温机智 作品数:37 被引量:74 H指数:6 供职机构: 广州血液中心 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 广州市科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 天文地球 更多>>
红细胞疑难与稀有血型检测技术的建立及临床应用 姬艳丽 罗广平 付涌水 骆宏 魏玲 王贞 赵阳 叶欣 夏文杰 莫春妍 温机智 汪传喜 贝春花 戎霞 张润青 该项目属于生物医药高新技术领域。其主要技术内容:在广州血液中心临床输血研究所建立了一系列的血型血清学及分子生物学技术,包括凝胶血型检测卡及不完全抗体快速反应介质试剂的研发、红细胞血型抗原高通量的多重连接依赖式探针扩增(M...关键词:关键词:血型检测 红细胞血型 MNS杂交糖蛋白GP. Mur的高分辨率熔解曲线(HRM)基因分型 被引量:2 2018年 目的采用高分辨率熔解曲线(HRM)基因分型方法对MNS杂交糖蛋白GP.Mur做基因分型并验证HRM基因分型方法的可靠性。方法收集254例献血者全血标本(广州地区献血者104例,澳大利亚华裔献血者150例),利用DNA提取试剂盒抽提基因组DNA;以HRM基因分型方法对MNS杂交糖蛋白GP.Mur做基因分型;以多重连接依赖的探针扩增技术(MLPA)或血清学方法对GP.Mur阳性标本做确证试验,同时采用直接测序法对HRM检出的变异曲线标本确证。结果 HRM基因分型254例标本中杂合的GP.Mur有14例,其中11例GP.Mur阳性标本均来自广州献血者,经MLPA基因分型方法证实其基因型为GYP*Mur/GYPB,另外3例为澳大利亚华裔献血者标本,血清学试验证实红细胞表型为GP.Mur。此外,HRM方法还检出了4例变异曲线标本,测序结果显示这4例标本均在GYPB基因上携带有点突变。结论 HRM方法能准确地对GP.Mur糖蛋白做基因分型,该方法在突变扫描方面具有极大的优势。 魏玲 姬艳丽 张润青 王贞 温机智 付涌水 罗广平关键词:高分辨率熔解曲线 基因分型 检测红细胞Rh血型系统RHD1227A等位基因的PCR-SSP方法及引物 本发明公开了检测红细胞Rh血型系统RHD1227A等位基因的PCR‑SSP方法及引物,具体涉及分子生物学技术领域,包括PCR扩增引物组合,所述PCR扩增引物组合包括检测RHD*1227A等位基因的上游引物下游引物,引物序... 温机智 姬艳丽 王贞文献传递 KODE技术修饰红细胞在抗-Mur筛查中的应用及Mur抗原遗传背景研究 被引量:6 2015年 目的探讨KODE技术修饰红细胞(即利用KODE技术制备的Mur抗原修饰红细胞)应用于抗-Mur筛查中的可行性,同时了解广州地区人群Mur抗原的遗传特征。方法利用含KODE技术修饰红细胞的筛选细胞在微柱凝胶卡中筛查3 579名献血者血浆中的不规则抗体,并对阳性样本进行抗体鉴定;同时,采用单克隆抗-Mur筛查528名献血者红细胞上的Mur抗原,然后通过PCR产物直接测序法对Mur抗原阳性样本进行序列分析。结果 3 579名献血者血浆中不规则抗体阳性者有11例,其中抗-Mur 7例,抗-S 2例,抗-E 1例,抗-Lea 1例;528名献血者红细胞表面表达Mur抗原的有51名,经过DNA序列分析,发现该51名Mur抗原阳性献血者均携带有GYP(B-A-B)杂交基因,其中表达GP.Mur的有50名,表达GP.Bun的有1名。结论KODE技术修饰红细胞在抗-Mur筛查中的成功应用,表明利用该技术制备更多其他的人工修饰稀有红细胞用于抗体筛选与鉴定具有可行性,从而为输血安全提供保障;GYP(B-A-B)杂交基因是广州地区Mur抗原的遗传基础,并且,GP.Mur是表达Mur抗原的主要杂交糖蛋白。 魏玲 单振刚 姬艳丽 温机智 王贞 莫春妍 罗广平DFR变异型孕妇血型鉴定及孕期监测策略探讨 2022年 目的对3例RhD变异型孕妇进行血型血清学和分子生物学鉴定,探讨其孕期监测策略。方法收集3例D变异型孕妇外周血标本,采用2种单克隆抗-D试剂进行RhD抗原鉴定,使用D-Screen试剂盒进行D抗原表位检测。提取基因组DNA,采用多重连接探针扩增技术(MLPA)和序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)基因分型试剂盒检测RHD-CE-D杂交等位基因,使用Sanger测序法对RHD基因进行测序分析。结果D抗原表位检测结果提示这3例标本为DFR变异型标本,进一步分子生物学检测鉴定其基因型分别RHD*DFR2/01N.01(n=2)和RHD*DFR1/1227A(n=1)。结论基因型为RHD*DFR2/01N.01的2例DFR表型孕妇的孕期检测策略应参照D阴性孕妇进行;而携带RHD*1227A等位基因即“亚洲型”DEL等位基因的DFR表型孕妇建议按照“亚洲型”DEL孕妇进行孕期监测,即无需频繁筛查意外抗体,也不需要预防性注射抗-D免疫球蛋白。 温机智 贾双双 贾双双 魏玲 罗广平 魏玲关键词:DFR RH血型系统 检测红细胞Rh血型系统RHD1227A等位基因的HRM基因分型方法及引物 本发明公开了检测红细胞Rh血型系统RHD1227A等位基因的HRM基因分型方法及引物,具体涉及分子生物学技术领域,引物序列如下:HRM上游引物:ATATGGAAAGCACCTCATGA;HRM下游引物:AAACAGCAA... 姬艳丽 王贞 温机智文献传递 混合意外抗体分离鉴定与配血路径——附1例报告 被引量:4 2014年 目的探讨疑难配血中混合意外抗体鉴定方法及配血方案。方法鉴定红细胞血型,并对患者血清进行抗体筛查及抗体鉴定,再利用特定血型分型红细胞与患者血清吸收放散,放散液进行抗体鉴定。结果患者血型为O型,ccDEE、JK(a-b+)、NN,患者血清与特定血型红细胞吸收放散后,放散液抗体鉴定结果为抗-Ce、抗-Jka、抗-M。结论通过运用血清学实验确定抗体特异性,选择合理的配血方案,为患者选择合适的血液,确保输血安全。 莫春妍 赵阳 朱泽佳 张润清 姬艳丽 王贞 骆宏 魏玲 温机智 罗广平关键词:配血 MNS杂交糖蛋白GP.Mur在中国广州人群及澳大利亚非高加索人群中的分布研究 目的 了解MNS杂交糖蛋白GP.Mur在中国广州人群及澳大利亚非高加索人群中的分布特征.方法 收集104例中国广州献血者及150例澳大利亚非高加索献血者的全血样本并抽提基因组DNA;利用GYPB假外显子3特异性引物进行H... 魏玲 姬艳丽 张润青 王贞 温机智 罗广平关键词:基因分型 罕见抗-Di^(b)致严重胎儿新生儿溶血病的实验室检测与相关研究 2024年 目的对1例高频抗体导致的胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn,HDFN)进行检测、鉴定及配血。方法对患儿进行新生儿溶血试验,对母亲进行血清学意外抗体鉴定,并对母亲红细胞进行常见高频抗原鉴定;对检出抗体进行IgG分型检测,并用流式细胞术进行单核细胞体外吞噬致敏红细胞试验,以检测抗体相关的吞噬率;对患儿母亲、父亲及舅舅进行相关红细胞血型基因测序;利用稀释的母亲血浆和抗人球卡法,在献血者中进行大规模相合血液的筛选。结果产妇鉴定为Di(b-)稀有血型,产生了抗-Di b(效价512)并导致了严重的HDFN;抗-Di b亚型分型为IgG1和IgG2型,单核细胞体外吞噬效率为88.83%(74.7/84.09);产妇亲属中没有相合献血者,后续从5520名献血者中筛选到2例Di(b-)相合血液,患儿接收输血治疗后康复出院。后续在51334名献血者中筛查到17名Di(b-)献血者,该数据表明Di(b-)在广州地区献血者中的分布频率约为三千分之一(0.033%,17/51334)。结论综合利用血型血清学及分子生物学方法诊断了抗-Di b所致的严重HDFN,建立了1种有效大规模筛查Di(b-)稀有血型的方法并找到相合血液,为建立Di(b-)稀有血型库奠定了基础。 廖志坚 贾双双 温机智 莫春妍 邵媛 张润青 罗广平 姬艳丽广州地区献血人群IgA缺乏频率调查 被引量:1 2016年 目的了解广州地区献血人群中免疫球蛋白A(IgA)缺乏频率,评估IgA缺乏个体由抗-IgA抗体引起的过敏性输血反应的发生风险。方法收集广州血液中心2014年10月至2015年1月的3 025份献血者外周静脉血标本,采用IgA含量低于0.05 mg/dl为IgA缺乏的检测标准,使用酶联免疫吸附试验筛查IgA缺乏个体,计算相应的IgA缺乏频率。结果广州地区3 025例献血者中有1例IgA缺乏者,频率为0.03%。广州地区献血人群的IgA缺乏频率低于加拿大、西班牙献血人群,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IgA缺乏在广州地区献血人群中存在一定的分布,为避免IgA缺乏者输注含IgA的成分血而产生的过敏性输血反应,应建立IgA缺乏稀有血型库。 温机智 姬艳丽 魏玲 王贞 罗广平关键词:献血者