王巍
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中山医科大学肿瘤防治中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HCV RNA复制的分子机理被引量：1
- 1999年
- 有关丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)复制的分子机理至今尚不清楚,推测与其它正链RNA病毒复制相似,即病毒与宿主蛋白结合于正、负链RNA 3’端形成复制体,启动子代RNA合成。本文对近年这方面的研究进展进行综述。
- 王巍
- 关键词：丙型肝炎病毒病毒复制分子机理RNA
- 与丙型肝炎病毒复制中间体3′末端结合的宿主蛋白的研究
- 2002年
- 宿主细胞蛋白在HCV复制过程中起着重要的作用 .应用蛋白质 核酸紫外交联法检测多个细胞株 ,目的是明确是否存在可与HCV复制中间体 3′末端特异性结合的细胞蛋白质 .结果显示 ,在多个细胞株中存在一个分子质量约为 45ku的蛋白质 (命名为 p45 ) ,可与HCV复制中间体 3′末端 131～ 2 78nt结合 ,这种结合可被过量的自身未标记RNA竞争抑制 ,而非同源蛋白和非同源RNA均不能竞争抑制这种结合 .根据计算机RNA二级结构分析推测 ,p45可能特异性结合于HCV复制中间体 3′端的一茎环结构内 .这一结果提示 ,p45在HCV子代RNA复制中可能起着重要作用 .
- 邓庆丽黄开红邵静黄志明王巍
- 关键词：丙型肝炎病毒宿主蛋白
- 形成丙型肝炎病毒负链复制体的相关蛋白的分析
- 丙型肝炎病毒(HCV)是单链正链RNA病毒,基因组全长为9.3-9.4kb,包括一个开放读框和两端各一非编码区.目前,HCV的复制过程尚未清楚.大多数的研究集中在复制的初期,即正链复制体的形成和负链RNA合成的启动.而负...
- 邓庆丽王巍黄开红邵静黄志明
- 文献传递
- NS5B与HCV负链RNA3′末端特异性结合的分析被引量：1
- 2001年
- NS5B是RNA依赖性RNA聚合酶 ,在病毒RNA合成过程中起到中心催化酶的作用 .在大肠杆菌中表达和提纯了GST NS5B融合蛋白 ,应用紫外交联试验 (UVcross linking)检测NS5B与丙型肝炎病毒 (HCV)负链RNA 3′末端的结合 ,确定NS5B是否参与HCV负链RNA 3′末端复制体的形成 .NS5B可与HCV负链RNA 3′末端发生结合 ,这种结合存在量效关系 ,比与正链RNA 3′UTRX区的结合强约 10倍 ,超大量的非同源性RNA和蛋白质不能竞争抑制NS5B与负链RNA 3′末端的结合 ,证明这种结合存在特异性 .结果提示NS5B是HCV负链RNA 3′末端复制体的成分之一 .
- 黄志明黄开红邓庆丽王巍邵静
- 关键词：丙型肝炎病毒NS5B负链
- PIP融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其与PRE特异性的结合被引量：2
- 2001年
- 目的 表达纯化PIP融合蛋白 ,探讨研究PIP与PRE特异性结合的方法。方法 构建GST PIP融合蛋白表达质粒pGENKS PIP ,表达质粒在大肠杆菌BL2 1中诱导表达GST PIP融合蛋白 ,并用亲和层析柱加以纯化。利用这一融合蛋白通过Northwesternblot、UV crosslinking方法研究PIP与PRE的特异性结合。结果 GST PIP融合蛋白表达质粒pGENKS PIP在大肠杆菌BL2 1中成功地诱导表达了可溶性GST PIP融合蛋白 ,纯化后获得了单一的GST PIP融合蛋白。Northwesternblot和UV crosslinking证实PIP与PRE特异性结合。比较两种方法 ,前者较后者特异性高 ,灵敏度低 ,而后者操作简便。结论 表达和获得纯化的PIP融合蛋白 。
- 邓庆丽黄志明王巍邵静
- 关键词：大肠杆菌纯化PRE
- 形成丙型肝炎病毒负链复制体的相关蛋白的分析被引量：1
- 2002年
- 【目的】确定丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS5B以及肝母细胞瘤株HepG2胞浆提取物中的宿主蛋白与HCV负链RNA 3′末端的特异性结合作用。【方法】用蛋白 核酸紫外交联试验分别检测NS5B以及HepG2胞浆提取物中的宿主蛋白与HCV负链RNA 3′末端的结合作用 ,用非同源RNA和非同源蛋白作为竞争物分析这种结合的特异性。【结果】NS5B以及宿主细胞内一约 4 5ku的蛋白质 (简称P4 5 )均可与HCV负链RNA 3′末端特异性结合。【结论】NS5B和P4 5是HCV负链RNA
- 黄开红邓庆丽王巍邵静黄志明
- 关键词：丙型肝炎病毒蛋白
