株(23．8％)、TRNG22株(26．2％)，环丙沙星、四环素、青霉素、大观霉素及头孢曲松钠耐药率分别为89．3％、84．5％、82．1％、4．8％和3．6％，75.0％(63/84)的菌株对青霉素和环丙沙星交叉耐药，81．0％(68/84)的菌株对四环素和环丙沙星交叉耐药。结论广东省江门市目前流行的淋球菌菌株耐药状况十分严重，尤以耐环丙沙星为甚,大观霉素、头孢曲松钠的耐药性应引起临床医师的高度警惕,持续监测淋球菌的耐药性十分重要。
- 杨胜辉余敏君吴移谋胡四海黄澍杰曾铁兵赵飞骏
- 关键词：抗生素耐药性淋球菌流行株大观霉素交叉耐药琼脂稀释法耐药状况
- 梅毒螺旋体融合双价DNA疫苗的构建及其免疫活性研究被引量：13
- 2006年
- 目的构建含有梅毒螺旋体Gpd和Tp92抗原编码基因的真核表达重组体,并检测其在兔体内的免疫应答效果。方法定向克隆构建双基因融合真核表达重组体pcDNA3．1(+)/Gpd-Tp92,用免疫组化技术检测其在HeLa细胞中的表达；同时将其与先期构建的pcDNA3．1(+)/Gpd、pcDNA3．1(+)/Tp92真核表达重组体分别免疫新西兰兔,ELISA检测免疫兔特异性抗体产生水平和脾细胞IFN-γ诱导水平,MTT法检测兔脾细胞增殖水平。结果pcDNA3．1(+)/Gpd-Tp92在HeLa细胞中能有效表达。新西兰兔分别接种3种核酸疫苗后,均能产生特异性抗体,第3次免疫后2周抗体最高滴度均可达1∶1024及以上,免疫后兔脾细胞受相应蛋白刺激有明显增殖反应,细胞培养上清中IFN-γ水平显著升高。检测指标均显著高于空质粒对照组和空白对照组(P＜0．05)。3组核酸疫苗组抗体诱导水平差异无统计学意义,但Gpd-Tp92融合核酸疫苗组刺激机体引发特异性淋巴细胞增殖能力较之两单基因核酸疫苗组有明显提高。结论梅毒螺旋体真核表达重组体pcDNA3．1(+)/Gpd-Tp92的成功构建及对新西兰兔产生强特异免疫应答的有效刺激,为梅毒DNA疫苗的研究奠定一定的实验基础。
- 赵飞骏吴移谋张晓红刘双全杨胜辉余敏君
- 关键词：抗体生成
- 淋病奈瑟菌对大环内酯类药物的敏感性及mtrR基因突变与耐药关系的研究
- 目的:检测淋病奈瑟菌临床分离株对4种大环内酯类药物的敏感性,为临床治疗提供实验依据;研究mtrR基因突变与淋病奈瑟菌耐大环内酯类药物的关系,以了解淋病奈瑟菌对该类药物耐药的机制,为开发新一代抗淋病奈瑟菌大环内酯类药物提供...
- 杨胜辉
- 关键词：淋病奈瑟菌大环内酯类药物最低抑菌浓度耐药机制
- 文献传递
- 衡阳地区淋病奈瑟菌流行株对大环内酯类药物敏感性的研究被引量：1
- 2005年
- 目的了解淋病奈瑟菌流行株对大环内酯类药物的敏感性,为淋病的防治提供实验依据。方法采用琼脂稀释法对分离出的101株淋球菌流行株进行了药物敏感性测定。结果在测定的4种大环内酯类药物中,淋球菌对阿奇霉素敏感性最高,达100%;其次为罗红霉素,为96.04%。交沙霉素耐药率最高,达36.63%;红霉素耐药率其次,为20.79%;罗红霉素耐药率仅为3.96%。结论阿奇霉素可作为衡阳地区淋病治疗的首选药物,罗红霉素可作为淋病治疗的替代性药物。淋球菌对大环内酯类药物有一定的不完全交叉耐药性。
- 杨胜辉余敏君吴移谋胡四海谭立志冯敏黄澍杰
- 关键词：淋病奈瑟菌琼脂稀释法抗生素敏感性
- 衡阳地区淋球菌流行株对抗生素耐药性监测被引量：3
- 2005年
- 目的 了解衡阳地区淋球菌流行株对抗生素的耐药性及产青霉素酶淋球菌(PPNG)和高水平耐四环素淋球菌(TRNG)的流行状况。 方法 采用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)以及用改良碘法检测β-内酰胺酶。 结果 10 1株淋球菌共检出PPNG 3 2株(3 1.7% )、TRNG 2 0株(19.8% ) ,对四环素、环丙沙星、青霉素及大观霉素的耐药率分别为94.1%、91.1%、89.1%和2 .0 % ,未发现耐头孢曲松钠的菌株。淋球菌交叉耐药情况较为严重,79.2 %菌株对青霉素和环丙沙星呈现交叉耐药,84.2 %菌株对四环素和环丙沙星呈现交叉耐药。 结论 头孢曲松钠和大观霉素仍可作为衡阳地区淋病治疗的首选药物,但大观霉素已出现耐药株,应引起临床医师的高度警惕;
- 杨胜辉吴移谋余敏君胡四海谭立志赵飞骏黄澍杰
- 关键词：淋病奈瑟菌琼脂稀释法微生物敏感性试验
