杨连华
- 作品数：37 被引量：54H指数：4
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- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- HSV-2DNA疫苗诱导小鼠免疫应答研究被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨含有单纯疱疹病毒Ⅱ型 (HSV - 2 )糖蛋白D全基因序列的重组质粒作为DNA疫苗的可能性。方法 采用PCR方法获得HSV - 2 gD片段 ,构建含HSV -gD片段的重组质粒 pcDNA3- gD。重组质粒作为DNA疫苗免疫小鼠 ,观察其对小鼠免疫效果及保护作用。结果 重组质粒 pcCDNA3-gD免疫小鼠后可产生特异性抗体 ,可保护小鼠免受HSV - 2的致死性攻击 ,存活率达 75 %。结论 重组质粒 pcDNA3- gD可诱导小鼠产生特异性免疫反应 ,可以作为HSV的候选DNA疫苗。
- 洪艳杨连华陈勇经络蒋骏航王怡婷
- 关键词：单纯疱疹病毒DNA疫苗糖蛋白D
- 单纯疱疹病毒DNA疫苗的初步研究被引量：4
- 2003年
- 目的：探讨含有HSV—2糖蛋白D全基因序列的重组质粒作为DNA疫苗的可能性。方法：采用PCR方法获得HSV—2gD片段，构建含HSV—gD片段的重组质粒pcDNA3-gD。重组质效作为DNA疫苗免疫小鼠，观察其对小鼠的免疫效果及保护作用。结果：重组质粒pcDNA3-gD免疫小鼠后产生特异性抗体；可保护小鼠免受HSV—2的致死性攻击(存活率达75％)。结论：重组质粒pcDNA3-gD能诱导小鼠产生特异性免疫反应，可以作为HSV的候选DNA疫苗。
- 洪艳杨连华陈勇经络蒋骏航王怡婷
- 关键词：单纯疱疹病毒DNA疫苗小鼠特异性免疫反应感染性疾病单纯疱疹病毒感染
- HSV-2DNA疫苗诱导小鼠免疫应答研究
- 目的探讨含有单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D全基因序列的重组质粒作为DNA疫苗的可能性。方法采用PCR方法获得HSV-2gD片段,构建含HSV—gD片段的重组质粒pcDNA3—gD。重组质粒作为DNA疫苗免疫小鼠,...
- 洪艳杨连华陈勇经络蒋骏航王怡婷
- 关键词：单纯疱疹病毒DNA疫苗糖蛋白D
- 文献传递
- 戊型肝炎病毒结构蛋白基因的真核表达
- 戊型肝炎(HepatitisE)是一种由戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)引起的经肠道传播的病毒性肝炎,通常由于水源污染而引起暴发流行。该病常见于亚洲、非洲及中美洲等发展中国家,我国为高发区,人群感染...
- 经络洪艳杨连华王怡婷胡华军陈勇
- 文献传递
- 地高辛标记RT-PCR检测甲肝减毒活疫苗的研究
- 1999年
- 以编码甲肝病毒ＶＰ３ 羧基端的基因区为目标区，运用地高辛标记ＲＴＰＣＲ 法对甲肝疫苗进行检测，并与ＴＣＩＤ５０ 检测法进行比较。建立甲肝减毒活疫苗滴度的地高辛标记ＲＴＰＣＲ 检测法。结果显示：地高辛ＲＴＰＣＲ 法灵敏度略高于ＴＣＩＤ５０ 法，特异性与ＴＣＩＤ５０ 相似，且快速简便，易于推广应用。结果表明：地高辛标记ＲＴＰＣＲ 法是一种简便、快速、灵敏的甲肝病毒检测方法，可用作疫苗的常规检测。
- 洪艳陈勇罗永能杨连华
- 关键词：地高辛RTPCR甲肝疫苗滴度
- 抗戊型肝炎病毒结构蛋白多克隆抗体的制备
- 2009年
- 戊型肝炎是由戊型肝炎病毒（Hepatitis E Virus，HEV）引起的病毒性肝炎，该疾病主要经肠道传播，广泛流行于亚、非及美洲一些国家，发病例呈全球性分布，是发展中国家较常见的传染病，我国为高发区，人群感染率达17．2％，且呈上升趋势。近年的研究发现，
- 吴海波杨连华陶薇沃恩康王怡婷洪艳陈勇
- 关键词：戊型肝炎病毒病毒结构蛋白多克隆抗体人群感染率肠道传播
- 戊型肝炎病毒嵌合蛋白的免疫应答的初步研究被引量：4
- 2005年
- 目的:对含有HEV主要抗原表位的嵌合蛋白进行表达与纯化,并对其免疫原性进行研究.方法:将含有一段HEV ORF2基因片段(394～660 aa)和HEVORF3全基因的表达质粒pHEV23在大肠杆菌中进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,其表达产物经Ni2+-NTA树脂亲和纯化,透析复性.纯化蛋白免疫小鼠,用ELISA检测小鼠血清IgG抗体,T细胞增殖反应检测细胞免疫应答.以Western-blot检测纯化蛋白对患者阳性血清的免疫反应性.结果:纯化蛋白的分子量为 55 KDa,纯度达 90% 以上;实验组特异性抗体水平明显高于对照组;T细胞增殖反应实验组与对照组比较有极显著性差异.纯化蛋白能与患者阳性血清呈特异反应. 结论:嵌合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,为进一步研究开发HEV诊断试剂盒及基因工程疫苗提供了基础.
- 洪艳陈勇杨连华王怡婷经络胡华军
- 关键词：戊型肝炎病毒嵌合重组蛋白
- 中国五省市甲型肝炎病毒基因分型的研究被引量：13
- 2000年
- 为了解甲型肝炎 (甲肝 )病毒 (HAV)在中国几个城市的基因型分布 ,选择浙江杭州、江苏启东、安徽铜陵、云南昆明和上海市等的甲肝病人粪便标本或血清标本 ,以逆转录 -套式聚合酶链反应 (RT nPCR)扩增合成HAVVP1/2A交接区基因区 ,并进行直接核苷酸序列分析和差异比较。结果表明 ,从这些城市甲肝病人分离到的 17株HAV株均属基因Ⅰ型 ,为IA和IB亚型 ;所有HAV株间核苷酸差异均小于 15 % ,但约 5 0 %HAV株株间核苷酸差异大于 7 5 % ,说明中国流行或散发的HAV株可能有基因IA、IB亚型同时存在。该项研究结果将为HAV的分子流行病学追踪调查提供方法和依据。
- 陈勇洪艳杨连华倪崖陈念良凌志强愈为群毛江森
- 不同来源的两类El Tor霍乱弧菌致病性的研究
- 1991年
- 70年代在我国某些地区El Tor霍乱已经得到了控制,但从水中却不断检出El Tor弧菌而无病人发现,经检定这类菌株在家兔结扎肠段试验中为无毒或低毒菌株,生化测定山梨醇快速发酵试验均为阳性。与霍乱流行期自病人分离的菌株相比,病人菌株肠段试验为强毒或中等毒力,山梨醇快速发酵试验则均呈阴性(为慢发酵类型)二者有明显区别。 从流行病学特点表明上述两类菌株的发病与流行情况亦显然不同。强、中毒菌株引起霍乱的发病与流行已无可置疑,但这些自水中分离的无毒或低毒菌株是否有潜在的引起霍乱发病与流行的可能性尚不清楚。一般以肠段试验测定霍乱弧菌的毒力,系由多种毒力因素所决定,需进一步分析。霍乱弧菌的致病性除霍乱毒素外还需侵袭力因素的辅助,使弧菌能进入肠道、穿过粘液层,粘附于肠粘膜上皮细胞并在其表面定居繁殖。
- 江德杲娄峥励千里邵爱玉杨连华
- 关键词：霍乱弧菌致病力
- 戊型肝炎病毒IgG抗体诊断试剂盒的研制及初步应用被引量：1
- 2010年
- 目的应用大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒（HEV）重组抗原建立HEVI鼬抗体诊断（ELISA）试剂盒。方法应用大肠杆菌表达的具有戊型肝炎主要抗原表位的表达蛋白HEV ORF23作为包被抗原，建立检测血清中抗HEV IgG的间接ELISA试剂盒。通过HEV IgG试剂盒对100份戊型肝炎患者血清和150份正常人阴性血清测定结果进行比较，评价本试剂盒的特异性、敏感性及稳定性。另选临床500份肝炎患者血清进行检测，评价本试剂盒的临床应用价值。结果建立的抗HEV IgG间接ELISA试剂盒特异性、敏感性均为100％，重复性较好，在4℃至少可稳定存放6个月，与同类试剂的符合率为95％以上。500份血清样本中，戊型肝炎患者150例，检出HEV145份，阳性符合率为96．67％。结论应用大肠杆菌表达的HEV重组抗原建立的检测试剂盒对血清抗HEV IgG的检测具有良好的特异性和敏感性，在戊型肝炎的临床诊断和流行病学调查中具有潜在的应用价值。
- 杨连华洪艳吴海波陶薇房国坚娄国强陈勇
- 关键词：肝炎病毒戊型重组抗原IGG
