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柳发勇: 作品数：20 被引量：24H指数：4; 供职机构：三峡大学医学院更多>>; 发文基金：湖北省卫生厅科研基金天然产物研究与利用湖北省重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

葛根提取物对急性乙醇中毒小鼠保护作用及其机制研究: 目的通过观察葛根对乙醇中毒模型小鼠的解毒作用及测定小鼠肝脏相关基因的表达,研究葛根的保护机制。方法制备葛根的水提取物,小鼠禁食12 h 后,0．011 mL·g灌胃给药,0． 9%氯化钠溶液组给予等体积0．9%氯化钠溶液...; 刘朝奇柳发勇杨凡史继静任东明; 关键词：乙醇中毒肝脏; 文献传递

紫苏对IL-6/IL-6R拮抗作用研究: 目的通过分子和细胞筛选模型研究紫苏对 IL-6的拮抗作用。方法利用 EHSA 法建立 IL-6/IL-6R 结合的体外药物筛选模型,将紫苏稀释为不同梯度浓度,观察其抑制 IL-6/IL-6R 结合的作用及量效关系。应用肝...; 史继静刘朝奇高明星柳发勇杨凡; 关键词：紫苏; 文献传递

HMG单药及联合氯米芬对排卵障碍患者卵泡生长的干预研究被引量：4: 2011年; 目的探讨不同方案人绝经期促性腺激素（human menopausal gonadotropin,HMG）对排卵障碍患者促排卵治疗后的卵泡生长规律。方法将符合入选标准的排卵障碍20例随机分为HMG组和氯米芬（clomiphene citrate,CC）加HMG组,每组各10例,另选择10例正常排卵妇女为对照组。HMG组自经期第5天始,予肌内注射HMG 75 U/d至卵泡成熟;CC＋HMG组于经期第5天始口服CC50 mg/d,第9天予肌内注射HMG75 U/d至卵泡成熟。3组分别于月经周期的第3~5、10~11、12~13、14~15天及卵泡成熟期行经阴道彩超检查,监测卵泡大小、数目等情况。结果两治疗组大多可以在经期第10~11天获得优势卵泡,优势卵泡随后以1.5 mm/d速度向成熟卵泡发育,3组卵泡大小及优势卵泡增长速度比较均无统计学差异（P〉0.05）。结论单用HMG或CC加HMG方案均可以改善排卵障碍,获得与正常卵泡相似的卵泡发育。; 朱艳刘永红柳发勇; 关键词：无排卵人绝经期促性腺激素排卵诱导

HIV-1 gp160多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的免疫原性分析被引量：1: 2008年; 目的：HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的“金标准”。因此本实验构建gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达,为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原。方法：选定HIV-1 gp160基因中三个片段包含较多抗原表位的区域,设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这三个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性,SDS-PAGE和Western Blot测定融合蛋白的抗原特异性。结果：构建的HIV-1 gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长969bp。在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa,以包涵体的形式存在。结论：应用western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1 gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性。成功构建了高表达HIV-1 gp160多表位蛋白的原核表达系统,纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性。; 杨凡刘朝奇柳发勇余枫华杨春秀韩莉任东明张伟杨祖伟; 关键词：HIV-1 蛋白表达免疫原性免疫印迹

紫苏对乙醇性肝损伤小鼠肝脏的保护研究: 目的观察紫苏对乙醇性肝损伤小鼠肝脏炎症及凋亡相关基因的表达影响,研究其对肝脏的保护机制。方法小鼠禁食12 h 后,紫苏组按0．011 mL·g体积质量比灌胃给药,盐水组给予等体积0．9%氯化钠溶液,另设空白对照组。30 ...; 杨凡刘朝奇柳发勇史继静任东明; 关键词：紫苏护肝作用; 文献传递

木瓜对小鼠急性乙醇性肝损伤作用研究: 目的建立小鼠急性乙醇性肝损伤模型,在组织形态学和分子水平观察木瓜对造模小鼠肝脏炎症及细胞凋亡的影响。方法普通昆明种鼠随机分组,禁食12 h 后,以0．011 mL·g木瓜汁、0．9%氯化钠溶液灌胃组分别作为实验组和对照组...; 柳发勇刘朝奇杨凡史继静任东明; 关键词：木瓜小鼠; 文献传递

HIV-1 p15(Gag)基因的克隆、蛋白表达及抗体制备被引量：1: 2008年; 目的为了研究HIV-1p15(Gag)的生物学活性,制备HIV-1p15(Gag)蛋白及其特异性抗体。方法用PCR的方法扩增编码p15(Gag)基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达HIV-1p15蛋白,分别用His抗体和HIV阳性血清做western blot鉴定目的蛋白。以纯化目的蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫细胞化学法检测抗体滴度及其特异性。结果原核表达载体pET28a(+)-p15(Gag)成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约20000的p15(Gag)蛋白经western blot鉴定正确。纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性。结论得到纯化的HIV-1p15蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白p15(Gag),为进一步研究HIV-1奠定了实验基础。; 柳发勇刘朝奇史继静杨凡余枫华杨春秀韩莉任东明韩钰; 关键词：HIV-1 原核表达免疫原性多克隆抗体

HIV-1病毒Nef基因克隆、表达、纯化及其抗体的制备被引量：5: 2008年; 目的:运用基因工程方法制备HIV-1 Nef重组蛋白及其抗体。方法:用PCR技术从HIV-1H×B2质粒中扩增HIV-1 Nef基因,将测序鉴定过的HIV-1 Nef基因克隆到原核表达载体pET28a(+)上,应用酶切鉴定、测序、SDS-PAGE及Western blot等方法鉴定基因片段的正确性及表达蛋白的特异性。纯化的重组蛋白免疫兔3次后,ELISA法测定兔多克隆抗体滴度。用其制备的多克隆抗体通过免疫组织化学方法测定表达Nef基因的内皮细胞。结果:成功地构建了Nef基因的原核表达质粒,测序证明HIV-1Nef基因全长为621bp,编码206个氨基酸。在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达的重组蛋白为包涵体的形式。HIV-1 Nef蛋白N端融合6×His标签便于纯化及鉴定。获得的高纯度HIV-1 Nef融合蛋白,免疫动物后,可产生特异的高滴度抗体(ELISA滴度达1∶10000)。将转染Nef基因的内皮细胞,应用免疫组化的方法证明其抗体有高度的特异性。结论:构建了高表达HIV-1 Nef蛋白的原核表达系统,制备的Nef重组蛋白免疫动物,获得了特异、高效价的抗体,为研究Nef基因的生物学活性提供了实验材料和依据。; 杨凡刘朝奇柳发勇张伟王磊黎; 关键词：HIV-1 NEF 抗体病毒

HIV-1gp160多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的免疫原性分析: 目的 HIV 感染引起的 AIDS 已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。普及 HIV 的检测,尽早发现感染者,控制其传播十分重要。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是 HIV 检测的"金标准"。因此本...; 杨凡刘朝奇柳发勇余枫华杨春秀韩莉任东明张伟杨祖伟; 文献传递