王惠明
- 作品数：47 被引量：176H指数：8
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- 连续性静脉-静脉血液滤过治疗尿毒症脑病30例疗效分析被引量：31
- 2008年
- 目的观察连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)治疗尿毒症脑病的作用。方法30例尿毒症脑病患者采用CVVH进行1～4次(每次12h)治疗。在CVVH治疗初始及治疗后6、12h收集血及滤液标本测定血常规、肾功能、血生化、电解质等。用ELISA法测定血浆及滤液中β2-微球蛋白(β2-MG)浓度。结果治愈26例(87%),好转3例(10%),无效1例(3%)。治疗前平均血浆β2-MG浓度为(42.8±6.2)mg/L,治疗12 h后平均血浆β2-MG浓度为(26.7±3.7)mg/L,较治疗前差异有统计学意义(P<0.05);在治疗后各观察点滤液中均能测及β2-MG,滤液中β2-MG水平与血浆β2-MG浓度呈负相关(r=-0.671,P<0.01)。CVVH治疗前后患者平均动脉压、心率、血浆渗透压无明显变化(P>0.05),血钾和肾功能较治疗前好转(P<0.05)。结论CV-VH治疗可改善尿毒症脑病。
- 丁涵露何娅妮王惠明杨聚荣王云燕刘均敏
- 关键词：尿毒症脑病连续性静脉-静脉血液滤过Β2-微球蛋白
- N核因子-κB活化参与Ox-LDL诱导人肾小球系膜细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(英文)被引量：1
- 2005年
- 目的研究核因子-κB(NF-κB)在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的体外培养的人肾小球系膜细胞表达单核/巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)中的作用。方法采用凝胶迁移率变动分析检测NF-κB的DNA结合活性变化,以免疫组化观测细胞内REL P65的核转位,用细胞ELISA法检测细胞内MCP-1及IκBα蛋白含量变化。结果不同浓度(10、25、50、100mg/L)Ox-LDL刺激肾小球系膜细胞均可引起细胞NF-κB的DNA结合活性增强,50mg/L Ox-LDL活化MCs效果最明显(8.50±1.14,P<0.01vscontrol;P<0.05vs10,25和100mg/L Ox-LDL)。Ox-LDL刺激MCs30-240min均可以活化NF-κB,60min时相点活性最强(11.0±2.11,P<0.01vscontrol;P<0.05vs30min or240min)。以50mg/L Ox-LDL刺激MCs1h后,细胞内IκBα蛋白水平最低(0.050±0.006,n=5,P<0.01vscontrol),作用24h MCP-1表达水平最高(0.331±0.016,n=5,P<0.01vscontrol)。NF-κB活化的同时伴有RELP65核转位。上述效应可被NF-κB特异性抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)所抑制。结论Ox-LDL刺激人肾小球系膜细胞产生MCP-1是由NF-κB调控,NF-κB参与了脂质肾损害的发病过程。
- 王惠明朱妙珍徐祥张建国何娅妮李开龙
- 关键词：系膜细胞单核细胞化学吸引蛋白质1
- 甘草酸18α体对缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞p21蛋白表达的影响被引量：6
- 2008年
- 目的探讨甘草酸18α体对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后肾小管上皮细胞p21蛋白表达的影响及其意义。方法将成年(2月龄)野生型鼠[p21(+/+)]和p21基因敲除鼠[p21(-/-)]分成4组:p21(+/+)鼠生理盐水组和p21(+/+)鼠甘草酸治疗组,p21(-/-)鼠生理盐水组和p21(-/-)鼠甘草酸治疗组;左肾IRI模型建立:无创动脉夹阻断左肾动脉血流45min,开放动脉夹形成再灌注。于再灌注后0、1、7d处死实验动物,制作双肾(右肾作自身对照)标本,HE染色观察肾组织病理形态学变化;Westernblot定量检测p21蛋白表达的变化。结果缺血再灌注损伤肾脏主要表现为肾小管坏死,半定量分析发现甘草酸治疗组比生理盐水组轻,p21(+/+)鼠组比p21(-/-)鼠组轻(P<0.01)。在p21(+/+)鼠,甘草酸治疗组p21蛋白表达比生理盐水组显著增多(P<0.01)。p21蛋白表达与肾小管坏死呈显著负相关(P<0.01)。结论甘草酸主要通过对小鼠IRI肾脏p21蛋白表达的上调,减轻肾小管坏死,从而对IRI肾脏产生保护作用。
- 李开龙何娅妮王惠明赵玲陈林
- 关键词：IRIP21
- 慢性肾病患者肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系被引量：18
- 2008年
- 目的探讨慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)患者蛋白尿诱导肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系。方法应用免疫组织化学技术检测CKD患者肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白氧调节蛋白150(cells-oxy-gen-regulated protein150,ORP150)和糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)的表达;TUNEL法检测细胞凋亡。对各指标与CKD患者24h尿蛋白量进行相关性分析。结果CKD患者肾小管上皮细胞细胞质中ORP150、GRP78的表达较正常对照组显著增强(P<0.01),且轻、中、重度蛋白尿3组各组间亦均有显著性差异(P<0.01),并与尿蛋白水平呈正相关(r=0.695,r=0.76,P<0.01);各组小管上皮细胞凋亡系数(apoptosis index,AI)均亦有显著性差异(P<0.01),并与尿蛋白水平呈正相关性(r=0.835,P<0.01)。结论CKD患者肾小管上皮细胞有内质网应激与凋亡的发生,并且其强度与蛋白尿水平呈正相关关系。内质网应激可能是大量蛋白尿引起小管上皮细胞凋亡的重要环节。
- 吴小玮何娅妮丁涵露王惠明李开龙杨聚荣詹俊张建国
- 关键词：慢性肾病内质网应激细胞凋亡
- 人NaDC1基因启动子序列转录调控元件的初步分析
- 2007年
- 目的对hNaDC1基因启动子序列转录调控元件进行初步分析。方法构建hNaDC1基因5′侧翼序列系列缺失质粒,以双荧光素酶报告基因检测系统检测hNaDC1基因5′侧翼区(-2232/+136)的转录调控元件与转录调控蛋白之间的相互作用。结果pGL3-hNaDC1A质粒的转录活性最高,为(2.98±0.45);pGL3-hNaDC1D的转录活性最低,为(0.45±0.14)。以pGL3-hNaDC1A质粒的转录活性为基准(100%),其他4种质粒相应的转录活性分别为:pGL3-hNaDC1B86.7%,pGL3-hNaDC1C89.4%,pGL3-hNaDC1D15.8%,pGL3-hNaDC1E61.2%。MatInspector5.0软件预测结果显示hNaDC1基因5′侧翼启动子序列共含有22个14种转录因子结合位点。结论hNaDC1基因5′侧翼区-1084/-254和-12/+136区域可能存在有正性作用转录因子的结合位点。
- 杨聚荣何娅妮张剑凯李新伦梁海君林静吴小玮王惠明李开龙
- 关键词：转录调控
- IFN-γ诱导人单核细胞MICs分子表达被引量：2
- 2007年
- 目的:研究IFN-γ对MHC-I类链相关分子(MICs)表达的调节作用。方法:采用密度梯离离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),以免疫磁珠法从PBMC中特异性分选单核细胞,以细胞因子IFN-γ、TNF-α或IFN-α刺激PBMC、纯化单核细胞或单核细胞系U937、THP-1后,以流式细胞术检测单核细胞表面MICs分子表达。结果:IFN-γ选择性上调人PBMC中单核细胞表面MICs表达;IFN-γ对人原代单核细胞及单核细胞系U937、THP-1细胞表面MICs分子表达均有诱导或上调作用,细胞因子TNF-α、IFN-α对单核细胞MICs分子表达无影响。IFN-γ诱导或上调表达的MICs分子不能被MICA或MICB特异性单克隆抗体(mAb)所识别,可能是一种新的MIC分子或MIC等位基因。结论:IFN-γ能诱导或上调人单核细胞表面MICs分子表达。
- 王惠明阮志华王沂芹傅晓岚徐文岳赵婷婷吴玉章
- 关键词：单核细胞IFN-Γ
- 基于HPV16肿瘤基因治疗载体的构建与鉴定
- 2008年
- 目的:构建基于人乳头状瘤病毒16型(human papilloma virus type-16,HPV16)的肿瘤基因治疗载体,并鉴定其对Hela肿瘤细胞的转染活性。方法:利用昆虫杆状病毒表达系统表达病毒蛋白,在体外变性与复性过程中用病毒蛋白包装绿色荧光表达质粒EGFP形成治疗载体。透射电镜观察治疗载体的结构,并转染Hela肿瘤细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染效率。结果:透射电镜观察证实病毒蛋白可自我组装成病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构,在转染Hela肿瘤细胞后,荧光显微镜和流式细胞仪成功检测到荧光的表达。结论:基于HPV16的新型肿瘤基因治疗载体能成功转染Hela肿瘤细胞,为肿瘤的基因治疗策略提供了理想的工具。
- 杨曌王惠明
- 关键词：乳头状瘤病毒基因疗法
- 白蛋白活化肾小管上皮细胞对肾小管周微血管的影响及机制研究
- 2008年
- 目的探讨人类血清白蛋白（HSA）超负荷损伤肾小管上皮细胞后对肾间质微血管损伤的影响及可能机制。方法激光共聚焦显微镜观察肾小管上皮细胞（HKC）吞饮罗丹明标记白蛋白（TRITC—BSA）以及吞饮受体cubilin siRNA对其的抑制效应。氢化乙锭标记的荧光探针柃测白蛋白刺激HKC产生O2^-以及白蛋白乔饮受体cubilin siRNA和线粒体呼吸链复合物Ⅰ抑制剂鱼藤酮对HKC产生O2^-的抑制作用。培养上清H2O2采用化学比色方法检测。倒置显微镜下观察HSA激活的HKC以及cubilin siRNA或龟藤酮预处理的HKC与脐静脉内皮细胞（HUVEC）共培养后缸管内皮管样结构形成情况。四甲基偶氮哗盐（MTT）比色法测定内皮细胞活力。用流式细胞仪以AnnexinV FITC／PI双染法偷测内皮细胞凋亡率。结果（1）cubilin siRNA可显著抑制HKC译饮白蛋白（P〈0．05）。（2）HSA刺激HKC产生ROS呈剂量及时间依赖性（P〈0．05）；cubilin siRNA及鱼藤酮均可抑制门蛋门超负荷诱导HKC产牛大垃ROS（P〈0．05）。（3）HKC与HUVEC共培养体系中，HSA活化的HKC抑制内皮细胞管样结构的形成，内皮细胞增殖显著减少（P〈0．05），细胞凋亡率显著增高（P〈0．05）；而cubilin siRNA和鱼藤酮干预组内皮细胞管样结构数及内皮细胞活力显著增加（P〈0．05），细胞凋亡率显著降低（P〈0．05）。结论白蛋白可通过乔饮受体cubilin激活肾小管上皮细胞线粒体呼吸链复合物Ⅰ产生大馈ROS，后者可能是慢性肾病时大量蛋白尿活化肾小管上皮细胞进而损伤肾小管周徽血管网的再要介质。
- 林静何娅妮王惠明李开龙丁涵露申海鹰杨聚荣
- 关键词：肾小管上皮细胞内皮细胞白蛋白活性氧
- 强化人文素质教育对实习生临床工作能力的影响被引量：2
- 2011年
- 研究专题讲座形式对强化临床实习生人文素质和临床工作能力的影响,将某医学院校的200名临床实习生随机分成A、B两组,每组100名实习生,A组接受强化素质教育,B组未接受强化素质教育。临床实习1年后,对两组实习生的文素质状况和临床工作能力进行比较分析。结果发现,与未接受强化素质教育的实习生进行比较,接受强化素质教育的实习生,人文素质和临床工作能力均得到显著提升(P<0.01);相关性分析显示,实习生的临床工作能力与其人文素质状况呈显著正相关关系(P<0.01)。表明采用专题讲座形式的强化素质教育措施,可以达到短期内提升学生人文素质、提高临床工作能力的目的,值得在临床实习教学中借鉴。
- 李开龙何娅妮王惠明张建国霍本刚
- 关键词：实习生人文素质
- 基于HPV16的新型伪病毒治疗MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的实验研究
- 2008年
- 目的构建基于人乳头状病毒(human papilloma virus,HPV)16型的新型伪病毒,探讨对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用,为临床治疗系统性红斑狼疮提供实验依据。方法将12只3月龄MRL/lpr狼疮小鼠随机均分为治疗组和对照组,治疗前后测定尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体滴度。结果治疗组小鼠治疗后的尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体均下降,与治疗前有显著性差异(P<0.05),而对照组治疗前后无显著性差异(P>0.05),并且治疗组小鼠的平均生存期比对照组明显延长(P<0.05)。结论基于人乳头状病毒16型的新型伪病毒可显著改善MRL/lpr小鼠的免疫状况和肾脏功能,提高平均生存期。该研究结果为临床治疗系统性红斑狼疮提供了新的启示。
- 杨曌王惠明
- 关键词：系统性红斑狼疮
