程俊
- 作品数：51 被引量：59H指数：4
- 供职机构：西南医科大学心血管医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅资助科研项目四川省教育厅自然科学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高血压的治疗与离子通道相关性研究进展被引量：7
- 2011年
- 高血压是一种多因素相互作用的常见慢性疾病,严重危害人类健康,常引起心、脑、肾等重要器官的病变,降压是治疗高血压的首要目标。目前,抗高血压药物有很多,其作用靶点也各不一致,其中作用于离子通道的药物是人们关注的热点。现将高血压的治疗与离子通道之间的相关性综述如下。
- 程俊曾晓荣杨艳
- 关键词：高血压离子通道
- 可诱导稳定表达大电导钙激活钾通道的细胞系构建及蛋白质纯化
- 2017年
- 目的:旨在构建稳定表达人大电导钙激活钾通道(BK_(Ca))的稳定细胞系并对重组蛋白分离纯化。方法:利用基因工程技术将人肠系膜动脉平滑肌BK_(Ca)编码基因克隆到表达载体pcDNA5/FRT/TO/FLAG,并转染Flp-InTMT-RExTM-293宿主细胞,用潮霉素B筛选建立稳定表达的单克隆细胞系。BK_(Ca)-pcDNA5-293细胞系经四环素诱导后,用anti-FLAG抗体对表达的BK_(Ca)蛋白质进行纯化。用western blot检测BK_(Ca)通道蛋白质的表达,用单通道膜片钳检测通道的电生理特性。结果:BK_(Ca)-pcDNA5-293细胞系经四环素诱导后表达了高水平的BK_(Ca)-FLAG融合蛋白,BK_(Ca)通道电导值为213.39±9.52pS(n=15,cell-attached)和225.72±10.61pS(n=13,inside-out),BK_(Ca)通道具有典型的大电导特性、电压依赖性、Ca2+依赖性及IbTX敏感性,与在体的人肠系膜动脉平滑肌BK_(Ca)通道具有相同的特征。纯化后的BK_(Ca)蛋白质条带单一,纯度约为89%。结论:成功构建BK_(Ca)-pcDNA5-293细胞系并获得纯化的BK_(Ca)蛋白质,为进一步深入研究通道功能及药物筛选奠定了重要的基础。
- 毛亮程俊黄文俊谭晓秋党喜同曾晓荣杨艳
- 关键词：膜片钳
- 丹参酮ⅡA磺酸钠(DS-201)脂质体的制备及其对表达在HEK293细胞上BKCa激活作用初探
- 目的:本研究旨在探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(DS-201)脂质体的制备及其对在HEK293细胞上表达的大电导钙激活钾通道(BKCa)α亚单位的激活作用,并比较DS-201及其脂质体对在HEK293细胞上表达的BKCa通道α亚单...
- 程俊曾晓荣谭晓秋李鹏云文静郁蕾杨艳
- 关键词：脂质体大电导钙激活钾通道
- 文献传递
- A型钾离子通道对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:探究A型钾离子(Potassium,K^+)通道抑制后对舌鳞状细胞癌株(Tca8113)细胞的影响。方法:全细胞膜片钳技术记录和分析A型K^+通道阻滞剂4-氨基吡啶(4-AP)对Tca8113细胞K^+电流的影响;MTT检测A型K^+通道对细胞增殖的作用。结果:在终浓度为2 mmol/L 4-AP作用下,A型K^+电流的峰值从(267.04±13.84)pA降到(124.81±5.24)pA。在一定范围内,不同浓度4-AP能抑制Tca8113细胞在体外的增殖,且抑制程度随药物浓度和作用时间的增加而增强。结论:A型K^+通道参与Tca8113细胞增殖的过程,且A型K^+通道阻滞剂能抑制Tca8113细胞的增殖。
- 张晓艳程俊许华丽毛亮聂敏海
- 关键词：舌肿瘤4-氨基吡啶电压门控细胞增殖
- 表达在HEK293细胞上的BK_(Ca)通道基本特性与动力学调控研究
- 2013年
- 目的构建稳定表达人血管平滑肌大电导钙激活钾通道(BKCa)的293细胞系,并研究其基本电生理学特征和动力学模型。方法通过脂质体(lipofectamine 2000)转染法转染BKCa表达质粒pcDNA3.1-BKα和(或)pIRES-BKβ1,筛选稳定表达的单克隆细胞系。使用膜片钳多种记录方式研究其基本电生理学特性,同时建立BKCa动力学研究模型。结果构建稳定转染BKCa通道α和(或)β1亚单位的HEK293细胞系,通过膜片钳能够记录到具有与天然细胞BKCa电生理学特性相似的电流,包括大电导特性[内面向外式构型下单通道电导为(216.38±3.55)pS]、电压依赖性、Ca2+依赖性、钾离子选择性和200nmol/L IbTX(BKCa特异性阻断剂)阻断;联合表达β1亚单位能够明显增加通道的开放时程。采用inside-out宏观电流记录方式可以记录到明显的尾电流。可以用于分析通道激活、去激活等动力学模型及药物动力学作用机制。结论成功构建稳定转染BKCa通道α和(或)β1亚单位的HEK293细胞系。膜片钳实验证明具有典型的BKCa电生理学特性,同时建立的细胞系可以很好的用于BKCa通道功能调控研究和动力学参数分析。
- 谭晓秋程俊程秀丽李畅毛亮曾晓荣曹济民杨艳
- 关键词：大电导钙激活钾通道血管动力学
- 一种有效急性酶分离大鼠心肌细胞及复钙的方法被引量：2
- 2016年
- 目的:本研究旨在探讨一种既简便又高效的急性酶分离大鼠心肌细胞及有效复钙的方法,拟建立一种稳定高效分离大鼠心肌细胞且复钙后细胞成活率高的方法,为进一步研究单个心肌细胞的各种生理机制等诸多实验提供有利的前提保障。方法:应用II型胶原酶于Langendorff灌流装置下进行恒压或恒流灌流,得到横纹清晰、立体感较强的大鼠心肌细胞,然后应用三步法对心肌细胞进行复钙。结果:应用Langendorff灌流系统对大鼠心脏进行恒压或恒流灌流II型胶原酶,成功得到横纹清晰、立体感较强的大鼠心肌细胞,且复钙后在台式液中存活率仍然高达50%。结论:成功建立了一种既简便高效又稳定的急性分离大鼠心肌细胞且复钙后心肌细胞成活率较高的方法,为今后研究大鼠心肌细胞舒缩功能及其基本生理特性提供良好的单个细胞。
- 程俊曾晓荣谭晓秋李鹏云文静毛亮杨艳
- 关键词：心肌细胞LANGENDORFF
- (B)-雌二醇对高血压女性肠系膜动脉BKCa激活作用的研究
- 程俊曾晓荣李鹏云文静谭晓秋周文杨艳
- 关键词：高血压肠系膜动脉大电导钙激活钾通道雌激素受体
- β-雌二醇对高血压患者肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道作用机制初探
- 目的研究β-雌二醇(β-Estradiol,β-E)对非高血压(Non-hypertension,NT)及原发性高血压(Essential hypertension,ET)人体肠系膜动脉平滑肌细胞(Human mesen...
- 程俊曾晓荣李鹏云李妙龄谭晓秋周文杨艳
- 关键词：Β-雌二醇原发性高血压大电导钙激活钾通道
- 文献传递
- β-雌二醇对高血压女性肠系膜动脉大电导钙激活钾通道激活作用的研究
- 目的:本文旨在研究雌激素对动脉平滑肌大电导钙激活钾通道(large-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)的作用,并比较绝经前女性非高血压(pre-meno...
- 程俊曾晓荣杨艳
- 穿孔膜片钳记录肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道方法初探
- 2014年
- 目的利用穿孔全细胞膜片钳技术以提高记录到稳定的大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large conductance Ca2+-activated K+channels,BKCa)电流的成功率。方法在两性霉素B穿孔全细胞膜片钳下记录大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa宏观电流和自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)。结果采用两性霉素B穿孔全细胞膜片钳技术,记录到BKCa和STOCs概率明显增加,且可以维持3小时。结论通过穿孔全细胞膜片钳可以记录到稳定的且维持时间长的大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa电流。
- 文静程俊杨艳
- 关键词：大电导钙激活钾通道血管平滑肌细胞
