蔡峰
- 作品数：8 被引量：13H指数：3
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科技资源平台项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学自然科学总论生物学医药卫生更多>>
- 麻疯树种仁毒蛋白的分离纯化方法
- 本发明公开的麻疯树种仁毒蛋白的分离纯化方法，是将制备的Curcin粗提液先进行脱盐及缓冲液交换并收集上样后第一个280nm吸收峰的组分，然后将收集的组分进行阴离子交换层析并收集上样后穿透组分，再后将收集的穿透组分用缓冲液...
- 徐莺蔡峰陈放
- 文献传递
- 转麻疯树甜菜碱醛脱氢酶基因提高烟草耐盐性被引量：3
- 2008年
- 【目的】研究麻疯树甜菜碱醛脱氢酶(JcBD1)的功能。【方法】通过RT-PCR和RACE的方法从麻疯树中克隆甜菜碱醛脱氢酶基因(JcBD1)的全长cDNA序列。将从麻疯树中克隆的JcBD1 cDNA与CaMV 35S组成型启动子融合,构建植物表达载体pBI-JB,利用根癌农杆菌介导转入烟草。对获得抗性的植株用PCR、RT-PCR及Western杂交检测分析,同时测定转基因烟草植株的电导率、JcBD1酶活性及抗盐性等特性。【结果】由JcBD1 cDNA序列推测的JcBD1氨基酸序列与已知的BADH具有很高的同源性,包括BADH家族绝对保守区域十肽"VSMELGGKSP"和半胱氨酸残基。这两部分区域在甜菜碱醛脱氢酶底物特异性结合过程中起着重要作用,与酶的催化活性有关。PCR及RT-PCR检测证明外源JcBD1已整合到烟草基因组中并成功表达,转化率为56.7%。转基因植株的电导率明显低于未转基因植株。盐胁迫处理后,在转基因植株的蛋白提取样中能检测到Western杂交信号,而在未转基因植株中没有检测到杂交信号;转基因植株的蛋白提取样中能检测到甜菜碱醛脱氢酶活性,而对照没有活性,表明JcBD1在转基因植株中得到了表达。转JcBD1烟草在盐胁迫下,生长势明显强于未转基因植株。【结论】JcBD1能在异源植物中正常翻译、表达;JcBD1是盐害胁迫相关的重要基因。
- 张富丽蔡峰吴军陈放王云霄赵小光高顺
- 关键词：麻疯树甜菜碱醛脱氢酶烟草转基因耐盐性
- 麻疯树叶中过氧化物酶JCP-1的分离纯化和几种特性的检测
- 2010年
- 麻疯树叶片蛋白粗提液经硫酸铵分级沉淀,强阴离子琼脂糖、强阳离子琼脂糖和交联葡聚糖层析,得到一个比活为4499U·mg-1(蛋白)过氧化物酶,命名为JCP-1。其分子量为49kDa,等电点为pH3.3,最适pH为5.0￣6.0。以H2O2为底物的Km为2.14mmol·L-1。JCP-1具有宽泛的最适保存pH(7.0￣11.0)和较高的耐热性(80℃高温处理15min,活性保持在90%以上)。30%PEG6000处理模拟干旱胁迫及50℃高温胁迫麻疯树苗,其叶片中JCP-1活性分别提高121%和155%。
- 叶生亮蔡峰朱勋路秦晓波徐莺陈放
- 关键词：麻疯树过氧化物酶纯化酶学性质抗逆性
- 麻疯树核糖体失活蛋白curcin基因的原核表达及其抗真菌活性的研究被引量：1
- 2009年
- 通过PCR方法,将麻疯树核糖体失活蛋白curcin的开放阅读框片段从麻疯树总DNA中扩增出来.并将该克隆基因片段连接到原核表达载体pQE-30中,成功构建了重组质粒pQE-C,转化大肠杆菌M15菌株.经IPTG诱导后,curcin重组蛋白在大肠杆菌中成功表达.然后通过纯化原核表达产物,得到纯化的curcin重组蛋白,并以纸片法进行体外抗菌活性检测,发现其具有较强抗真菌活性.
- 邵彩霞秦小波蔡峰辜小平闫毅武王成世徐莺陈放Cai-XiaXiao-BoXiao-PingYi-WuCheng-Shi
- 关键词：CURCIN抗真菌活性JATROPHAFRAGMENTS开放阅读框VITRO
- 金沙江干热河谷地区麻疯树单粒种子核糖体失活蛋白含量及其与种子性状的相关性被引量：2
- 2012年
- 对金沙江干热河谷地区麻疯树(Jatropha curcas L.)种子中具有抗肿瘤活性的核糖体失活蛋白curcin含量及其生物学性状进行研究。结果表明,用酶联免疫吸附法测定麻疯树单颗种子的curcin含量为0.275～3.183 mg g-1,平均(1.369±0.055)mg g-1。Pearson相关性分析表明:单粒麻疯树种子的curcin含量与种子其他性状的相关性均未达显著水平,但与种子质量、种仁质量及含油量存在一定程度的负相关,而与出仁率和可溶性蛋白含量存在一定的正相关,且与可溶性蛋白含量的正相关系数(0.190)和与含油率的负相关系数(–0.177)较高。这表明可在金沙江干热河谷地区开展高curcin含量麻疯树种质资源收集和选育工作,以及培育高含油量、高curcin含量的双高品种,以提高麻疯树生物燃油产业的综合效益。
- 谢瑜蔡峰邵子静吉柔风赵欣平徐莺陈放
- 关键词：麻疯树核糖体失活蛋白CURCIN金沙江干热河谷
- 酶联免疫吸附法测定麻疯树核糖体失活蛋白被引量：5
- 2011年
- 建立了一种检测麻疯树核糖体失活蛋白(Curcin)的简便、快速的酶联免疫吸附测定法(ELISA).ELISA条件优化试验结果显示:最佳条件为costar酶标板在紫外线下照射45 min后进行包被;抗原最适稀释度为1:640倍(2.5μg/mL);curcin抗血清最适稀释度为1:12 800倍;2%封闭用山羊血清封闭120 min;二抗最适稀释度为1:5 000倍.在此试验条件下检测curcin含量,得到回归方程y=31.722x+106.88,相关系数R2=0.993 3.Curcin浓度在0.08～11μg/mL之间,曲线呈良好的线性关系.本方法的最低检测限为0.08μg/mL.高、中、低3个浓度的添加回收率分别为95.56%、102.27%、98.40%,平均回收率为98.74%.板内和板间的平均变异系数分别为4.78%和6.71%.Curcin抗血清与2种大戟科同类蛋白均无交叉反应.利用本方法成功检测了麻疯树种仁及脱毒饼粕中的curcin含量.
- 辜小苹蔡峰朱习红谢瑜徐莺陈放
- 关键词：麻疯树种仁抗血清酶联免疫吸附法
- 快速准确监测奶牛体细胞数的方法被引量：4
- 2006年
- 实验通过荧光染色的方法,运用荧光显微术对3个取样点总计39头奶牛的体细胞在不同时间计数,表明吖啶橙染色是一种快速、准确的监测奶牛体细胞数的方法,同时还表明不同的饲养条件及管理会造成牛群健康状况的显著差异,并依据实验结果对改善牛群的健康状况提出了建议。
- 刘苏萌张述超蔡峰徐君岳碧松邹方东
- 关键词：奶牛乳房炎荧光染色
- 麻疯树种仁毒蛋白的分离纯化方法
- 本发明公开的麻疯树种仁毒蛋白的分离纯化方法，是将制备的Curcin粗提液先进行脱盐及缓冲液交换并收集上样后第一个280nm吸收峰的组分，然后将收集的组分进行阴离子交换层析并收集上样后穿透组分，再后将收集的穿透组分用缓冲液...
- 徐莺蔡峰陈放
