王彦惠
- 作品数：8 被引量：31H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广东省重大科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微小磁珠法分离胚胎大鼠神经干细胞的实验研究
- 2002年
- 目的 旨在以微小免疫磁珠 (平均直径≤ 5 0 nm)分离提纯 SD大鼠胚胎大脑皮层组织中的神经干细胞并进行培养 ,观察细胞的增殖分化情况并对其分化产物进行鉴定 ,评价该分离方法的可行性及其在神经干细胞研究中的应用价值。方法 取 SD大鼠的胚胎大脑皮层组织制单细胞悬液 ,用微小磁珠分选出神经巢蛋白(nestin)阳性的细胞群 ,光镜下检测其纯度及活力后进行体外培养 ,特定条件下诱导分化并以免疫细胞方法检测产物的细胞类型。结果 分离的神经干细胞纯度为 (89.2± 4.8) % ,细胞存活率 (97.0± 1 .6) % ,诱导分化产物中出现 NSE阳性、GFAP阳性、巢蛋白 (nestin)反应阳性细胞群落。结论 微小磁珠法分离提纯神经干细胞纯度高 ,获得细胞数多 ,并对细胞的生物活性无明显影响 。
- 王彦惠刘振华廖可立姜晓丹李留洋徐如祥邹雨汐戴宜武杜谋选蔡颖谦
- 关键词：免疫磁珠神经干细胞神经巢蛋白细胞分离
- SD大鼠神经干细胞培养鉴定实验研究被引量：14
- 2002年
- 为探讨从SD胎鼠室管膜、皮质以及SD成年大鼠脑室下区、皮质分离并鉴定神经干细胞的可行性 ,以从上述部位分离的细胞作为种子细胞来源 ,在本实验室特制“CYTOKINE·神经干细胞培养基”中进行了神经干细胞培养诱导 ,单细胞连续传代培养 ,并分别以Nestin、NSE及GFAP免疫抗体鉴定神经干细胞、神经元和神经胶质细胞。结果发现 ,4种来源的组织细胞在相应培养条件下均有神经干细胞快速增殖 ,并有由多细胞组成的神经球形成 ,经鉴定 ,该细胞球表达特殊的胚胎神经干细胞Nestin抗原 ;进一步将这些细胞球分离成单细胞并重新以克隆密度进行培养 ,单个的细胞又很快形成神经球。对神经干细胞进行连续培养或加血清传代培养可使其进一步分裂增殖 ,有小芽形成并发育成突起、建立神经纤维联系 ,其中有的胞体增大 ,逐渐发育为较成熟的长突起细胞 ,长突起相互连接 ,交织成网 ,经鉴定为神经元及神经胶质细胞。 4种组织来源的细胞中所含有的干细胞数量不同 ,胎鼠较成年鼠更富含神经干细胞 ,室管膜或脑室下区所含神经干细胞较皮质更丰富 ,皮质来源的神经干细胞和室管膜来源的神经干细胞在形态学和分化程度上无特殊区别。该结果提示 ,SD胎鼠室管膜、皮质以及SD成年大鼠脑室下区、皮质 4种组织来源的细胞均含有神经干细胞 ;神经干?
- 廖可立姜晓丹王彦惠徐如祥邹雨汐
- 关键词：神经干细胞细胞分化细胞培养室管膜诱导分化
- 免疫磁珠体外提纯胚胎大鼠神经干细胞的实验研究被引量：10
- 2002年
- 为建立免疫磁珠体外提纯胚胎神经干细胞 (NSC)的方法 ,制备胚胎SD大鼠的大脑皮质组织悬液 ,采用磁珠分选法选择Nestin阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力 ,扫描电镜下行形态学观察 ,流式细胞仪检测荧光标记细胞的Nestin表达阳性率。结果发现 ,分选后所得细胞纯度达 (87 8± 2 4 ) % ,细胞活力 (94 8± 2 3) % ,流式细胞仪检测细胞Nestin阳性表达率为 (88 3± 1 0 4 ) % ,符合NSC的特点 ,扫描电镜观察可见细胞表面有数目不等的磁珠紧密结合。研究表明 ,磁性分选系统是一种有效的神经干细胞分离提纯方法 。
- 王彦惠刘振华廖可立姜晓丹徐如祥李留洋彭杰柳息洪
- 关键词：神经干细胞免疫磁珠扫描电镜流式细胞仪神经巢蛋白
- 成年大鼠纹状体神经干细胞体外提纯及检测被引量：1
- 2002年
- 目的建立成年大鼠纹状体区神经干细胞的体外提纯方法,并进行纯度检测。方法将成年大鼠的纹状体组织制成单细胞悬液,通过磁性分离系统从细胞悬液中分离出神经干细胞,并以流式细胞仪检测其纯度。结果提纯而来的细胞经干细胞特异性Nestin荧光染色后在荧光显微镜下可见细胞呈圆形且发出绿色荧光,经流式细胞仪检测Nestin荧光染色阳性率87.5 % ±2.5 %。结论利用磁性分离技术可成功将成年大鼠纹状体组织中的神经干细胞提纯。
- 刘振华王彦惠刘亚杰姜晓丹朱利元周振军
- 关键词：神经干细胞纹状体免疫磁珠流式细胞仪
- 大鼠神经干细胞提纯及鉴定的实验研究
- 目的：建立体外分选纯化大鼠神经干细胞的方法，并对提纯所得细胞进行体外培养，通过对不同生长阶段的细胞形态观察和对其分化产物进行鉴定分析，了解提纯所得细胞的增殖和分化特性。方法：将成年大鼠纹状体和胚胎大鼠脑皮层组织制成细胞悬...
- 王彦惠
- 关键词：神经干细胞免疫磁珠神经巢蛋白流式细胞仪
- 文献传递
- 神经干细胞——神经生物学的新视点被引量：5
- 2003年
- 王彦惠刘振华
- 关键词：神经干细胞神经生物学基因转移肿瘤治疗学
- 扭转痉挛误诊误治1例报道
- 2002年
- Department of Neurology, Zhujiang Hospital, First Military Medical University, Guangzhou 510282,
- 王彦惠刘振华刘亚杰
- 关键词：扭转痉挛误诊肌张力障碍
- 成年大鼠纹状体神经干细胞的体外培养及分化被引量：5
- 2004年
- 目的探讨成年大鼠纹状体神经干细胞多向分化的可能性。方法分离成年大鼠纹状体神经干细胞,单克隆连续传代培养并诱导分化,将分化产物进行免疫细胞化学染色及RT-PCR检测分析。结果无血清单克隆培养时期可见大量的细胞团出现,以血清诱导分化后出现多种细胞类型,免疫细胞染色发现分化细胞中有Nestin阳性、NSE阳性、GFAP阳性细胞,RT-PCR法分析mRNA水平有脑因子-1、γ-氨基丁酸α-受体γ-亚单位、酪氨酸羟化酶及色氨酸羟化酶等基因的表达。结论成年大鼠纹状体内分离出的干细胞样细胞具有自我增殖和多向分化潜能。
- 王彦惠刘亚杰卢洪流刘振华姜晓丹徐如祥周振军邹雨汐陈一招
- 关键词：成年大鼠纹状体神经干细胞体外培养细胞分化逆转录聚合酶链反应
