王德军
- 作品数：68 被引量：301H指数：9
- 供职机构：浙江中医药大学更多>>
- 发文基金：浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目浙江省自然科学基金浙江省公共科技条件平台建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 基于In-Cell Western对Ryanodine受体2检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- In-Cell Western技术是基于近红外激光成像系统而开发的检测技术,可应用于大分子ryanodine受体2(Ry R2)蛋白的检测。本研究通过对In-Cell Western固定剂的选择、细胞通透化、封闭液的选择、抗体工作浓度和心肌细胞密度等方面进行优化,建立心肌细胞Ry R2蛋白检测的InCell Western方法,并分别用SGF和Verapamil以及免疫细胞化学技术对研究结果及方法进行了验证。优化后的In-Cell Western参数:H9C2细胞的种板密度选择1×104个/孔,选择甲醛作为固定剂,细胞经过Triton X-100洗脱液通透化处理,选择酪蛋白作为封闭液,选择1∶500稀释的Ry R2一抗工作浓度。应用优化的参数检测心肌细胞Ry R2蛋白,并用前期已被证明能显著提高心肌细胞Ry R2蛋白荧光值的土茯苓黄酮和Verapamil进行验证,同时与免疫组化方法检测心肌细胞Ry R2蛋白相比,检测结果一致。表明本文建立的In-Cell Western方法检测大分子功能蛋白Ry R2是可行的。
- 王德军屠珏褚燕青陈方明蔡月琴朱科燕
- 关键词：WESTERNH9C2细胞
- 正常大耳白黑眼兔的血液学指标研究
- 目的：测定大耳白黑眼兔(WHBE兔)的血液学生理指标,探讨了性别因素对WHBE兔血液学生理指标的影响,并与日本大耳白兔、新西兰兔、人的血液学生理指标比较。方法：选择普通级WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰兔各40只,雌雄各...
- 陈民利潘永明应华忠王辉林琳周卫民王德军徐孝平寿旗扬
- 关键词：日本大耳白兔新西兰兔血液学指标
- 文献传递
- 长途运输应激对两种品系五指山小型猪自主神经功能的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 观察长途运输应激对两种品系五指山小型猪自主神经功能的影响. 方法 基于无创遥测技术,监测清醒自由活动状态下经21 h长途运输应激后和2个月恢复后,两种品系五指山小型猪心电图（ECG）和活动的改变,并用HRV分析评价其自主神经功能状况. 结果 （1）小型猪对照组具有明显的昼夜节律变化,白天以交感神经活动为主,晚上以副交感神经活动为主,且Black品系RRI、RMSSD、STV、VLF、LF和LF/HF比值均显著低于white品系（P〈0.05,P〈0.01）,而HR、LTv、TP和HF均显著高于White品系（P〈0.05,P〈0.01）;（2）与对照组比,长途运输应激后.小型猪RRI、SDNN、RMSSD、STV、LTV、TP、vLF、LF和LF/HF比值均明显降低（P〈0.01）,HR和HF增加（P〈0.05,P〈0.01）,且Black品系LTS组RRI、RMSSD、STV、VLF、LF和LF/HF比值均显著低于white品系LTS组（P＜0.05,P〈0.01）,而HR、LIV、TP和HF均显著高于White品系LTS组（P〈0.05,P〈0.01）;（3）长途运输应激小型猪的活动、心率及其HRV时域和频域指标均具有显著的相关性（P〈0.05,P〈0.01）. 结论 长途运输应激能使不同品系五指山小型猪的自主神经活动产生明显的差异,且Black品系五指山小型猪更易受长途运输应激的损害;另外,交感神经活动的降低可能是导致运输应激致小型猪生物学功能发生改变的主要原因之一.
- 杨玉伟陈民利潘永明陈亮何欢王德军
- 关键词：心率变异性五指山小型猪
- WHBE兔血小板聚集功能的研究
- 目的：测定大耳白黑眼兔(WHBE兔)的血小板聚集功能指标,建立WHBE兔的血小板聚集功能正常指标,并与日本大耳白兔、新西兰白兔和人类血小板聚集功能指标比较,同时探讨性别因素对WHBE兔血小板聚集功能的影响。方法：选择WH...
- 陈民利寿旗扬潘永明应华忠王辉林琳周卫民王德军徐孝平
- 关键词：实验动物日本大耳白兔新西兰白兔血小板聚集率
- 文献传递
- 不同因素致亚健康大鼠血液生化、血气电解质指标的影响被引量：6
- 2012年
- 目的观察不同因素致亚健康模型大鼠血液生化和血气电解质指标的变化。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即多因素(MF)组、热水游泳(WS)组、睡眠不足(SD)组、单纯束缚(PC)组和正常对照(C)组,每组12只。采用热水游泳、睡眠剥夺和单纯束缚等单因素或多因素联合建立亚健康大鼠模型,各组造模5d后,处死6只,剩余动物进行恢复性饲养3 d后处死。分别测定造模结束后和恢复3 d时大鼠的血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和血气电解质等指标。结果 (1)与正常对照(C)组比,造模5d后MF组的大鼠BUN和TG水平显著降低(P<0.05,P<0.01),同时CREA、AST、CK、CK/AST和LDH水平显著升高(P<0.01),WS组的大鼠TC、CK、CK/AST和LDH水平亦升高显著(P<0.01),且各模型组的大鼠GLU浓度明显增加(P<0.01);恢复3 d后,MF组的大鼠TC、AST、ALT、ALB、BUN、CK、CK/AST和LDH水平均明显高于C组(P<0.05,P<0.01);WS组的大鼠血清AST、CK、CK/AST比值和LDH水平亦显著高于C组(P<0.01),SD组的大鼠CK显著高于C组(P<0.05);(2)与C组比,造模5d后MF组、SD组和PC组的大鼠PCO2、Hct和Hb均明显升高(P<0.05,P<0.01),WS组Hct和Hb升高显著且Na+显著降低(P<0.01),MF组的大鼠PO2和SO2%均显著降低且K+明显升高(P<0.05),且各造模组的大鼠HCO3-♂的浓度均显著升高(P<0.05,P<0.01);恢复3 d后,除各造模大鼠的血液pH值和PO2均明显下降(P<0.05,P<0.01)外,MF组、SD组和PC组的大鼠PCO2升高并伴有SO2%的降低(P<0.05,P<0.01),MF组和WS组Na+仍明显低于C组(P<0.05,P<0.01),SD组的大鼠K+和Mg2+则明显高于C组(P<0.05,P<0.01)。结论不同因素诱导的亚健康状态大鼠的血液生化、血气电解质指标均出现了不同程度上的改变,故血液生化和血气电解质指标能有效评估亚健康状态机体血�
- 王德军陶涛朱科燕屠珏潘颖颖艾秀峰肖慧潘永明陈民利
- 关键词：亚健康血液生化血气电解质
- WHBE兔的血液学指标测定与比较被引量：8
- 2010年
- 目的测定和比较分析WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔的血液学指标，揭示WHBE兔的血液学特性。方法选择WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔各40只，雌雄各半，耳动脉采血，应用BayerADVIA120五分类血球分析仪测定红细胞、白细胞、血小板等血液细胞参数。结果①性别因素对WHBE兔的％NEUT、％LYMP、MCH、MCHC、RDW等有显著差异（P〈0．05，P〈0．01），其它指标雌雄性别间均无显著差异（P〉0．05）：②WHBE兔的白细胞参数和红细胞参数与日本大耳白兔和新西兰白兔存在着显著差异，如白细胞数目明显低于日本大耳白兔（P〈0．01），淋巴细胞和血红蛋白含量均明显高于日本大耳白兔和新西兰白兔（P〈0．01）。结论WHBE兔有其自身的特性，也有其兔种群的共性，WHBE兔的血液学生理指标与人类较为接近。
- 应华忠寿旗扬陈民利潘永明王辉林琳朱科燕王德军徐孝平
- 关键词：日本大耳白兔新西兰白兔血液学
- WHBE兔脾虚型肠易激综合征模型的建立被引量：27
- 2008年
- 目的用WHBE兔建立脾虚型IBS模型,为脾虚型肠易激综合征(IBS)的药物开发和基础研究提供工具。方法取WHBE兔和日本大耳白兔各18只,分别随机分成两组,即正常对照组6只,模型组12只,采用湿热应激加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚证肠易激综合征(IBS)兔模型,其中模型组造模后处理6只,剩余兔自然恢复10d,观察实验兔的临床症状、体重、腹围指数、粪便含水量、胸腺指数、脾脏指数、内脏敏感性以及小肠推进率等变化。结果与正常对照组比较,模型组实验兔体重、胸腺指数、脾脏指数均明显降低(P<0.05,P<0.01),腹围指数、粪便含水量、内脏敏感性以及小肠推进率明显升高(P<0.05,P<0.01),且恢复较为缓慢。结论脾虚型IBS兔模型符合IBS临床发病特点,而WHBE兔是较适合于脾虚证IBS模型研究的理想的实验动物。
- 潘永明张利棕陈民利徐剑钦陈亮彭定国王德军应华忠
- 关键词：脾虚肠易激综合征动物模型
- IGF-1、IGFBP-3在大鼠非酒精性脂肪性肝病进展中的变化被引量：4
- 2014年
- 目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的表达及多烯磷脂酰胆碱对其的影响。方法采用高脂饲料喂养建立大鼠NAFLD模型,以多烯磷脂酰胆碱进行干预。HE染色动态观察大鼠4、8、12周时肝组织病理学变化,IRMA法动态监测血清IGF-1、IGFBP-3含量。结果正常组大鼠各时间点肝组织病理均无明显异常;模型组随高脂饮食时间延长,在4、8、12周3个时相点肝组织脂肪变、炎症程度、气球样变及NAFLD活动度积分逐渐增强,血清IGF-1、IGFBP-3逐渐明显下降,且模型组各时相点IGF-1、IGFBP-3的水平较正常组同一时相点明显降低;应用多烯磷脂酰胆碱干预后,大鼠肝组织炎症程度、NAFLD活动度积分较模型组显著降低,IGF-1、IGFBP-3的水平则较模型组明显增高。结论血清IGF-1、IGFBP-3水平随大鼠NAFLD进展而降低。
- 高凯王德军严茂祥陈芝芸
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病胰岛素样生长因子1胰岛素样生长因子结合蛋白3多烯磷脂酰胆碱IGF-1IGFBP-3
- 土茯苓对糖尿病肾病大鼠肾组织形态学及相关因子ET、NO、TGF-β_1的影响被引量：35
- 2010年
- 目的:观察土茯苓对DN大鼠肾组织形态学及相关因子的影响。方法:用尾静脉注射STZ致大鼠DN模型,按GLU值分层随机分成模型组,土茯苓高、中、低剂量组和阳性对照组,另取同批次7只大鼠为正常对照组;各组经口灌胃给予相应药物,每日1次,连续4周。放免法测定血NO、ET含量;取肾测定肾脏指数,进行肾脏常规病理观察和TGF-β1(免疫细化法)在肾小球内表达的检测。结果:土茯苓可显著提高DN大鼠NO水平和NO/ET值(P<0.01,P<0.05),不同程度地降低肾重和肾脏指数,抑制TGF-β1的表达;HE染色和PAS染色结果显示,高、中剂量组大鼠部分肾小球内系膜细胞增生,少量肾小管上皮空泡化,个别形成上皮管型,PAS染色弱阳性,部分基底膜增生,低剂量组部分肾小球体积增大,系膜细胞增生,部分肾小管上皮细胞空泡化,部分形成上皮管型,肾小球基底膜增生明显。结论:土茯苓能够一定程度的改善DN模型大鼠肾脏病理变化,抑制肾脏TGF-β表达和舒张血管是其部分作用机制。
- 王德军寿旗扬陈方明周卫民周大兴朱科燕谢日青
- α-倒捻子素模拟寡肽破坏Aβ分子内盐桥抑制Aβ聚集作用研究
- 2018年
- 目的根据特异性结合β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)的α-倒捻子素,筛选发现具有抑制Aβ聚集能力的模拟寡肽,阐明其作用机制。方法通过噬菌体展示技术筛选具有竞争α-倒捻子素与Aβ特异性结合的模拟肽,分析同源序列;根据特征同源序列,合成寡肽;采用光学表面等离子共振技术检测合成寡肽与Aβ的结合力;用特异性检测Aβ聚集程度的荧光素硫磺素T,检测合成寡肽抑制Aβ聚集的能力;采用分子对接技术,对Aβ进行定点突变,探讨合成寡肽抑制Aβ聚集的机制。结果噬菌体展示技术筛选获得特征同源序列DPN(N为酸性或碱性氨基酸);根据此特征同源序列合成的寡肽,能特异性结合Aβ;其中DPH能显著性的抑制Aβ的聚集,其作用机制与破坏Aβ分子内第23位天冬氨酸(D23)与第28位赖氨酸(K28)之间的分子内盐桥有关。结论具有特征性序列DPN的寡肽能竞争α-倒捻子素与Aβ的特异性结合,其中DPH可通过破坏Aβ分子内D23与K28之间的分子内盐桥,显著性的抑制Aβ的聚集。
- 吴飞跃黄玉吉徐孝平王德军
- 关键词：模拟肽噬菌体展示
