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2024年8月12日星期一

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急性白血病DAPK基因启动子甲基化及临床意义: 背景和目的为研究DAPK基因与急性白血病关系及其可能的分子机制,我们采用MSP方法和RT-PCR方法检测DAPK基因在正常人、急性白血病患者和白血病细胞株中的甲基化状态及其mRNA的表达,探索其表达的临床意义。方法收集白...; 赵卫华孟凡义王巍; 文献传递

急性髓系白血病细胞株APP表达及APP-siRNA对HL60细胞的沉默作用被引量：1: 2009年; 目的:研究淀粉样前体蛋白(APP)基因在HL60、HL60/ADM、U937和kasumi-1细胞株中的表达及筛选针对APP基因的有效干扰片段。方法:采用荧光定量PCR和Western blot方法分别检测APP基因在4种细胞株中的mRNA和蛋白表达。用化学法合成4条针对APP的干扰片段和一条阴性对照,脂质体法转染HL60细胞,分别用定量PCR和Western blot检测APP表达。结果:在4种细胞株中,APPmRNA和蛋白表达由高到低依次为:kasumi-1、HL60、HL60/ADM和U937,kasumi-1和HL60均显著高于HL60/ADM、U937(P<0.05)。同阴性对照相比较,4条干扰片段均能不同程度地抑制APP表达,其中siRNA-4效果最佳,APPmRNA和蛋白分别下降了约64%和65%。结论:APP基因在不同AML细胞株中表达差异显著。siRNA-4的干扰效果最佳。; 王巍孟凡义黄走方赵卫华; 关键词：急性髓系白血病 APP基因

急性白血病骨髓细胞Ang2 mRNA表达及其临床意义: ＜正＞目的:血管生成素2（angiopoietin2,Ang2）为内皮细胞特异性生长因子之一,近年国外有研究发现其表达水平与急性髓系白血病（AML）预后密切相关,尚未见在急性淋巴细胞白血病（ALL）中的报道。本研究通过实...; 黄走方孟凡义刘理想王巍; 文献传递

淀粉样前体蛋白基因在急性髓系白血病的表达及其生物学行为研究: 2010年; 目的探讨淀粉样前体蛋白（APP）基因在急性髓系白血病（AML）细胞的表达及其生物学行为.方法应用实时定量PCR方法（2-ΔCt）检测85例初诊AML和20例非恶性血液病患者（对照）骨髓细胞APP mRNA的表达,并研究其表达水平对AML患者的临床特征和治疗反应的影响应用实时定量PCR和Western blot方法检测APP基因和蛋白在AML细胞株的表达,并与AML原代细胞亚型的结果相比较化学合成针对APP基因的小干扰RNA（siRNA）,利用脂质体转染HL-60细胞,下调APP基因表达.RNA干扰24、48、72 h后,采用MTT法及锥虫蓝拒染细胞计数检测细胞增殖瑞特-姬姆萨染色观察细胞形态 PI染色流式细胞术分析细胞周期 Annexin V/PI双染色流式细胞术及Hoechst染色检测细胞凋亡 RNA干扰48 h,Western blot法检测凋亡相关蛋白NF-κB、bcl-2和caspase-3的表达 MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性.结果 APP mRNA表达在AML亚型间差异有统计学意义（P=0.019）,伴t（8 21）的M2b表达最高（中位值0.1080）,其次是AML-未定型（0.0467）、M3（0.0266）、M2a（0.0221）、M4a（0.0167）、M5b（0.0151）、M4b（0.0025）,两两比较分析显示,M2b患者APPmRNA表达显著高于M5b患者（P=0.000）.APP mRNA表达水平对AML亚型以外患者临床特征及治疗反应无显著影响（P＞0.05）.Kasumi-1细胞APP基因表达显著高于U937细胞（P＜0.05）,与AML各亚型原代细胞中的结果相一致.APP-siRNA转染HL-60细胞后,其APP mRNA表达下凋64%,在培养24、48及72 h后检测HL-60细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期及对阿霉素敏感性均无明显变化（P＞0.05）.结论伴t（8 21）异位的M2型白血病高表达APP mRNA,单核细胞白血病低表达APPmRNA.APP基因表达沉默对HL-60细胞的生物学作用无显著影响.; 王巍孟凡义黄走方黄明刘理想; 关键词：RNA干扰

急性淋巴细胞白血病骨髓细胞血管生成素2 mRNA表达及其临床意义: 2009年; 目的研究血管生成素2（Ang-2）基因在急性淋巴细胞白血病（ALL）中的表达及其临床意义。方法建立检测Ang-2基因的SYBR Green I荧光实时定量聚合酶链反应（RQ—PCR）方法，对59例初发ALL患者骨髓细胞进行Ang-2表达水平的检测。同时选择20例非恶性血液病患者的骨髓细胞作为对照。结果ALL及对照组骨髓细胞中均有Ang-2基因的表达，但在ALL患者的表达显著高于对照组（中位数分别为348．11、63．25，P〈0．05）。Ang-2表达水平与患者初诊时年龄、血红蛋白、白细胞、血小板、乳酸脱氢酶水平和外周血白血病细胞比例及骨髓白血病细胞比例等指标无明显相关（r=-0．066，r=-0．063，r=0．233，r=-0．145，r=0．105，r=-0．021，r=-0．190）。Ang-2高表达组与低表达组的1年复发率、生存率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Ang-2基因表达水平在ALL组高于非恶性血液病组，可能与ALL患者临床表现、治疗反应及预后无关。; 黄走方孟凡义王巍刘理想李利蔡艳霞; 关键词：白血病血管生成素2 反转录聚合酶链反应

死亡相关蛋白激酶对人白血病HL-60细胞凋亡及生存素基因表达的影响被引量：2: 2009年; 目的:探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK)对人白血病HL-60细胞凋亡及生存素(Survivin)基因表达的影响。方法:利用真核表达载体pReceiver-M29-DAPK,用脂质体LipofectamineTM2000介导转染HL-60细胞,荧光染色法观察细胞凋亡;RT-PCR方法检测SurvivinmRNA表达水平的变化。结果:pReceiver-M29-DAPK转染组的凋亡细胞比例高于pReceiver-M29组和空白组。pReceiver-M29-DAPK转染组Survivin mRNA表达水平低于pReceiver-M29组和空白组。结论:pReceiver-M29-DAPK转染诱导HL-60细胞发生凋亡,生存素基因表达显著下调。; 赵卫华孟凡义王巍; 关键词：死亡相关蛋白激酶凋亡生存素

APP、Fis1、KLRF1和PDCD7基因在急性髓系白血病中的表达及临床意义被引量：4: 2009年; 目的探讨淀粉样前体蛋白(APP)、裂殖1同源物(Fis1)、杀伤细胞凝集素样受体亚家族F成员1(KLRF1)和细胞程序性死亡7(PDCD7) mRNA在急性髓系白血病(AML)细胞中的表达及其预后意义。方法抽取34例AML及10例非恶性血液病患者骨髓,提取总RNA并逆转录成cDNA,SYBR Green I实时定量PCR法检测各基因 mRNA表达水平,采用2-△Ct公式计算基因 mRNA相对表达量。结果AML患者组PDCD7 mRNA表达水平均显著高于对照组(Z=-2.213,P=0.027)。除M1(1例)、M2a(2例)外的AML各亚型基因表达同对照组比较,APP mRNA在伴有t(8,21)染色体异常的M2表达显著高于对照组(Z=-2.197,P=0.028),而在M4b和M5b中的表达则显著低于对照组(Z=-2.368,P=0.018)。APP mRNA在AML亚型间表达有差异,M2显著高于M4和M5(Z=-2.430,P=0.015;Z=-3.175,P=0.001)。结论AML患者高表达PDCD7基因,单核细胞白血病患者低表达APP基因。; 王巍孟凡义黄走方李利蔡艳霞孙启鑫; 关键词：淀粉样前体蛋白

急性白血病DAPK基因启动子甲基化及临床意义: ＜正＞目的:为研究DAPK基因与急性白血病关系及其可能的分子机制,我们采用MSP方法和RT-PCR方法检测DAPK基因在正常人、急性白血病患者和白血病细胞株中的甲基化状态及其mRNA的表达,探索其表达的临床意义。; 赵卫华孟凡义王巍; 文献传递

急性白血病骨髓细胞Ang2 mRNA表达及其临床意义: 背景与目的:血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)为内皮细胞特异性生长因子之一,近年国外有研究发现其表达水平与急性髓系白血病(AML)预后密切相关,尚未见在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的报道。本研究通过实...; 黄走方孟凡义刘理想王巍; 文献传递

APP基因在急性髓系白血病细胞中的表达及其生物学行为研究: ＜正＞目的:基因芯片研究显示,淀粉样前体蛋白（APP）基因在难治AML-M2a的表达较首次持续缓解时间大于12个月的M2a显著下调。APP基因在胰腺癌、口腔鳞状上皮细胞癌、大肠癌、胶质瘤、多形性胶质母细胞瘤及原发小肠类癌...; 王巍孟凡义黄走芳刘理想; 文献传递

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