[目的]探索miR-199b-5p在糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化中的作用机制。[方法]选择92只雄性大鼠,随机分为空白对照组、DN组、慢病毒对照组、miR-199b-5p敲低组,造模结束后第12 w处死大鼠。对比上述4组大鼠在肾组织病理学、肾功能指标,Klotho、Wnt、β-catenin等相关蛋白表达差异。[结果] DN组、慢病毒对照组的miR-199b-5p表达高于空白对照组和miR-199b-5p敲低组,miR-199b-5p敲低组高于空白对照组(1.08±0.24、3.27±0.12、3.22±0.53、1.62±0.15;P<0.05);DN组、慢病毒对照组的Scr、BUN、β-catenin、α-SMA、MMP-7均显著高于空白对照组和miR-199b-5p敲低组,miR-199b-5p敲低组高于空白对照组(78.66±2.12 vs 61.14±3.78;14.04±1.09 vs 9.26±1.73;32.33±2.57 vs 27.23±1.78;0.97±0.02 vs 0.34±0.35;3.49±0.28 vs 1.43±0.23;P<0.05);而DN组、慢病毒对照组的Klotho明显低于空白对照组和miR-199b-5p敲低组,miR-199b-5p敲低组低于空白对照组(23.18±3.12 vs 31.99±3.09;P<0.05)。[结论]降低miR-199b-5p表达可以上调糖尿病肾纤维化Klotho表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路从而让α-SMA和MMP-7表达下降,进而延缓肾脏纤维化,改善肾功能指标,因此该通路可能是临床上治疗糖尿病肾纤维化的新靶点。
[目的]探究二苯乙烯苷(TSG)调控Klotho蛋白对慢性肾脏病(CKD)小鼠肾纤维化的影响。[方法] 30只C57BL/6J小鼠随机分为对照组(Control)、模型组(CKD)、模型+二苯乙烯苷处理组(CKD+T),取肾组织检测各组小鼠肾功能[24 h尿蛋白(UP)、24 h尿白蛋白(UA),血肌酐(SCr),尿素氮(BUN)]、氧化应激指标[肾超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),尿8-羟基脱氧鸟苷(8-ohdg)],RT-PCR检测Klotho mRNA表达,Western Blot检测肾组织纤维化相关因子[中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL),纤连蛋白(FN),结缔组织生长因子(CTGF)]及Klotho蛋白表达。[结果]与Control组相比,CKD组、CKD+T组的24 h UP、24 h UA、ACR、SCr、BUN、尿8-ohdg、肾MDA、NGAL、FN、CTGF蛋白表达水平均升高,肾SOD、Klotho mRNA及蛋白表达水平降低,且CKD+T组的24 h UP、24 h UA、ACR、SCr、BUN、肾MDA、尿8-ohdg含量、肾小管损伤评分、胶原纤维阳性面积(14.1±2.7 vs 6.4±1.5)%、NGAL、FN、CTGF蛋白表达水平低于CKD组,肾SOD、Klotho mRNA及蛋白表达量(1.21±0.23 vs 1.46±0.29,1.18±0.16 vs 1.37±0.21)高于CKD组(P<0.05)。[结论] TSG可改善CKD小鼠肾功能,抑制氧化应激反应和延缓肾纤维化进程,可能是通过上调Klotho蛋白表达来起作用的。
