董杰德
- 作品数：31 被引量：294H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人乳头瘤病毒16型完整E6开放读码框的基因克隆和鉴定被引量：3
- 1997年
- 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）基因组中扩增得到５５５ｂｐ的Ｅ６ＤＮＡ片段，并重组到载体ｐＧＥＭＥＸＴＭ－１中，构建克隆扩增质粒ｐ１６Ｅ６－Ｇ，将此重组质粒转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经菌落原位杂交鉴定和限制性酶切图谱分析，证实该产物为Ｅ６基因完整开放读码框（ＯＲＦ），从而为获得Ｅ６ＯＲＦ基因片段提供了一个高效。
- 栾怡于修平赵蔚明董杰德周亚滨卞继峰
- 关键词：乳头瘤病毒质粒基因克隆
- 用原位杂交技术检测人子宫颈癌组织中HPV16E_6转化基因的研究
- 1997年
- 应用地高辛非放射性标记与检测系统制备人乳头瘤病毒１６型Ｅ６（ＨＰＶ１６Ｅ６）转化基因ＤＮＡ探针，经用斑点杂交检测，探针特异性强，灵敏度达０．１ｐｇ，应用组织切片原位杂交技术检测了４４例子宫颈癌组织。结果表明，ＨＰＶ１６Ｅ６阳性２７例、占６１．３６％，５例正常对照子宫颈组织中未检出。提示ＨＰＶ１６Ｅ６转化基因与子宫颈癌密切相关，为阐明子宫颈癌的病因和ＨＰＶ１６Ｅ６在诊治子宫颈癌中的作用提供了理论依据。
- 卞继峰于修平董杰德赵蔚明周亚滨栾怡
- 关键词：子宫颈肿瘤乳头状瘤病毒基因原位杂交
- 人乳头瘤病毒16型晚期蛋白质基因L_1的克隆及表达被引量：1
- 1992年
- 人乳头瘤病毒16型(HPV16)含有两个晚期开放读码框(L_1ORF和L_2ORF),L_1ORF编码主要衣壳蛋白,我们用质粒pHPV16、p16L_2BX_5和pATH,采用基因重组技术,制备了含有HPV16个长L_1ORF序列的基因克隆p16L_1BN(5071—253),它能在大肠杆菌中有效表达,产生分子量约90KD的含有E. coli trpE的融合蛋白。Western blot检测,该蛋白可被抗牛乳头瘤病毒的抗体识别,这说明克隆p16L_1BN能有效表达,基因产物具有乳头瘤病毒型的共同抗原的性质。
- 于修平赵蔚明董杰德赵立新陈晨华StevenA.Jenison
- 关键词：基因克隆基因表达人乳头瘤病毒
- 铬对鼠心肌细胞生长及对病毒感染性影响的实验研究被引量：4
- 1990年
- 本文研究了三氯化铬(CrCl_3)对新生大白鼠心肌细胞生长及自发性收缩搏动的影响,以及观察了铬对鼠心肌细胞感染 Coxsackie B_2病毒(COXB_2V)的影响。实验结果表明:铬能促进鼠心肌细胞生长及自发性收缩搏动,能降低鼠心肌细胞对病毒感染的敏感性。同时也发现了用含铬培养液培养的鼠心肌细胞组细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量高于对照组。
- 张爱萍董杰德
- 关键词：铬心肌细胞病毒感染性
- PCR检测在尖锐湿疣诊断中的综合评价
- 1997年
- 对７０例外阴病变的病例进行严格质控的ＰＣＲ检测，并结合病史、组织病理改变及ＨＰＶ核壳抗原免疫组化检测进行综合分析。结果表明，４０例具有ＣＡ组织病理特征的病例中，３７例ＨＰＶ６／１１ＤＮＡＰＣＲ检测阳性，３０例原病理诊断为鳞状上皮乳头状增生或假性湿疣的病例中，有７例检出ＨＰＶＤＮＡ。综合分析的结果提示，对于有典型ＣＡ组织学特征者，结合临床，即使不做ＰＣＲ检则也可做出正确诊断。ＰＣＲ检测的意义在于为无典型ＣＡ组织学特征的病例增加一有价值的诊断依据，而不能仅根据ＰＣＲ结果武断地做出结论。
- 赵蔚明于修平王美清张庆慧周亚滨董杰德
- 关键词：尖锐湿疣PCR
- HPV58 E6基因的克隆及体外表达被引量：2
- 2001年
- 目的 :克隆并体外表达HPV5 8E6,为E6致癌作用和疫苗的研究奠定基础。方法 :通过PCR方法从HPV5 8全基因克隆中扩增出HPV5 8E6基因片段 ,利用基因重组技术 ,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3的T7启动子下游 ,体外转录成mRNA后 ,在源自网织红细胞的翻译缓冲液中表达生物素标记的HPV5 8E6蛋白 ,化学发光法检测 ,X光胶片曝光显影鉴定。结果 :酶切电泳证实质粒构建正确 ,SDS PAGE电泳显示在相当于HPV5 8E6分子量约 18.8kD的位置出现条带 ,X光胶片亦在相应位置出现印迹条带。结论 :成功表达了含有生物素标记的HPV5 8E6蛋白 。
- 杨海宁于修平卞继峰赵蔚明董杰德贾继辉周亚滨刘颖栾怡齐眉
- 关键词：乳头状瘤病毒分子克隆基因表达基因克隆
- 四种中草药抗柯萨奇及埃柯病毒的实验研究被引量：139
- 1993年
- 在培养的细胞上研究探讨了四种中草药(贯众、虎杖、金银花、连翘)对病毒性心肌炎及其抗病毒作用的机制。实验结果证明:四种中草药细胞外抑制 COX β_3V 及 ECHO19V 的作用很明显(P<0.05)。为治疗病毒性心肌病及其它病毒性疾病提供了用药依据。
- 董杰德陈晨华仇素英于修平赵蔚明
- 关键词：贯众虎杖金银花连翘抗病毒作用
- 子宫颈鳞癌 Rb 基因与 HPV16 E7 基因的相关性研究被引量：1
- 1997年
- 用多聚酶链反应—单链构象多态性分析（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）以及地高辛标记探针斑点杂交技术对３０例子宫颈鳞癌组织中Ｒｂ抑癌基因及ＨＰＶ１６Ｅ７癌基因进行分析。结果３０例子宫颈鳞癌组织中未检出Ｒｂ基因突变或缺失；２０例癌组织中检出ＨＰＶ１６Ｅ７ＤＮＡ，阳性率为６７％。提示ＨＰＶ１６Ｅ７癌基因与子宫颈鳞癌密切相关。子宫颈鳞癌中Ｒｂ基因结构异常并不常见，而且与ＨＰＶ１６Ｅ７基因的存在状况无明显相关性。
- 赵蔚明于修平周亚滨周亚滨董杰德司静懿董杰德阎世坤
- 关键词：子宫颈肿瘤致癌基因
- 人乳头瘤病毒18型L2表位的定位
- 1995年
- 人乳头瘤病毒１８型（ＨＰＶ１８）的晚期开放读码框架２（Ｌ２ＯＲＦ）编码的蛋白具有型特异性。质粒ｐ１８Ｌ２００１含有ＨＰＶ１８Ｌ２ＯＲＦ的全序列，经诱导表达产生的融合蛋白能与ＨＰＶ１８感染的患者血清呈阳性免疫反应。采用Ｈｅｎｉｋｏｆｆ改良的单方向缺失核酸链方法，制备了一组从３＇端至５＇端逐步缩小目的ＤＮＡ分子量的质粒，然后表达一系列从Ｃ端至Ｎ端逐步缩小的融合蛋白。用这一系列融合蛋白与相应血清作Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验，最小的阳性反应的蛋白含有抗原表位。分析实验结果，编码表位的核酸序列位于４６６１至４７６９之间。
- 于修平赵蔚明戴景宜周亚滨董杰德苏汀
- 关键词：乳头状瘤病毒抗原人乳头瘤病毒
- 人乳头瘤病毒HPV16L1-E7C重组腺病毒载体的构建被引量：1
- 1999年
- 采用ＰＣＲ方法，从ＨＰＶ１６型野毒株质粒中分离出ＨＰＶ１６Ｌ１（５５５９７１５１ｂｐ）、ＨＰＶ１６Ｅ７Ｃ（６８２８５５ｂｐ）基因片段，采用ＰＣＲ产物的ＴＡ克隆法，将Ｌ１、Ｅ７Ｃ分别插入ｐＧＥＭＴＥａｓｙ载体，构建克隆载体ｐＴＡＬ１、ｐＴＡＥ７Ｃ。ＢａｍＨⅠ、ＨｉｎｄⅢ酶切ｐＴＡＥ７Ｃ，Ｂｇ１Ⅱ、ＣｌａⅠ酶切ｐＴＡＬ１，回收Ｌ１、Ｅ７Ｃ片段，利用ＢａｍＨⅠ、Ｂｇ１Ⅱ酶切产生相同粘末端的特点，产生Ｌ１Ｅ７Ｃ重组基因片段，将其克隆入质粒ｐＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔｓｋ，构建了ｐＢＳＬ１Ｅ７Ｃ重组克隆质粒，ＨｉｎｄⅢ、ＸｈｏⅠ酶切ｐＢＳＬ１Ｅ７Ｃ，释放Ｌ１Ｅ７Ｃ基因片段，定向重组入ｐＣＡ１４腺病毒载体，成功构建真核表达载体ＨＰＶ１６Ｌ１Ｅ７Ｃ重组腺病毒载体：ｐＣＡ１４Ｌ１Ｅ７Ｃ。
- 王芸于修平卞继锋赵蔚明董杰德贾继辉周亚滨栾怡齐眉陈华波
- 关键词：乳头瘤病毒E7基因L1基因腺病毒载体
