王顺成
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 产碱杆菌DN25中降氰酶的分离纯化及生化特性被引量：2
- 2012年
- 以一株可降氰的产碱杆菌DN25为酶来源,通过超滤、30 mg/mL硫酸鱼精蛋白沉淀、30%～70%硫酸铵盐析和Phenyl-Toyopearl 650M疏水层析等步骤,获得比活力为44 U/mg的纯化酶制剂.在确定酶浓度、反应时间等氰降解活力测定条件后开展酶学性质研究,试图为将来氰降解代谢机理的深入研究和菌株的基因工程改造提供理论基础.研究结果表明,此纯化酶催化氰化物水解的最适pH值为8.0,最适温度为30℃.该酶在pH 7.0～8.0区域稳定,而在pH>9时会很快失活;在30℃保存10 h,酶活力保持稳定,高于60℃,酶快速失活.加入甘氨酸稳定剂,在60℃下保存20 min酶活仍可保留19.6%.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为3.11 mmol/L,最大反应速率Vmax为0.23 mmolL-1min-1.
- 汪艳华刘幽燕唐爱星李青云王顺成
- 关键词：分离纯化酶特性氰化物
- 产碱杆菌DN25纯化降氰酶稳定剂的选择
- 2013年
- 向产碱杆菌(Alcaligenes sp.)DN25的纯化降氰酶中分别添加不同浓度的多元醇类、金属离子类、糖类、防腐剂类等添加剂,研究不同种类、不同浓度的添加剂对降氰酶稳定性的影响,优选可以提高降氰酶稳定性的添加剂。结果表明:外加添加剂甘油浓度为1.5%(m/V)时,酶活保留率为5.4%;[NH4]2SO4浓度为4%(m/V)时,酶活保留率为5%;淀粉浓度为6%(m/V)时,酶活保留率为14.3%;甘氨酸浓度为3%(m/V)时,活力酶活保留率为19.6%。甘氨酸对产碱杆菌DN25降氰酶具有最强的保护作用。
- 汪艳华刘幽燕李青云唐爱星王顺成甘雨
- 关键词：稳定剂酶活
- 重组葡萄糖脱氢酶酶学性质研究被引量：2
- 2007年
- 葡萄糖脱氢酶可用于高纯度低聚果糖和葡萄糖酸钙的生产,一种重组葡萄糖脱氢酶表达、纯化后,对该酶酶学性质进行了研究。最适反应pH值8.4,最适反应温度37℃,在温度低于45℃条件下,酶活力稳定性好。在最适温度和pH条件下,以葡萄糖为底物时葡萄糖脱氢酶的米氏常数Km=20.09mmol/L,以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)为底物时的米氏常数Km=0.10mmol/L。
- 唐江涛覃益民杨梅王顺成姚评佳魏远安
- 关键词：酶学性质低聚果糖
- 产碱杆菌DN25降氰酶类型判断及其分离纯化
- 氰化物在工业中的广泛应用造成大量含氰废水，环境污染问题严重。与传统化学处理法相比，生物降解具有无害化、可资源化的优点，是一种很有发展前景的污染治理方法。自然界中存在多种具有降氰能力的细菌、真菌和植物。本实验室筛选保藏的一...
- 王顺成
- 关键词：分离纯化氰化物
- 文献传递
- 产碱杆菌DN25降氰酶产酶条件初步优化被引量：1
- 2010年
- 以实验室保藏的一株具有高效降氰活性的菌株Alcaligenes sp. DN25为研究对象,通过分析其降解产物,发现终产物中存在甲酸,初步判断此菌株降氰反应为氰水解途径。在培养基中添加KCN来考察底物对菌体产酶的诱导作用,结果发现菌体的活力没有提高,表明菌株DN25所产降氰酶应为组成型酶。在培养基中添加4种金属离子和4种含硫物质,其中微量金属离子对菌体的生长和活性均有抑制;Na2SO4和Na2S2O3对菌体生长和产酶均无明显影响;DL-半胱氨酸对菌体产酶有明显促进作用,DL-甲硫氨酸可同时提高菌体的生长量和产酶水平,从而提高发酵液比活力。研究结果为降氰酶的大量获得以及酶制剂在氰污染治理方面的应用研究奠定了基础。
- 王顺成刘幽燕汪艳华李青云
- 关键词：降解途径
- 产碱杆菌DN25的氰降解代谢途径分析与产酶条件优化被引量：6
- 2011年
- 本实验室分离保藏的一株产碱杆菌Alcaligenes sp.DN25具有较高降氰活性,通过分析氰降解代谢产物确定了其降解途径,并根据降氰酶催化活性部位特征对产酶条件进行了优化。结果显示,氰的降解代谢途径可推断为由氰水解酶、氰水合酶和酰胺水解酶共同作用的水解途径,而其中氰水解酶的活性占主要作用;在培养基中分别添加4种含硫物质,发现DL-半胱氨酸对菌体产酶有明显促进作用,DL-甲硫氨酸能同时提高菌体的产酶水平和细胞生长量。此两种物质添加量为0.8%时,单位发酵液酶活力可分别达到1.26 U·ml-1和2.10 U·ml-1。在1L三角瓶中进行扩大培养优化,得到最佳培养条件:装液量100ml,pH9.0,接种量8%,在基本培养基中添加0.8%的DL-甲硫氨酸。菌株的生长曲线和产酶曲线趋势基本一致,培养40h后进入稳定期,单位发酵液酶活力平均值为2.18 U·ml-1,是优化前的3.46倍。
- 王顺成刘幽燕李青云童张法覃益民许建和
- 关键词：产酶条件优化
- 糖蜜酒精废水生物脱色技术探索和基本问题研究
- 刘幽燕龚琦覃益民李青云李必金贺莉丽王顺成董园
- 该课题来源于国家自然科学基金委（批准号21066001）。课题以糖蜜酒精废水的复杂色素体系为研究对象，探讨生物强化法脱色的过程强化和机理研究，试图为开辟具有自主知识产权的高效糖蜜酒精废水脱色新工艺奠定理论基础，丰富相关色...
- 关键词：
- 关键词：糖蜜酒精废水净化脱色工艺
