贾宇
- 作品数：10 被引量：25H指数：3
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨HL-60白血病细胞中核干细胞因子Nucleostemin(NS)表达下调对其非依赖P53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR中相关蛋白表达是否有影响。方法:采用重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至P53缺失型HL-60细胞中干扰NS的表达。用Western blot技术评价转染后HL-60细胞NS蛋白的表达水平并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关蛋白水平的表达变化。结果:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见到GFP荧光表达较强(<80%)。Western blot结果显示,NS蛋白表达明显下调,干扰表达有效;干扰HL-60细胞中NS的表达后AKT、p-AKT、p70s6k、p-p70s6k蛋白变化不明显(t_1=2.31,P=0.074;t_2=3.62,P=0.069;t_3=1.60,P=0.251;t_4=2.72,P=0.113),而mTOR复合物中的GβL蛋白表达明显下调(t=15.01,P=0.002)。结论:HL-60细胞中NS蛋白可影响mTOR复合物中GβL蛋白的表达,PI3K/AKT/mTOR通路可能为NS非依赖P53作用途径之一。
- 贾宇魏园玉李曌博张帆刘帅岳保红
- 关键词：核干细胞因子HL-60细胞
- 抑制p53缺失和突变型白血病细胞PPP2R5A表达后细胞生物学变化
- 2012年
- 目的探讨在p53缺失和突变型白血病细胞内PPP2R5A表达量的下降与细胞生物学变化之间的关系,为寻找核干细胞因子(NS)的非p53依赖性信号转导通路提供依据。方法利用脂质体转染技术将针对PPP2R5A的siRNA转染到p53缺失或突变型的白血病细胞HL-60、THP-1和Raji细胞内,沉默PPP2R5A基因。RT-PCR法和免疫细胞化学法检测siRNA的转染效果并找出最佳转染浓度和时间。倒置显微镜观察转染组和对照组细胞的生长状态并绘制细胞生长曲线。瑞-吉染色观察转染组和对照组细胞的胞核、染色质及形态改变。流式细胞术AnnexinV/PI双染法进行细胞凋亡分析,PIDNA染色法进行细胞周期测定。结果倒置显微镜观察显示转染后细胞生长状态和形态均出现变化,瑞-吉染色显示转染后细胞有凋亡小体形成。细胞凋亡分析和细胞周期测定显示转染组凋亡细胞百分比率增高,G1期和G2/M期细胞百分比上升,而S期细胞百分比减低,表明细胞增殖减弱。结论抑制p53缺失或突变型白血病细胞PPP2R5A基因后细胞的凋亡、分化有一定变化,提示p53缺失或突变型白血病细胞中PPP2R5A在细胞分化、凋亡调控中扮演一定角色,为验证NS非p53途径的信号通路是否与PPP2R5A有关提供了依据。
- 付书贞孙晓莉Abdallah Dlykan贾宇魏园玉刘帅岳保红
- 关键词：白血病细胞核干细胞因子脂质体转染细胞生物学
- 抗核抗体谱检测的不同方法对比分析被引量：2
- 2016年
- 目的：研究抗核抗体谱不同检测方法的差异。方法分别采用间接免疫荧光法、条带酶免分析法和多重微珠流式荧光免疫法对214例自身免疫性疾病患者的抗核抗体谱进行检测，对三种方法检测抗核抗体谱阳性结果进行分析。结果多重微珠流式荧光免疫法阳性率[49．53％（106／214）]明显高于间接免疫荧光法和条带酶免分析法[35．51％（76／214），35．05％（75／214），P ＜0．05]，而后两种方法检测阳性率相接近（P ＞0．05）。三种方法联合检测阳性率[60．75％（130／214）]明显高于多重微珠流式荧光免疫法、间接免疫荧光法及条带酶免分析法（P ＜0．05）。结论间接免疫荧光法、条带酶免分析法和多重微珠流式荧光免疫法检测抗核抗体谱阳性率不高，采用三种方法联合检测可提高阳性率，可防止漏诊、误诊，对自身免疫性疾病的预后判断也有非常重要的意义。
- 郭佳贾宇杨辉李小娜王珂君曹建平李阳王春燕
- 关键词：抗核抗体间接免疫荧光法
- HL-60白血病细胞内Nucleostemin下调对PI3K/AKT/mTOR通路相关基因的影响
- 目的: 采用慢病毒转染技术下调p53缺失型白血病细胞HL-60中核干细胞因子(Nucleostemin，NS)的表达，通过Real-time PCR检测PI3K/AKT/mTOR通路中相关基因的变化情况，研究NS与PI...
- 贾宇
- 关键词：核干细胞因子HL-60细胞白血病
- 文献传递
- 流式细胞术检测ATG相关的类移植后浆细胞增多的类PTLD反应1例并文献复习
- 目的 了解抗胸腺细胞球蛋白(ATG)使用后外周血和骨髓的细胞学变化,以及流式细胞术(flow cytometry,FCM)的功能——测定细胞表型以及确定细胞分化阶段和性质.方法 对1 例罕见的ATG 治疗重型再生障碍性贫...
- 魏园玉贾宇李瞾博张帆岳保红
- 流式细胞术检测ATG使用后出现浆细胞增多的类PTLD反应一例并文献复习
- 目的 了解抗胸腺细胞球蛋白(ATG)使用后外周血和骨髓的细胞学变化,以及流式细胞术(flow cytometry,FCM)的功能——测定细胞表型以及确定细胞的分化阶段和性质.方法 对1 例罕见的ATG 治疗重型再生障碍性...
- 魏园玉贾宇李曌博张帆岳保红
- 早期腹膜透析患者疾病不确定感对疾病适应的影响被引量：15
- 2018年
- 目的:分析早期腹膜透析患者疾病不确定感和疾病适应现状,探讨疾病不确定感对疾病适应的影响。方法:选取2016年3月至2017年9月在郑州市某三级甲等医院肾内科腹膜透析中心治疗的220例早期腹膜透析患者为研究对象,采用一般资料调查表、疾病不确定感量表和疾病心理社会适应量表进行调查。结果:早期腹膜透析患者疾病适应总分为(64.40±3.75)分,处于中等偏低水平。疾病适应总分与疾病不确定感总分、不明确性维度、复杂性维度、信息缺乏性维度以及不可预测性维度均呈正相关(r=0.405、0.300、0.394、0.231、0.429,P<0.001)。多重线性分析显示,疾病适应影响因素为肾移植意愿、职业、不可预测性、不明确性、复杂性、宗教信仰,R2=0.640。结论:早期腹膜透析患者疾病适应水平亟待提高,临床工作者制定干预时应注重降低患者疾病不确定感水平。
- 徐海莉贾宇牛杜鹃翟志玲
- 关键词：腹膜透析疾病不确定感影响因素
- 血清B7-1和suPAR检测对微小病变肾病的诊断价值
- 2022年
- 目的评估血清B7-1和可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)检测对微小病变肾病(MCD)的诊断价值。方法收集2018年6月至2020年12月郑州大学第一附属医院肾脏内科收治的50例肾活检患者,其中19例MCD患者为观察组,31例其他病理类型患者为对照组。比较两组血清B7-1和suPAR水平,应用SPSS 25.0统计软件分析血清B7-1和suPAR检测诊断MCD的敏感度、特异度和受试者工作特征曲线曲线下面积(AUC)。结果MCD患者血清B7-1和suPAR水平高于对照组(P<0.05)。血清B7-1诊断MCD的敏感度和特异度为89.47%(17/19)、45.16%(14/31)[AUC=0.683(0.530~0.835)],血清suPAR诊断MCD的敏感度和特异度分别为57.89%(11/19)、70.97%(22/31)[AUC=0.681(0.529~0.833)]。联合诊断的结果显示,血清B7-1或suPAR阳性的敏感度为89.47%(17/19),血清B7-1和suPAR阳性的特异度为74.93%(23/31)。结论血清B7-1和suPAR能够有效诊断MCD,两者联合诊断更有临床意义。
- 袁文明王春燕贾宇王凯赵占正
- 关键词：肾脏微小病变肾病B7-1受试者工作特征曲线
- HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR通路相关分子的影响被引量：3
- 2014年
- 本研究旨在探讨白血病细胞中nucleostemin(NS)基因下调对其非依赖p53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR的相关分子表达的影响。通过重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至p53缺失型HL-60细胞以干扰NS基因的表达。用Real-time PCR技术评价转染后HL-60细胞NS基因的表达情况并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关分子水平表达的变化。结果表明:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见GFP荧光水平较高,大于80%。Real-time PCR结果显示,NS基因mRNA的抑制率在HL-60细胞中为56.5%;干扰NS的表达后PI3K、AKT和GβL基因mRNA表达量分别为0.491±0.084、0.398±0.164、0.472±0.097,下调明显,与空白对照组(分别为1.002±0.171、1.000±0.411、1.001±0.206)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在HL-60细胞中PI3K/AKT/mTOR通路相关分子的变化与NS基因的下调呈正相关,两者的关联性为证明PI3K/AKT/mTOR信号通路可能是NS的一种非依赖p53作用途径提供了依据。
- 贾宇魏园玉张帆李曌博刘帅岳保红
- 关键词：NUCLEOSTEMINMTOR信号通路HL-60细胞
- 核干细胞因子RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定
- 2013年
- 目的构建核干细胞因子基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并对其在白血病细胞株中的干扰效果进行鉴定,为后期研究奠定基础。方法针对核干细胞因子基因的序列设计RNAi有效靶点,合成含RNA干扰序列、Loop环、AgeⅠ和EcoRⅠ酶切位点,以及终止信号的单链DNA oligo,经退火形成双链DNA,与双酶切线性化的带有GFP荧光标记和嘌呤霉素抗性标记的GV248慢病毒空载体进行连接产生重组慢病毒载体,转化感受态细菌,挑取重组阳性转化子进行菌落PCR反应,并对PCR阳性克隆进行测序。将重组慢病毒载体及其两种辅助包装原件载体质粒pHelper1.0和pHelper2.0共转染293T细胞进行病毒的包装,收集、浓缩病毒液后测定其滴度,并转染HL-60、NB4以及K562等三种人白血病细胞株,倒置荧光显微镜下观察其转染效率,real-time PCR检测核干细胞因子基因的敲减效率。结果经测序证实正确构建出了核干细胞因子基因的RNAi重组慢病毒载体,包装、浓缩后其滴度为4×108TU/ml,荧光显微镜下显示其能有效转染进入HL-60、NB4及K562等白血病细胞株中,转染效率均在80%以上;real-time PCR显示转染后核干细胞因子基因mRNA表达水平较阴性对照组显著下降(P<0.05),在HL-60、NB4和K562细胞中核干细胞因子基因的抑制效率分别为52.3%、80.5%、62.3%。结论成功构建出了核干细胞因子基因的RNAi慢病毒载体,其能有效干扰人白血病细胞株HL-60、NB4及K562中的核干细胞因子基因表达。
- 孙晓莉Abdallah Dlykan贾宇魏园玉刘帅岳保红
- 关键词：RNA干扰核干细胞因子慢病毒载体白血病细胞
