粘红
- 作品数：13 被引量：29H指数：3
- 供职机构：天津医科大学眼科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市北辰区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 兔自身免疫性干眼模型的建立及泪腺炎症因子研究被引量：8
- 2015年
- 目的通过静脉回输自体激活的淋巴细胞建立稳定的兔自身免疫性干眼模型,并分析干眼的泪腺炎性因子,探究干眼的泪腺免疫反应。方法通过体外分离、培养兔泪腺上皮细胞和自体外周血淋巴细胞,建立二者的共培养体系。将体外激活的自体外周血淋巴细胞通过耳缘静脉注射的方法诱发自身免疫性泪腺炎。对干眼临床指标及泪腺细胞因子表达进行检测。结果与正常对照组相比,干眼模型组泪液分泌显著减少(t=115.6,P<0.05),泪膜破裂时间缩短(t=92.5,P<0.05)。荧光素钠染色显示角膜弥漫性点状着色,正常对照组基本无着色。泪腺组织HE染色显示淋巴细胞浸润,正常对照组很少。RT-PCR结果显示,干眼模型组泪腺中炎性因子IFN-γ、IL-6、IL-17 mRNA相对表达量显著升高(t=26.2、18.7、8.4;均为P<0.05),抑炎因子IL-10、TGF-βmRNA相对表达量显著降低(t=22.1、14.2;均为P<0.05)。结论经兔泪腺上皮细胞激活的自体外周血淋巴细胞静脉回输后,成功诱发干燥综合征样自身免疫泪腺炎,建立了稳定的兔自身免疫性干眼模型。泪腺组织中细胞因子IL-6、IL-17、IFN-γ、TGF-β、IL-10参与泪腺内炎症反应的发生和发展。
- 杨丽媛边领斋李雪粘红东莉洁魏瑞华
- 关键词：细胞因子IL-10
- 负载可递送内皮抑制素基因的胶原基复合角膜替代物在兔角膜移植中的研究
- 2014年
- 目的观察负载可递送内皮抑制素基因的胶原基复合角膜替代物,在行板层角膜移植术后角膜的愈合情况,评价其作为角膜移植替代物的可行性。方法选用健康成年大耳白兔105只,随机分为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组,每组各30只,Ⅰ组、Ⅱ组分别行板层植入胶原基复合角膜替代物、负载可递送内皮抑制素基因的胶原基复合角膜替代物;Ⅲ组为同种异体对照组。各组根据不同处死时间随机分为3 d、7 d、15 d、1个月、3个月、6个月组,每组各5只。其余15只(30眼)作为Ⅲ组角膜移植供体来源。术后行裂隙灯显微镜观察角膜透明度与角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)评分情况,行HE染色以及上皮细胞标志蛋白K3和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的免疫组织化学检测。采用Friedman秩和检验行组间比较,组内两两比较采用Wilcoxon符号秩和检验。结果Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组术后角膜透明度逐渐升高(P1=0.000、P2=0.000、P3=0.006)。术后3 d、7 d、3个月,Ⅰ组和Ⅲ组角膜透明度评分差异均有统计学意义(P=0.000、0.000、0.022);术后7 d,Ⅰ组和Ⅱ组角膜透明度评分差异有统计学意义(P=0.037)。术后三组角膜CNV评分随时间延长逐渐升高,至术后15 d达最高,后逐渐降低(P1=0.001、P2=0.001、P3=0.000)。术后3 d、7 d、15 d,Ⅰ组和Ⅲ组CNV评分差异有统计学意义(P=0.041、0.000、0.024);术后7 d,Ⅰ组和Ⅱ组CNV评分差异有统计学意义(P=0.011)。组织学观察结果显示:Ⅰ组、Ⅱ组术后1个月移植材料几乎完全降解,角膜基质胶原排列趋于规则,Ⅲ组胶原纤维排列局部欠规则;术后6个月三组胶原纤维排列基本规则。免疫组织化学检测结果显示:术后6个月,三组角膜上皮细胞特异性标志蛋白K3阳性表达。术后6个月VEGF表达较术后15 d减少,Ⅲ组较Ⅰ组、Ⅱ组表达减少。结论胶原基复合角膜替代物能支持角膜上皮的生长,促进角膜�
- 李雪王海燕郝永娜赵少贞刘文广李亚楠边领斋粘红魏瑞华
- 关键词：角膜移植伤口愈合
- 大鼠复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎眼部炎症和病理特征分析被引量：4
- 2013年
- 背景目前用于自身免疫性葡萄膜炎的实验研究动物模型多为单次发作性葡萄膜炎，与临床上自身免疫性葡萄膜炎患者反复发作导致的眼部严重组织形态学和功能学改变的自然病程并不完全相符。建立复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）模型对临床研究具有重要意义。目的建立大鼠复发性EAU动物模型，动态观察眼部炎症和病理特点，并分析其眼部白细胞介素-17（IL-17）的表达。方法采用光感受器间维生素A类结合蛋白1177—1191多肽片段（IRBP1177—1191，R16）注射于9只SPF级Lewis大鼠皮下进行免疫，10d后分离淋巴结及脾脏T细胞，体外R16刺激下培养2d。将24只SPF级Lewis大鼠按随机数字表法分为正常组和造模后1、2、3个月组，每组6只。将制备的T细胞悬液通过尾静脉注射法注入模型组大鼠体内，建立复发性EAU模型。注射后每天在裂隙灯显微镜下观察大鼠眼部炎症表现，依据Caspi炎症反应分级标准进行评分。分别于造模后1、2、3个月处死动物后制备视网膜切片，并行苏木精-伊红染色，观察视网膜组织中炎性细胞浸润情况和视网膜厚度的改变；采用免疫组织化学法检测IL-17A在各组大鼠视网膜中的表达，并计算阳性表达的评分。结果R16特异性T细胞注射后第4天大鼠前房出现不同程度的混浊，炎症评分为2分。第6天前房重度混浊，评为3分；至第10天大鼠眼前节恢复正常，但造模后2个月内炎症复发4—5次，且大鼠一侧眼发病而对侧眼可正常，与人自身免疫性葡萄膜炎的自然病程极为相似。视网膜组织病理学检查发现，造模后1、2、3个月组随着注射时间的延长，炎性细胞浸润逐渐减少。与正常组大鼠比较，造模后1、2、3个月组大鼠视网膜全层、外核层及内核层逐渐变薄，4个组间的总体比较差异均有统计学意义（F=20．46、288．40、4．43，均P=0．00）；正常
- 郑慧张晓敏粘红张灵君刘勋Hui Shao李筱荣
- 关键词：葡萄膜炎免疫动物模型
- 苦瓜多糖对Th1和Th2细胞亚群的免疫调节及其降糖作用研究
- 采用腹腔注射STZ200mg/kg体重的方法制备糖尿病小鼠模型,然后用浓度为200mg/kg、300mg/kg的MCP和200mg/kg的苦瓜多糖对模型小鼠进行灌胃处理,两周后,血糖水平比处理前分别降低了50.23%(P...
- 崔旻安利国尹苗粘红袁金铎
- 关键词：多糖IFN-ΓIL-4
- 文献传递
- 间充质干细胞对兔自身免疫性干眼模型病理改变及细胞因子表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的建立兔自身免疫性干眼模型,观察间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)治疗后兔自身免疫性干眼的组织病理学变化及泪腺组织中细胞因子表达的变化。方法取健康成年雌性新西兰白兔24只24眼,采用随机数学表法将兔分为正常对照组、干眼模型组和MSCs治疗组,每组各8只8眼。MSCs治疗6周后,观察兔眼组织病理学改变,实时荧光定量PCR检测泪腺组织中Th1、Th17细胞分化相关细胞因子mRNA相对表达量。流式细胞仪检测干眼模型组和MSCs治疗组兔泪腺组织和脾脏组织中调节性T细胞(CD4+Foxp3+细胞)占淋巴细胞的比例。结果 MSCs治疗6周后,取各组兔泪腺并行HE染色显示:正常对照组未见或仅见少量淋巴细胞浸润;干眼模型组泪腺内部分腺体细胞出现萎缩,腺管周围和小血管周围可见散在分布的淋巴细胞汇集区;与干眼模型组相比,MSCs治疗组泪腺内淋巴细胞浸润减轻,腺泡细胞形态较好。与干眼模型组比较,MSCs治疗组结膜组织中淋巴细胞浸润聚集显著减轻,上皮结构完整,变性和萎缩细胞较少见。MSCs治疗组泪腺组织中Th1特征性细胞因子IFN-γ以及转录因子T-bet mRNA表达水平较干眼模型组明显下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);Th17细胞分化相关细胞因子IL-17表达水平有下降趋势,但两组差异无统计学意义(P>0.05);其转录因子RORrt mRNA的表达水平较干眼模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。MSCs治疗组泪腺组织中炎症因子TNF-α表达较干眼模型组显著降低,而抑炎因子TGF-β的表达较干眼模型组显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。泪腺组织中干眼模型组调节性T细胞(CD4+Foxp3+细胞)占淋巴细胞的比例为10.0%,而MSCs治疗组中调节性T细胞占淋巴细胞的比例为27.8%,MSCs治疗组调节性T细胞较干眼模型组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MSCs可以减轻自身免疫性干眼的组织病理学�
- 王希莲路晓晓杨丽媛粘红杨丹魏瑞华
- 关键词：间充质干细胞细胞因子
- 停戴角膜塑形镜期间角膜前表面形态恢复情况观察被引量：4
- 2017年
- 目的观察不同屈光度患者配戴角膜塑形镜2 a后停戴不同时间角膜前表面形态的恢复情况。方法收集2012年10月至2014年10月在天津医科大学眼科医院近视防控门诊就诊且配戴角膜塑形镜2 a的8~14岁近视患者60例(60只右眼)进行自身对照研究。根据近视度数分为A组(等效球镜度数≤-2.00 D)、B组(等效球镜度数为>-2.00^-4.00 D)、C组(等效球镜度数为>-4.00^-6.00 D),分别在停戴角膜塑形镜1周、2周、1个月观察患者角膜前表面形态,包括平K值(FK值)、陡K值(SK值)和平均K值的恢复情况,同时观察眼轴长度以及中央角膜厚度的变化。结果A组角膜FK值、SK值、平均K值在停戴2周后与戴镜前相比差异均无统计学意义(均为P>0.05);B组角膜FK值、SK值、平均K值在停戴1个月后基本恢复至戴镜前水平;C组停戴1个月后FK值、SK值、平均K值与戴镜前相比,差异仍均有统计学意义(均为P<0.05)。3组中央角膜厚度在停戴2周后与戴镜前相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。B组与C组的眼轴长度,停戴2周与停戴1周相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);3组停戴1个月与停戴2周相比差异均无统计学意义(均为P>0.05);停戴1个月后,A组、B组、C组眼轴长度较戴镜前分别增长了(0.43±0.36)mm、(0.35±0.21)mm和(0.36±0.29)mm。结论不同屈光度停戴后角膜参数恢复到戴镜前水平所需时间不同;短时间停戴未见眼轴长度明显增长。
- 周佳林伟平刘桂华李颖厉娜粘红魏瑞华
- 关键词：角膜塑形镜角膜曲率角膜厚度眼轴长度
- 间充质干细胞对自身免疫性干眼的免疫调控作用研究进展被引量：1
- 2017年
- 间充质干细胞(mesonchymal stem cells,MSCs)具有良好的免疫调节功能,可以抑制多种免疫细胞群增殖,直接作用抑制T淋巴细胞的活化增殖,上调Treg细胞或通过分泌可溶性因子调节Th1/Th2反应平衡而发挥免疫调节作用,通过抗炎、调控各类性细胞因子的表达等方面抑制炎性因子的分泌同时促进抑炎因子分泌,降低基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9等可能促进泪腺组织损害因子的表达水平,进而发挥其免疫调节作用,MSCs能减轻自身免疫性干眼的临床指标,恢复部分泪腺组织的分泌功能,本文就MSCs对自身免疫性干眼免疫调控的研究进展进行综述。
- 王希莲路晓晓杨丽媛粘红魏瑞华
- 关键词：间充质干细胞免疫调节
- 肽聚糖对树突细胞分泌促炎性细胞因子以及实验性自身免疫性葡萄膜炎辅助性T细胞17的影响
- 2013年
- 目的观察肽聚糖（PGN）对树突细胞（DCs）分泌促炎性细胞因子的影响以及对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）辅助性T细胞（Th）17（Thl7细胞）反应的调控。方法利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素（IL）-4（IL-4）定向诱导健康小鼠骨髓细胞向DCs分化。诱导分化的第6天将DCs分为对照组与实验组，实验组加入PGN干预，对照组加入等量无菌磷酸缓冲盐溶液，培养24h后利用实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术，检测2组培养细胞中Th17细胞分化相关的细胞因子IL-23、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-6、IL-18mRNA相对表达量。采用光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）1—20多肽片段（IRBP1—20）和弗氏不完全佐剂及结核分枝杆菌H37RA免疫C57BL／6小鼠。免疫后13d分离EAU模型鼠脾脏和淋巴结的IRBP1—20特异的T细胞与经PGN干预或未干预的DCs共培养。收集共培养后2d的细胞，实时荧光RT—PCR检测维甲酸相关孤儿受体7t（RORyt）、IL-17、T—bet、7干扰素（IFN-γ）mRNA相对表达量；此外，收集共培养后2、5、7d的细胞分别进行流式细胞仪分析，观察Th17、Th1细胞的变化。结果实时荧光RT—PCR检测结果显示，实验组DCs经PGN干预后IL-23、IL-1G、IL-6、TNF—αmRNA相对表达量较对照组显著升高，差异有统计学意义（t=-14．363、-5．627、-3．85、-28．151；P〈0．05）；实验组RORγt、IL-17mRNA相对表达量较对照组显著升高（t=-5．601、-19．76；P〈0．05），而Tbet、IFN7mRNA相对表达量较对照组显著降低（f-4．717、11．207；P〈0．05）。流式细胞仪检测结果显示，与对照组相比，实验组的DCs与T细胞共培养后2、5、7d，IL-17＋细胞的百分比升高（t=-2．944、-3．03、-4．81；P〈0．05），而IFN-γ细胞的比例变化不大（t=-1.25、-0．18、-2．16；P〉0．05）。结论PGN能够刺激DCs分泌IL-23、TNF—α、IL-6及I
- 肖青粘红魏瑞华张晓敏李雪刘勋李筱荣
- 关键词：肽聚糖葡萄膜炎TOLL样受体2
- 抗肝癌细胞噬菌体单链抗体库的构建及筛选被引量：3
- 2004年
- 构建抗人肝癌细胞单链抗体库 ,从中筛选与肝癌细胞特异结合的高亲和力单链抗体。从HepG2细胞免疫的BALB/c小鼠脾脏提取总RNA ,RT PCR扩增小鼠抗体重、轻链可变区基因 ,用 (Gly4Ser) 3 连接肽基因 ,经重叠延伸反应 ,在体外将VH 和VL 连接成单链抗体 (scFv)基因 ,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中 ,构建噬菌体单链抗体库。以HepG2细胞为抗原对抗体库进行淘选 ,ELISA法鉴定各单克隆与肝癌细胞的结合活性 ,并对阳性克隆进行表达。成功构建了库容为 1 1× 10 6抗肝癌细胞的噬菌体单链抗体库 ,经筛选得到了与HepG2细胞具有较强结合能力的单链抗体 ,实现了scFv在大肠杆菌中的可溶性表达。序列测定结果表明 ,VH 和VL 基因符合小鼠抗体可变区特征 。
- 粘红安利国赵岩陈吉中范国才王清明
- 关键词：肝癌细胞单链抗体SCFV噬菌体抗体库
- 人脐带间充质干细胞对兔自身免疫性干眼的疗效研究被引量：3
- 2017年
- 目的通过建立稳定的兔自身免疫性干眼模型,观察人脐带来源的间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对自身免疫性干眼的作用并初步探讨其机制。方法体外分离、培养hUC-MSCs并对其进行鉴定;采用静脉回输自体激活的淋巴细胞建立兔自身免疫性干眼模型,将兔分为正常对照组、干眼模型组和h UCMSCs治疗组,h UC-MSCs治疗组于回输淋巴细胞后输注1 mL 1×10~7个·mL^(-1)hUCMSCs,连续输注5 d,对照组输注等体积的PBS。三组分别在术后2周、4周、6周检测泪液分泌量、泪膜破裂时间和角膜荧光素钠染色,6周后行组织病理学观察,并检测泪腺组织中细胞因子的表达水平。结果术后2周、4周、6周h UC-MSCs治疗组较干眼模型组泪液分泌量、泪膜破裂时间显著升高(均为P<0.05);角膜荧光素钠染色着色显著减轻,组织病理学观察泪腺组织淋巴细胞浸润较干眼模型组显著减少。hUC-MSCs治疗组和干眼模型组相比,泪腺组织中炎性因子IFN-γ、IL-17表达显著降低(F=50.48、18.13;均为P<0.05),而抑炎因子IL-10、TGF-β的表达显著升高(F=31.06、21.40;均为P<0.05)。结论h UC-MSCs减轻兔自身免疫性干眼,对其发挥免疫调控作用。
- 王希莲杨丽媛粘红路晓晓李雪刘勋魏瑞华
- 关键词：间充质干细胞白细胞介素-10
