梁良
- 作品数：15 被引量：87H指数：6
- 供职机构：聊城市人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 中药I号对APP/PS1双转基因阿尔兹海默病模型小鼠治疗作用的机制研究
- 背景：阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease, AD)是一种进行性发展的神经退行性疾病。中医药作为中华民族的传统医学,维系了民族的繁衍与健康,为阿尔兹海默病的治疗提供了希望。本实验室以前的研究发现：中药Ⅰ号...
- 梁良
- 关键词：阿尔兹海默病ADAM10BACE1IPA
- 文献传递
- 白木香3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因AsHMGR2的克隆及表达分析被引量：15
- 2013年
- 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)是萜类合成甲羟戊酸(MVA)途径中的第一个关键限速酶。本研究根据课题组白木香转录组数据库中的HMGR2部分转录本序列设计引物,利用RT-PCR和RACE技术克隆HMGR2基因的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析;利用荧光定量PCR检测AsHMGR2基因在不同组织和不同伤害处理下的表达差异。克隆得到的白木香AsHMGR2基因开放阅读框为1749bp,编码582个氨基酸,GenBank登录号为KC140287。组织表达分析的结果显示,AsHMGR2基因主要在根和茎尖中表达,其次是主干,叶中的表达量最低;该基因同时受物理伤害和结香液处理的诱导,分别在6h和8h达到最高表达水平。本研究通过AsHMGR2基因的全长cDNA克隆和表达特性分析,为后续深入研究其在沉香倍半萜合成途径的功能奠定了基础。
- 徐艳红杨欣张争梁良魏建和
- 关键词：白木香
- 白木香乙酰乙酰基辅酶A硫解酶基因(AsAACT)的克隆与表达分析被引量：9
- 2014年
- 目的:对国产沉香的基原植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-CoA C-acetyl transferase,AACT)基因AsAACT全长进行克隆并展开生物信息学分析和表达分析,为解析沉香萜类次生代谢产物的生物合成机制奠定基础。方法:根据获得的白木香转录组数据库AACT部分转录本序列设计引物,采用RT-PCR及RACE技术,以白木香茎cDNA为模板,克隆获得AsAACT全长,进行生物信息学分析;采用荧光定量PCR,以GADPH为内参,分析白木香愈伤组织受不同伤害胁迫AsAACT的表达模式。结果:AsAACT开放阅读框(opening reading frame,ORF)为1 236 bp,编码411个氨基酸残基,酶命名为AsAACT;白木香愈伤受物理伤害(切割)后表达量没有明显变化,但受化学伤害(MeJA)后4 h表达量升高了5.5倍,说明该基因对MeJA诱导的化学伤害较敏感,且能够在早期响应伤害胁迫。结论:通过AsAACT基因的全长cDNA克隆和表达特性分析,为后续深入研究其在沉香倍半萜合成途径的功能奠定基础。
- 刘娟徐艳红杨勇梁良韩晓敏高志晖张争杨云魏建和
- 关键词：白木香
- 白木香3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(AsHMGS)基因的克隆与表达分析被引量：11
- 2014年
- 以白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg)茎cDNA为模板,采用反转录PCR及RACE技术分离得到HMGS基因cDNA全长。序列分析表明该基因序列全长1 831 bp,共编码465个氨基酸,推导的蛋白质分子量为51.4 kD,理论等电点6.25,命名为AsHMGS。推导的AsHMGS蛋白质序列具有植物HMGS酶的典型结构,并预测出HMGS酶的活性中心。系统进化树分析表明,AsHMGS蛋白与拟南芥、琴叶拟南芥、芥菜的相应蛋白相似度最高,其次为人参、喜树和野茶树。荧光定量PCR结果显示,茉莉酸甲酯能诱导白木香AsHMGS的表达。
- 刘娟徐艳红杨勇梁良高志晖杨云张争隋春魏建和
- 关键词：白木香
- 中药Ⅰ号方对阿尔茨海默病转基因模型小鼠APP代谢的影响
- 目的 研究中药Ⅰ方对阿尔茨海默病模型小鼠的APP代谢的影响。方法 运用Western Blot、免疫组化和ELISA观察淀粉样前体蛋白(APP)代谢产物的变化。结果 低剂量、中剂量和高剂量给药组的淀粉样前体蛋白(APP)...
- 梁良姚志刚朱华黄澜秦川
- 关键词：阿尔茨海默病
- 濒危南药白木香悬浮细胞体系的建立被引量：3
- 2014年
- 以白木香（Aquilaria sinensis）茎尖为材料,利用诱导形成的愈伤组织构建悬浮细胞体系。结果表明,诱导愈伤组织最适培养基为MS＋2.0 mg·L^-1 NAA＋1.0 mg·L^-1 6-BA;经12次继代培养的愈伤组织生长旺盛、质地疏松适于悬浮培养;将其置于液体培养基MS＋2.0 mg·L^-1 NAA＋1.0 mg·L^-1 6-BA＋500.0 mg·L^-1 CH中震荡培养,建成悬浮细胞体系。悬浮细胞生长曲线呈S型,初期增长缓慢,4~6天为对数增长期,7~12天进入平台期,12天以后细胞生长速度及活力迅速下降;GC-MS结果显示,培养0、3、6、9、12天悬浮细胞不含沉香倍半萜,使用100μmol·L^-1 MeJA处理24 h可检测到倍半萜。本实验构建的白木香悬浮细胞体系均一稳定、细胞活力良好,可作为研究伤害诱导白木香形成倍半萜的离体体系,同时也具备离体生产沉香倍半萜的潜力。
- 刘娟韩晓敏梁良刘庆昌徐艳红杨成民张争孙晶魏建和
- 关键词：白木香愈伤组织悬浮细胞培养
- 茉莉酸甲酯诱导的白木香cDNA文库的构建及初步鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的通过构建茉莉酸甲酯（MeJA）处理的白木香cDNA文库，为揭示伤害诱导沉香倍半萜合成的分子机制奠定基础。方法以MeJA处理的白木香愈伤组织为材料，以改造的pGADT为载体，利用SMART技术构建白木香全长cDNA文库。结果构建的文库原始滴度为8．99×10^6pfu／mL，阳性克隆子的比例为97％，插入片段的大小在500-3000bp，平均大于1000bp。结论构建的文库无论从库容量、克隆效率，还是全长率方面评价，均达到了高质量文库的要求。
- 徐艳红杨欣梁良高志晖张争魏建和
- 关键词：白木香茉莉酸甲酯CDNA文库愈伤组织
- 白木香查尔酮合酶(AsCHS1)基因的克隆和生物信息学分析被引量：12
- 2013年
- 目的:对国产沉香的源植物白木香Aquilaria sinensis查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)基因AsCHS1编码区进行克隆,并对其进行生物信息学分析和表达分析。方法:根据已报道的白木香伤害转录组高通量测序结果分析获得1条具有查尔酮合酶保守结构域的CHS基因序列,采用RT-PCR技术,以不同伤害时间白木香木质部混合样品总RNA为模板克隆得到白木香AsCHS1的基因编码区序列,并对AsCHS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析。另外,采用qRT-PCR方法,以组蛋白(histones)为内参对AsCHS1基因在伤害胁迫下的表达模式进行分析。结果:序列分析表明,所克隆的AsCHS1基因编码区开放阅读框(opening reading frame,ORF)长为1 194 bp,编码397个氨基酸残基,命名为AsCHS1。qRT-PCR实验证明该基因表达量在伤害后12 h最大,说明该基因能够在早期响应伤害胁迫。结论:白木香AsCHS1基因的编码区序列的分离克隆为进一步研究AsCHS1蛋白在白木香中黄酮合成途径中的功能及表达调控奠定基础。
- 汪孟曦李文兰张争魏建和杨云徐艳红梁良
- 关键词：查尔酮合酶白木香
- 白木香AsNINJA1基因全长cDNA克隆及其在愈伤组织中的茉莉酸甲酯诱导表达被引量：3
- 2014年
- 目的克隆国产沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis互作蛋白(jasmonate Zim-domain,JAZ)基因(NINJA),为深入研究其在沉香倍半萜合成途径中的功能奠定基础。方法以白木香总RNA为模板,采用RACE法和RT-PCR方法,克隆白木香NINJA基因cDNA全长,并进行生物信息学的分析;采用实时荧光定量(qRT-PCR)方法分析经茉莉酸甲酯(MeJA)处理的白木香愈伤组织中AsNINJA1基因的表达模式。结果获得白木香NINJA基因全长cDNA,命名为AsNINJA1。序列分析表明,该基因的序列全长为1 982 bp,包含一个1 221 bp的开放阅读框,编码406个氨基酸,蛋白质相对分子质量为43 697,等电点为6.02。qRT-PCR结果显示,经MeJA处理4 h后AsNINJA1基因相对表达量最高,是对照(未经MeJA处理的白木香愈伤组织)的近100倍,随后显著下降。结论获得AsNINJA1基因全长cDNA序列,该基因对MeJA诱导极为敏感,且能在伤害早期响应。
- 廖永翠徐艳红张争隋春梁良魏建和
- 关键词：白木香茉莉酸甲酯
- 基于中国医院药物警戒系统的药源性帕金森综合征真实世界研究
- 2023年
- 目的探索利用中国医院药物警戒系统(CHPS)开发主动监测药源性帕金森综合征(DIP)的方法,并分析DIP的人群特征。方法利用CHPS制订主动监测方案,对2019年1月至2020年12月的聊城市人民医院入院病人从病历、医嘱、体征、影像学检查中通过关键词检索出报警病例,对其临床症状、治疗药物、体征检查、既往用药等方面的资料进行分析判断后,生成最终监测结果。结果在纳入研究的36369病例中,实际使用研究药物的为12021例,CHPS报警病例2488例,经人工复核后确定阳性病例52例,CHPS阳性预警率为2.1%(52/2488),DIP实际发生率为0.43%(52/12021)。可疑药物有曲美他嗪、利血平、氟桂利嗪、丙戊酸盐、氟哌啶醇、奥氮平、氯氮平、阿普唑仑、多奈哌齐、利培酮。52例阳性病例的年龄为(68.36±12.98)岁,年龄>65岁者共38例(73.08%),女性病人34例(65.38%),既往有缺血性脑病病史者18例(34.62%),双侧肢体阳性症状者40例(76.92%),颅脑CT或MRI检查显示异常者37例(71.15%),11例(21.15%)未停用可疑药物,32例(61.54%)症状未缓解或缓解但遗留后遗症,20例(38.46%)症状消失。9例(17.31%)发生在用药1年之内,24例(46.15%)发生在用药1~5年,13例(25%)发生在用药5~10年,6例(9.62%)发生在用药10年以上。结论利用CHPS可及时发现DIP,较传统监测模式优势明显。DIP以女性多见,发生时间大多在用药5年之内,年龄>65岁、既往缺血性脑病史是发生DIP的危险因素。双侧肢体阳性症状、颅脑CT、MRI检查显示异常有助于DIP的早期诊断和鉴别。
- 任丛丛贾光伟梁良郭菲张帆
- 关键词：药物监测
