聂兴草
- 作品数：15 被引量：106H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用重组病毒株建立鼠巨细胞病毒性肝炎的实验模型被引量：8
- 2002年
- 用插入LacZ基因的重组病毒株建立BALB/c小鼠巨细胞病毒 (murinecytomegalovirus ,mCMV)性肝炎模型。20只BALB/c甲基强的松龙免疫抑制小鼠 ,腹腔接种1×106PFU病毒悬液 ,动态观察血单个核细胞和组织中mCMV感染及肝组织病理变化。结果 :①mCMV感染小鼠血单个核细胞中X -gal染色阳性细胞在48h时开始出现 ,第3天有所减少 ,在第6天达到高峰;②肝、肺、肾组织病毒感染72h后可见 ,在第12天斑点数最多 ,以肝组织病毒感染多见;③肝组织病变在病毒感染后96h开始出现 ,在第12天达到高峰。提示 :利用重组mCMV建立的mCMV性肝炎小鼠模型 ,在感染后2周仍保持较高感染水平 ,为CMV的研究提供了一个良好的实验模型。
- 刘志峰方峰董永绥李革聂兴草
- 关键词：鼠巨细胞病毒动物模型病毒性肝炎婴幼儿肝脏损害
- 大蒜新素抑制人巨细胞病毒即刻早期基因表达在抗人巨细胞病毒机制中的作用被引量：10
- 2006年
- 目的研究大蒜新素抑制人巨细胞病毒(HCMV)复制的作用环节和机制。方法采用时间依赖的药物添加和移除实验分析大蒜新素在HCMV病毒复制周期中的作用环节。用Southern blot检测大蒜新素处理后感染细胞中HCMV DNA负荷量变化。用Northern blot和Western blot检测大蒜新素对HCMV即刻早期(ie)基因转录和翻译的影响,并与相应浓度更昔洛韦(GCV)的作用效应作比较。结果时间依赖的药物添加和移除实验发现大蒜新素只有在HCMV感染复制周期的早期存在时才能发挥对病毒增殖的抑制作用。大蒜新素对ie 1 mRNA的抑制率达30．4％-46．6％。在感染后24 h 病毒表达IE蛋白的高峰期时,大蒜新素对IE72表达的抑制率为42．6％-64．9％,对IE86表达的抑制率为50．7%- 70．6％。到感染后72 h时(子代病毒表达IE蛋白的时期),大蒜新素对IE蛋白仍然有抑制作用,对IE72的抑制率为 36.4％-49．3％,对IE86的抑制作用更为明显,抑制率达77．9％-87．7％,接近于对IE72抑制率的2倍。而GCV对一个 HCMV复制周期内的ie 1 mRNA和IE蛋白表达均无抑制作用。Southern blot结果显示,在感染后72 h(HCMV完成一个复制周期的时间点),大蒜新素和GCV均能减少HCMV DNA负荷量,两药相当剂量的抑制效应比较,差异无统计学意义(P> 0．05)。结论大蒜新素抑制HCMV ie基因的转录和翻译,进而抑制病毒的复制增殖,是其抗HCMV的重要作用机制。
- 甄宏方峰舒赛男周玉峰董永绥聂兴草李革
- 关键词：大蒜新素更昔洛韦二烯丙基三硫化物巨细胞病毒即刻早期基因
- 巨细胞病毒嗜肝细胞性和肝细胞感染模型的建立被引量：3
- 2007年
- 目的确定巨细胞病毒(CMV)体外能否直接攻击肝细胞,并建立肝细胞感染模型。方法①人肝细胞系感染:用人CMV(HCMV)AD169毒株感染正常人肝细胞系(L-02)和人胚肺成纤维细胞(HELF)与L-02共培养细胞,HC-MV感染的HELF细胞为阳性对照;②原代鼠肝细胞(PML)感染:用重组鼠CMV(MCMV)感染PML细胞。光镜观察细胞病变(CPE),电镜观察病毒颗粒,间接免疫荧光(IFA)法检测HCMV抗原;原位杂交法检测MCMVIE基因。PML性质经观察其特征性超微结构和检测培养上清白蛋白水平予以鉴定。结果在PML细胞纯度>95%(培养第8天)时感染病毒,3d后>80%细胞出现典型CPE;电镜下胞核和胞质内见大量病毒颗粒;病毒IE基因检测呈阳性。HELF细胞可被HCMV感染;而L-02细胞无论是单独,还是与HELF共培养,其病毒标志物均呈阴性,细胞结构保持正常。结论原代鼠肝细胞体外可受到MCMV直接感染,为CMV肝炎的体外研究提供成功的肝细胞感染模型;而正常人肝细胞系不能感染HCMV,推测其表面HCMV受体发生改变或丢失。
- 聂兴草方峰李红董永绥甄宏李革
- 关键词：巨细胞病毒肝细胞细胞嗜性
- 人血清对大蒜新素细胞毒性及其抗人巨细胞病毒效应影响的实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨人血清干预对大蒜新素细胞毒性及其抗人巨细胞病毒 (HCMV)效应的影响。方法 将系列浓度大蒜新素与不同浓度血清共同作用于人胚肺成纤维细胞 ,观察细胞增殖活力 (MTT法 )、细胞形态和超微结构及HCMV蚀斑抑制率的改变。结果 ①不加血清时 ,细胞对大蒜新素最大耐受浓度 (MTC)为 9 6 μg/ml;加入 2 0 %灭活血清后 ,MTC增至 2 1μg/ml。②血清干预前 ,2 1μg/ml大蒜新素使 6 0 %细胞坏死 ,胞质与胞核疏松混浊、呈筛状 ,内质网、线粒体弥漫性肿胀空泡变明显 ,异染色质减少 ;血清干预后 ,细胞形态与超微结构均明显改善 ,尤其在干预后 4 8h ,细胞超微结构与正常细胞相似。③ 2 0 %血清干预提高细胞对大蒜新素的最大耐受浓度 ,后者对HCMV抑制率由干预前的 6 5 92 %提高至 82 98%。结论 2 0 %血清干预可明显改善大蒜新素的细胞毒性、保护细胞超微结构 ;增加大蒜新素用量 ,进而提高其抗HCMV效应。
- 罗丹方峰甄宏刘志峰李革聂兴草崔雯
- 关键词：大蒜新素人巨细胞病毒细胞毒性超微结构细胞形态学
- 大蒜新素对巨细胞病毒感染细胞周期蛋白基因表达谱的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 探讨人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus,HCMV)对感染细胞周期蛋白基因表达谱的影响及大蒜新素的干预效应。方法 利用基因芯片技术对比分析大剂量大蒜新素处理正常细胞和感染细胞 (MOI=2 .5 ) 72h以及同期培养的感染和正常细胞周期相关蛋白基因 (2 39条 )表达谱的变化。结果 感染细胞有 2 4条 (10 .0 4 % )基因发生有意义的差异性表达 ;其中 9条表达增加 ,15条表达降低。大蒜新素对 11条HCMV感染所致表达改变的基因无影响 ;使HCMV感染下调作用消除的基因有 11条 ;使HCMV感染上调作用消除的基因有 2条。另外 ,药物对感染细胞和正常细胞基因表达均有影响的有 2条 ;仅引起正常细胞基因表达改变的有 3条。结论 HCMV感染使部分细胞周期相关蛋白基因差异性表达可能是HCMV导致宿主细胞周期紊乱的原因之一。大蒜新素至少可使HCMV所致 13条基因差异性表达作用消除 ,提示药物干预了病毒对细胞周期的影响。
- 聂兴草方峰董永绥刘志峰甄宏李革
- 关键词：大蒜新素巨细胞病毒感染表达谱基因芯片
- Caspase与病毒感染关系研究进展
- 2001年
- Caspase(cysteinyl aspartate specific proteinase)是一类特异性裂解天门冬氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶大家族,它是各种生理和病理的刺激下引起细胞凋亡进入终末途径的始动子和执行者.本文就Caspase的生物学特性以及与病毒感染的关系作一综述.
- 聂兴草方峰董永绥
- 关键词：CASPASE半胱氨酸蛋白酶生物学特性病毒感染
- 大蒜新素对HCMV主要即刻早期抗原IE72和IE86在人胚肺成纤维细胞中表达的影响被引量：11
- 2005年
- 目的 :研究大蒜新素对人巨细胞病毒 (HCMV)即刻早期抗原 (IEAs)在人胚肺成纤维细胞中表达的影响。方法 :建立HCMVAD16 9毒株 (MOI为 2.5和 0.2 5 )感染细胞模型和大蒜新素 (IC50 和MTC浓度 )干预模型。用WesternBlot检测药物处理后感染细胞中HCMV主要IEAs(IE72和IE86 )表达强度变化 ,并与相应浓度更昔洛韦(GCV)的作用效应相比较。结果 :在高MOI和低MOI感染时 ,不同浓度大蒜新素均能使HCMVIE72和IE86表达强度明显下降 ,对IE86表达的抑制率为IE72的 2倍左右。与GCV相比 ,大蒜新素对IE72的抑制率低于GCV ,而对IE86的抑制效应高于GCV。结论 :大蒜新素明显抑制HCMVIE72和IE86表达 ,对IE86的抑制尤为显著 。
- 甄宏方峰刘志峰聂兴草崔雯李革
- 关键词：大蒜新素HCMV人胚肺成纤维细胞GCVIEA干预模型
- 多重聚合酶链反应系统快速诊断结核和其他细菌感染被引量：5
- 2005年
- 目的探讨多重聚合酶链反应(PCR)系统用于诊断细菌感染,并区分结核和其他细菌感染。方法多重PCR系统检测129份临床样本包括脑脊液108份、胸水10份、腹水11份,与培养结果比较,分别评估该系统检测普通细菌和结核杆菌敏感性和特异性。结果本系统检测临床样本中普通细菌和结核杆菌的敏感性均达100%,特异性分别为86%和81%。结论多重PCR系统可成功地用于临床快速诊断细菌感染,并有效区分结核和其他细菌感染。
- 向稚丹方峰陈如聂兴草董永绥李革
- 关键词：多重聚合酶链反应细菌结核杆菌
- 大蒜新素抗巨细胞病毒活性及其机制研究
- 方峰甄宏刘志峰舒赛男聂兴草崔雯罗丹李红董永绥李革
- 人巨细胞病毒(HCMV)属疱疹病毒β亚科，其感染在世界范围内普遍存在。随着近年来艾滋病人和器官移植病人的剧增，HCMV感染的危害更加显现。一直以来，对HCMV感染的治疗研究进展缓慢，如临床首选药物更昔洛韦(gancicl...
- 关键词：
- 关键词：大蒜新素巨细胞病毒病毒活性
- 大蒜新素对人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞凋亡的影响被引量：5
- 2004年
- 目的研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fasmRNA表达的影响。方法用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2.5、0.25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96h凋亡细胞比率;大、中、小剂量大蒜新素(9、6和3μg/mL)处理正常的和感染的HELF细胞(MOI为2.5)后上述各时间点凋亡细胞比率。用原位杂交法检测大剂量大蒜新素处理感染细胞(MIO为0.25)72h后bcl-2和fasmRNA表达强度变化,并与正常细胞和感染细胞对比分析。结果正常细胞凋亡比率保持恒定低水平(凋亡率平均2.68%);低、高感染复数感染细胞随时间延长凋亡细胞逐渐增多,凋亡率峰值分别达8.85%(96h)和25.63%(72h);各剂量大蒜新素处理的正常细胞凋亡率增加,呈剂量依赖性,峰值分别为4.88%、6.47%和8.35%;但各剂量药物处理感染细胞后却使细胞凋亡比率下降,大剂量药物处理72h时效应最为明显,凋亡细胞比率由25.63%降至16.24%。正常细胞高表达bcl-2,低表达fas基因;感染HCMV后,bcl-2表达显著下调,fas表达明显增强;大蒜新素处理感染细胞后使bcl-2表达强度明显高于感染细胞,fas表达水平明显低于感染细胞,但仍未恢复到正常细胞水平。结论HCMV是HELF凋亡的强诱导剂;
- 聂兴草方峰李红董永绥甄宏刘志峰李革
- 关键词：大蒜新素凋亡调控基因人巨细胞病毒人胚肺成纤维细胞
