章平 作品数:37 被引量:230 H指数:10 供职机构: 华东师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 上海市自然科学基金 上海市科学技术发展基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
人外周血Vα24 NKT细胞和CD3^+CD56^+CIK细胞生物学特性的比较研究 被引量:11 2006年 目的进一步认识Vα24 NKT细胞和CIK细胞在生物学特性的差异。方法从人外周血单个核细胞扩增NKT细胞和CIK细胞;经免疫磁珠纯化获得高纯度的TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞。运用流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的表型、细胞因子和细胞坏死相关因子的表达情况,并用DIOC18染色及流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的细胞杀伤活性。结果经纯化TCRVα24+Vβ11+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞的纯度均达到>90%;纯化后的Vα24 NKT细胞多数为CD4+和DN NKT细胞,高表达TCRVα24、Vβ11、CD3、CD161,低表达CD56;而纯化后的CIK细胞则以CD8+T细胞为主,高表达CD3、CD56,低表达CD161,几乎不表达TCRVα24和Vβ11。在抗原刺激下,CD3+CD56+CIK细胞的IFN-γ、TNF-α、Perforin、FasL、TRAIL表达水平均高于NKT细胞,但CD3+CD56+CIK细胞几乎不分泌IL-4,而NKT细胞则分泌高水平的IL-4;CD3+CD56+CIK细胞对肿瘤细胞株K562、U937、Jurkat的杀伤率均远远高于NKT细胞。结论TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞是两类完全不同的细胞群,在抗肿瘤免疫和免疫调节中可能起着不同的作用。 杨洁 范华骅 聂晓绚 高砾 刘嬿 章平 高峰关键词:NKT细胞 流式细胞术 细胞生物学 利用体内噬菌体展示技术筛选肝癌组织特异性结合肽 被引量:14 2005年 目的筛选人源肝癌组织特异性结合短肽。方法体外培养人源肝癌细胞株BEL-7402,建立荷瘤裸鼠模型。尾静脉注射噬菌体12肽文库至荷瘤裸鼠体内,循环20 m in后回收肿瘤组织中噬菌体,同时取正常对照组织进行噬菌体效价测定和免疫组化观察。将回收的噬菌体扩增、纯化,并以此作为起始物进行下一轮筛选。经过3轮体内筛选,得到与肝癌组织或细胞特异结合的肽段。随机挑选噬菌体单克隆进行测序,分析序列同源性后进行体外细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)和体内回输实验,验证噬菌体克隆的导向性。结果经过3轮体内筛选,瘤组织中噬菌体的回收率逐步提高,回收量随着输入量的增加迅速增加,而每轮筛选肝组织中的噬菌体回收量始终保持在一个恒定范围,并不随输入量的增加而增加。免疫组化结果显示,第3轮筛选后,瘤组织中的噬菌体得到高水平富集,同时其他组织的非特异性结合降至最低。肝癌细胞特异性结合最强的是A54号单克隆,A67、B2号单克隆次之。B2的导向效果最好,A54次之。通过对噬菌体单克隆的序列分析,初步确定了PSS/PTT基序。结论利用体内噬菌体展示技术,可以成功筛选到与肝癌细胞或组织特异结合的噬菌体肽。 杜冰 于静 周忠良 章平 郁萌 钱旻关键词:肽库 肝肿瘤 特异性结合肽 棘阿米巴细胞毒作用机理的初探 棘阿米巴(acanthamoeba)是一类广泛分布于自然界的小型自由生活原生动物,其生活史包括滋养体和包囊两部分.棘阿米巴属中的一些致病性虫株能引发致命的肉芽肿性阿米巴脑膜炎(granulomatous(amoebic ... 钱旻 严正 章平文献传递 体外筛选得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途 一种肿瘤导向治疗中的能特异性结合肝癌组织/细胞的粘附肽以及该粘附肽的应用,属于分子药理学技术领域。本发明提供的两种肝癌组织/细胞的粘附肽的多肽序列为:序列一:NH<Sub>2</Sub>-T-A-C-H-Q-H-V-R-... 钱旻 周忠良 章平 杜冰 王鹏 郁萌文献传递 检测尿中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的玻化试剂 被引量:1 2000年 研制成功了一种新型的、检测尿中 N-乙酰 -β- D-氨基葡萄糖苷酶 (N- Acetyl-β- D-Glucosaminidase;NAGase)的玻化试剂。与液态试剂比较 ,除了溶解度大大增加外 ,还具有高度稳定性 ,使该试剂盒能在室温、见光下长期储、运。临床研究表明 ,该玻态试剂的特异性、灵敏度、检出率等 。 范培昌 钱 章平 田景雯关键词:葡萄糖苷酶 诊断试剂 肾病 双功能磁流体及其制备方法 一种双功能磁流体及其制备方法。该磁流体由磁性无机纳米颗粒、修饰层和导向肽组成。磁性无机纳米颗粒是粒径为5~20nm的铁的氧化物的颗粒。修饰层是天然高聚物:淀粉或葡聚糖。导向肽是由12~15氨基酸组成的对肝癌具有特异性的多... 姜继森 甘志峰 杨勇 钱旻 章平 杜斌文献传递 沙棘籽渣黄酮类化合物诱导人肝癌细胞凋亡研究 被引量:10 2003年 目的:探讨沙棘籽渣黄酮类化合物(FSH)对人肝癌细胞BEL-7402的抑制和诱导凋亡作用。方法:采用SRB观察FSH对人肝癌细胞BEL-7402的生长抑制作用,采用wright染色、透射电镜和流式细胞术检测FSH对BEL-7402细胞的促凋亡作用。结果:200~1200μg/ml FSH能够剂量依赖性地抑制 BEL-7402细胞的增殖,wright染色观察到凋亡小体,透射电镜下发生染色质边集,流式细胞术检测出现亚二倍体峰。结论:FSH能够抑制BEL-7402的生长并能诱导细胞凋亡。 孙斌 章平 瞿伟菁 张晓玲 庄秀园 杨煌建关键词:肝癌 细胞凋亡 黄酮 抑制血管内皮生长因子基因表达的siRNA靶基因序列 本发明涉及一段抑制血管内生长因子基因表达的siRNA靶基因序列,属于基因工程技术领域。通过PCR的方法将siRNA序列与U6启动子以及报告基因GFP连接在一起,形成一个siRNA表达框,来检测VEGF被抑制的情况,取得了... 钱旻 俞磊 罗淑芳 章平 高云波 杜冰 汪磊文献传递 棘阿米巴滋养体致黑色素瘤细胞损伤的初步研究 被引量:7 2002年 为研究处于分类地位不同的 5种棘阿米巴滋养体对黑色素瘤细胞B16的细胞毒性作用的方式、以及细胞毒性作用差异与其致病性的关系。将 5种不同种类的棘阿米巴滋养体分别与体外培养的黑色素瘤细胞B16混合 ,利用细胞免疫荧光技术和透射电子显微镜观察棘阿米巴滋养体对黑色素瘤细胞B16的影响 ,并运用MTT法检测、比较不同棘阿米巴对肿瘤细胞作用的差异。结果显示 :这 5种棘阿米巴滋养体对黑色素瘤细胞B16均有不同程度的细胞毒性作用 ,其机制是诱导肿瘤细胞发生细胞凋亡 。 钱贠 严正 章平 郁萌关键词:肿瘤细胞 细胞毒性作用 细胞凋亡 沙棘黄酮类化合物对人乳腺癌细胞生长抑制和凋亡诱导的研究 被引量:10 2005年 为研究沙棘籽渣黄酮类化合物(FHR)对人乳腺癌细胞Bcap-37的生长抑制和凋亡的诱导作用,探讨其抗癌作用的机制,本项研究应用CCK-8法检测FHR对Bcap-37的生长抑制效应,流式细胞术(FCM)分析细胞周期及凋亡率,透射电镜观察细胞凋亡的超微结构表征,半定量RT-PCR方法和Westernblot方法检测与细胞周期及凋亡调控相关基因的转录和表达的变化。结果表明,FHR可明显抑制Bcap-37的增殖,并呈剂量依赖性;FCM分析发现在FHR1000μg/ml作用24h后能阻断Bcap-37细胞于G2/M期,并伴有少量的亚G1峰出现;TEM观察Bcap-37细胞经FHR作用后具有典型的凋亡形态学特征;半定量RT-PCR结果显示,经1000μg/mlFHR作用24h后,PCNA、Bcl-2转录水平分别下调为对照组的0.26倍和0.66倍,IGFBP4转录水平上调为对照组的1.13倍。Westernblot结果显示p53蛋白表达显著上调,Bcl-2蛋白表达显著下调。本项研究结果提示FHR可能是通过下调PCNA的转录使细胞的增殖被阻断在G2/M期,并通过p53蛋白上调和Bcl-2蛋白的下调诱导Bcap-37细胞凋亡。 毛玉昌 章平 徐洪钧 徐峰 贾彩凤 钱旻 瞿伟菁关键词:沙棘 黄酮类化合物 细胞凋亡