程悦宁
- 作品数：112 被引量：155H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 狐狸脑炎活疫苗(CAV-2C株)规模化生产工艺
- 2016年
- 开展了狐狸脑炎活疫苗(CAV-2C株)生产用毒种的制备与鉴定、狐狸脑炎活疫苗的制备,进行了狐狸脑炎活疫苗生产中关键工艺参数的优化和验证,建立了狐狸脑炎活疫苗规模化生产工艺。
- 程悦宁张淼
- 关键词：狐狸传染性脑炎疫苗
- 水貂阿留申病毒抗体胶体金检测方法的开发和应用被引量：2
- 2019年
- 为开发一种全新的检测水貂阿留申病毒抗体的检测方法,采用胶体金标记法对水貂阿留申病毒AMDV-G株进行全病毒标记,随后将金标记物固化在固相载体中,同时按顺序将水貂阿留申病毒全病毒以及水貂抗阿留申病毒抗体喷涂于硝酸纤维素膜(NC膜)上,将金标记物固相载体以及包被有抗体及病毒的NC膜连同其他组件组装成试纸条,进行水貂阿留申病毒抗体的检测。对于水貂阿留申病毒抗体阳性样品,试纸条检测线(T线)和质控线(C线)均有条带,水貂阿留申病毒抗体阴性样品,试纸条检测线(T线)无条带,而质控线(C线)有条带。结果,所制备的水貂阿留申病毒抗体胶体金检测试纸条实验室检测阳性质控血清符合率达100%,不与MEV、CDV阳性血清及ADV阴性血清反应,对试纸条的重复性检测达100%,临床试验对240只水貂血清样品对比进行检测,两种方法检测结果符合率95.83%。上述结果表明,本研究建立的水貂阿留申病毒抗体胶体金检测方法可以作为替代对流免疫电泳检测水貂阿留申病的新方法。
- 王振军罗国良易立郭利冯二凯程世鹏程悦宁
- 关键词：水貂阿留申病毒抗体检测胶体金对流免疫电泳
- 牛病毒性腹泻病毒一步法微滴数字PCR检测方法的建立与初步应用被引量：3
- 2023年
- 为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)一步法微滴数字PCR(RT-ddPCR)方法,本研究在一步法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法的基础上,设计BVDV的特异性引物和探针,对RT-ddPCR试验中的反转录酶、退火温度、引物和探针浓度以及检测方法的反应条件进行优化。同时对其特异性、敏感性、重复性进行评估。结果显示,建立的RT-ddPCR方法最佳反转录体系为商品化一步法数字PCR试剂盒配套试剂、引物和探针终浓度分别为900 nmol/L和250 nmol/L,最佳退火温度为57℃;用本方法检测常见疫病病毒时结果呈阴性;本方法最低检测限为3.2 copies/μL,重复性好,且变异系数小于5%。采用RT-ddPCR和RT-qPCR对24份牛源拭子样品进行检测,检测结果显示所建方法优于RT-qPCR方法。本研究建立的RT-ddPCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,适用于临床样品的核酸检测,为牛病毒性腹泻病毒感染的早期检测和定量诊断提供了技术支持。
- 叶京飞郭利刘占悝李建友李智杰孙飞雁董清平程悦宁
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒一步法
- 两种检测水貂阿留申病毒抗体方法敏感性的比较研究被引量：1
- 2019年
- 本研究对胶体金试纸条检测法与对流免疫电泳检测法检测水貂阿留申病毒抗体的敏感性进行对比研究。试验采用实验室制备的检验合格的试纸条,分别对20份不同效价的水貂阿留申病毒阳性质控血清和100份自然感染的田间血清进行检测,分析不同稀释度的阳性血清检出数量和阳性检出率,从而对两种检测方法的敏感性进行评估。结果显示,阳性质控血清在1:64倍以下稀释时,试纸条对阳性血清和弱阳性血清的检出率均为100%,对100份自然感染阳性血清检出率为96%,表明该试纸条的检测具有较高的敏感性。
- 王振军罗国良易立郭利冯二凯程世鹏程悦宁
- 关键词：胶体金试纸条对流免疫电泳敏感性
- 一种水貂源D型绿脓杆菌及其应用、其灭活疫苗以及该灭活疫苗的制备方法
- 一种水貂源D型绿脓杆菌及其应用、其灭活疫苗以及该灭活疫苗的制备方法，属于疫苗制备技术领域。针对目前缺少预防水貂假单胞菌肺炎的特定血清型疫苗的问题，本发明提供了一种水貂源D型绿脓杆菌LN17‑D株，其保藏编号为CGMCC ...
- 罗国良程悦宁王振军冯二凯易立程世鹏郭利白雪
- 文献传递
- 一种犬用犬瘟热、细小病毒病二联灭活疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种犬用犬瘟热、细小病毒病二联灭活疫苗及其制备方法，涉及疫苗制备方法，该疫苗的有效成分包括灭活犬瘟热病毒CDV‑LG株和灭活犬细小病毒CPV‑W株，安全性试验表明，使用本发明的二联灭活疫苗接种犬未见任何不良反...
- 罗国良冯二凯程悦宁王振军易立
- 一种用于鉴别FPV和CPV的HRM引物组，含有该引物组的试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于鉴别犬细小病毒(CPV)和猫细小病毒(FPV)的HRM引物组，含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的引物组由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的下游引物...
- 王建科程悦宁孙亚茹程世鹏林鹏易立仝明薇
- 文献传递
- 犬源干扰素刺激基因ISG15和IFIT2荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：1
- 2020年
- 干扰素刺激基因在抗病毒及调节IFN信号通路的过程中具有重要作用。本课题组前期对犬瘟热病毒(CDV)感染宿主前后全转录组进行测序分析,发现干扰素刺激基因ISG15和IFIT2明显上调,为了进一步探究ISG15和IFIT2对CDV感染的影响,本研究设计合成了犬源ISG15、IFIT2和持家基因GAPDH的特异性引物,分别进行PCR扩增,构建质粒标准品,建立荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行检验。结果表明,犬源ISG15、IFIT2和GAPDH的荧光定量PCR标准曲线的相关性R^2均大于0.98,表明线性关系良好。ISG15、IFIT2和GAPDH的融解曲线均为单峰,扩增产物单一,且峰值一致,表明建立的荧光定量PCR方法特异性良好。组内与组间的变异系数均小于0.2%,表明该方法重复性较好。对CDV感染宿主细胞前后的ISG15和IFIT2 mRNA表达水平进行检测,发现CDV感染后ISG15和IFIT2的表达量升高,表明ISG15和IFIT2在CDV感染过程中发挥重要作用。该结果为针对CDV与干扰素抗病毒研究的开展提供重要的技术手段,并为进一步揭示CDV致病的分子机制奠定基础。
- 王改丽程悦宁张淑琴王建科王超孙娜易立程世鹏
- 关键词：犬瘟热病毒ISG15荧光定量PCR
- 一种同时检测鹿布病和结核病胶体金试纸条及试剂卡
- 本发明利用羊种布鲁菌LPS和重组牛分歧杆菌MPB70蛋白，公开了一种同时检测鹿布病和结核病胶体金试纸条及试剂卡，其中，LPS和MPB70蛋白作为检测抗原，建立的双抗原夹心法胶体金试纸条检测动物血清中抗体，试纸条检测鹿结核...
- 杨艳玲张萍程悦宁郭健程世鹏
- 文献传递
- 应用宏基因组测序开展银黑狐真菌皮肤病分子流行病调查被引量：1
- 2016年
- 毛皮动物的皮肤真菌病也称癣病,是由于真菌感染皮肤、被毛后所致的疾病。主要症状是患部断毛、掉毛或出现圆形脱毛区,皮屑较多。该病是一种接触性人兽共患病。本研究以银黑狐真菌病患病皮肤样本为基础,以真菌内转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)为靶标序列,应用宏基因组测序方式,对样本中所有真菌样本的ITS进行序列测定和生物学统计。结果显示,检测出致病真菌苯黑末节皮真菌(Arthroderma benhamiae),并且为优势菌株;基于ITS基因的系统发育树分析显示,样本内的真菌呈现出多样性特征,且苯黑末节皮真菌与发菌科(Trichocomaceae)在拓扑分类学上近似。
- 易立曹智刚仝明薇程悦宁程世鹏
- 关键词：银黑狐皮肤真菌内转录间隔区
