赵晓慧
- 作品数：12 被引量：23H指数：3
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 内源性绵羊肺腺瘤病毒env基因的克隆及序列分析
- 2011年
- 参照GenBank上已发表的内源性绵羊肺腺瘤病毒env基因与5′长末端重复序列保守区序列设计引物,应用PCR技术成功扩增出内源性绵羊肺腺瘤env基因与5′长末端重复序列,将纯化的扩增片段连接pMD18-T克隆载体进行测序获得目的基因序列。应用MEGA4.1、DNASTAR进行序列分析,分析结果表明,内源性env基因具有完整的开放阅读框,内源性env基因序列与内源性绵羊肺腺瘤(AF153615.1)基因同源性高达99.7%,与外源性绵羊肺腺瘤(M80216.1)基因的同源性仅为90.6%;由内源性env基因推导的氨基酸在NCBI进行BLAST比较:与AF153615.1的氨基酸同源性高达100%。内源性env基因编码表达的蛋白具有亲水性。这些结果为研究5′长末端序列对内源性env基因调控等问题提供了重要参考。
- 苏佳周艳喜马学恩幺宏强赵晓慧
- 关键词：内源性绵羊肺腺瘤病毒
- 骆驼斯氏副柔线虫病传播媒介的筛选与确定被引量：2
- 2010年
- 对从内蒙古骆驼生活环境中采集到的24种蝇进行普通生物学剖检,并进一步用斯氏副柔线虫特异性引物ST1、ST2对蝇体内检获的幼虫进行分子生物学鉴定,以筛选与确定骆驼斯氏副柔线虫病的传播媒介。结果显示,在西方角蝇和截脉角蝇体内均发现了疑似斯氏副柔线虫幼虫,感染强度为1～22条/个,雌蝇与雄蝇感染强度差异不显著;幼虫长度为1.033～1.934mm;雄蝇的感染率为43.8%～48.0%,雌蝇的感染率为35.7%～46.2%。扩增得到的部分ITS序列(包括5.8S)与GenBank中登录的斯氏副柔线虫ITS序列同源性高达99.3%。基本确定了西方角蝇和截脉角蝇为斯氏副柔线虫病的传播媒介。
- 赵治国杨晓野杨莲茹顾巍吉亚图王瑞李文生赵晓慧
- 关键词：斯氏副柔线虫ITS序列传播媒介
- 少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora)表面聚合物的提取及生化性质研究被引量：2
- 2010年
- 为了解捕食线虫性真菌——少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora)捕食器表面聚合物的生化性质与作用,用5mol·L-1LiCl的表面聚合物提取液提取位于捕食器表面的这类物质,进而测定其中蛋白质的含量与酶的活性,并详细研究了温度、pH、化学试剂和蛋白酶抑制剂对其性质的影响。结果表明:2种不同来源的表面聚合物[表面聚合物(T+)与表面聚合物(T-)]最适温度均为65℃,前者最适pH为7.0,后者最适pH范围为6.5～7.5,且前者大相对分子质量蛋白质的浓度相对后者要高;同时还首次在含捕食器菌丝提取到的表面聚合物中检测到了蛋白酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的活性。通过研究初步了解了存在于捕食器表面并参与捕食过程的蛋白质类物质的相关化学性质,间接证实了上述物质可能在捕食过程中起关键作用,为今后深入开展对捕食线虫性真菌作用机理方面的研究提供了非常有价值的资料。
- 王瑞杨莲茹杨晓野马亚囡韩海宾赵晓慧
- 关键词：捕食线虫性真菌少孢节丛孢菌蛋白酶抑制剂酸性磷酸酶碱性磷酸酶
- 捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans胞外蛋白质的产生及其杀虫作用的研究被引量：3
- 2014年
- 将捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans接入含有不同诱导物的LMZ培养基和枸橼酸液体培养基中,然后进行为期6d的培养并收集发酵液,进而测定其中蛋白质的质量浓度和蛋白酶活性及磷酸酶活性,并用发酵液进行杀虫试验。结果显示,动物寄生性线虫诱导的枸橼酸培养基发酵液中蛋白质的质量浓度最高可达381.4mg/mL,蛋白酶和磷酸酶比活性最高,分别为9.48U/mL±0.03U/mL和38.30U/L±0.04U/L,对线虫的致死率为50.11%±11.8%,均明显高于相应的对照组;同时发现,D.flagrans发酵液对蝇蛆的致死率最高,可达40.56%±0.13%。结果表明,在D.flagrans发酵液中含有杀虫物质。研究结果为以后研究捕食线虫性真菌的化学杀虫机理提供了重要依据。
- 王瑞张博伦赵晓慧杨晓野杨莲茹李军燕马亚囡李文生李秀霞
- 关键词：捕食线虫性真菌杀虫作用
- 少孢节丛孢菌胞外蛋白酶的诱导与生化性质被引量：9
- 2010年
- 应用不同诱导剂和不同营养组成的液体培养基诱导培养捕食线虫性真菌——少孢节丛孢菌产生发酵液,经浓缩处理后,对发酵液中的蛋白质含量、酶活性以及相关的生化性质进行了测定。结果表明,培养基的组成成分和相关诱导剂能够显著影响少孢节丛孢菌的代谢过程;而且秀丽新杆线虫刺激少孢节丛孢菌产生的培养基滤液和氨基酸刺激所产生的发酵液内含成分不同;蛋白酶活性越高的滤液中,磷酸酶活性越低;产生胞外蛋白酶的最佳培养时间为6d。
- 王瑞杨莲茹杨晓野马亚囡赵治国赵晓慧李文生
- 关键词：捕食线虫性真菌少孢节丛孢菌胞外蛋白酶磷酸酶
- 斯氏副柔线虫线粒体CO1基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2011年
- 为研究斯氏副柔线虫(Parabronema skrjabini)种间遗传标记特点,从内蒙古地区骆驼皱胃中采集斯氏副柔线虫成虫,提取虫体DNA,利用线虫通用引物扩增细胞色素氧化酶1(CO1)基因,将其克隆到pMD19-T载体后,用PCR技术鉴定阳性菌落并进行测序,运用DNAStar 5.0和MEGA 4.0软件将测序结果与GenBank公布的相关线虫CO1序列进行比对分析。结果显示:斯氏副柔线虫DNA扩增出的CO1基因序列片段长度为689 bp。同其他相关属线虫CO1基因序列比对,斯氏副柔线虫与小口柔线虫(Habronema microstoma)、蝇柔线虫(Habronema muscae)的同源性最高,为86.7%,遗传距离为0.143;与加利西亚光丝虫(Litomosoides galizai)的同源性最低,为80.1%,遗传距离为0.229。通过两种不同方法建立的系统发育树比较,证实斯氏副柔线虫与柔线属线虫均位于同一分支,自展值都在47%以上。表明CO1基因不仅可以作为斯氏副柔线虫理想的种间遗传标记,也可为该线虫进一步的分子分类学研究提供重要基础。
- 李文生杨莲茹杨晓野赵治国赵晓慧李鑫王瑞
- 关键词：斯氏副柔线虫克隆
- 捕食性真菌-Duddingtonia flagrans胞外蛋白酶的诱导与纯化及其性质研究
- 为确定捕食线虫性真菌-Duddingtonia flagrans分泌产生胞外蛋白酶的最佳培养基及诱导物，并对胞外蛋白酶的生化性质进行研究。本论文首先利用含不同诱导物的LMZ培养基、枸椽酸培养基及大豆蛋白胨培养基，分别对D...
- 赵晓慧
- 关键词：胞外蛋白酶分离纯化杀虫活性
- 少孢节丛孢菌捕食器表面聚合物的诱导与提取方法研究被引量：4
- 2010年
- 为研究捕食线虫性真菌——少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora)捕食器表面聚合物的生化性质与作用,建立一种高效的表面聚合物诱导与提取方法尤为关键。试验首先用大豆蛋白胨液体培养基在氨基酸诱导作用下,产生大量含捕食器菌丝,然后分别用了5种不同化学性质溶液提取表面聚合物,经透析和浓缩后,测定了其中蛋白质的含量及其对线虫幼虫的毒性作用,同时还进行了提取液对真菌菌丝生长及其捕食作用的研究。通过综合分析得出,用5 mol/L LiCl溶液提取表面聚合物最为有效,其提取的表面聚合物溶液对线虫没有明显的杀线虫活性,但与捕食性真菌黏附捕获线虫过程密切相关;并通过比较源自含捕食器菌丝和普通营养菌丝的表面聚合物物质之间的差别,找到了参与黏附捕获线虫过程的物质,这为今后深入开展对捕食线虫性真菌表面聚合物的研究,进而阐明其作用机理提供了有价值的资料。
- 王瑞杨莲茹杨晓野马亚囡赵治国韩海宾赵晓慧
- 关键词：捕食线虫性真菌少孢节丛孢菌
- A型产气荚膜梭菌α毒素的基因扩增和提纯鉴定被引量：1
- 2011年
- 为了对A型产气荚膜梭菌α毒素快速准确地做出检测,本实验利用厌氧肉肝汤培养A型产气荚膜梭菌,经革兰染色观察以及含铁牛奶培养基观察其生化特性。然后使用饱和度为60﹪的硫酸铵粗提其α毒素蛋白,进行透析纯化并应用SDS-PAGE方法鉴定A型产气荚膜梭菌的α毒素,鉴定之后将纯化的α毒素给小鼠腹腔注射来检测其活性。结果表明,厌氧肉肝汤培养基变浑浊且产生大量气体,含铁牛奶培养基发生爆烈发酵现象,SDS-PAGE检测结果,α毒素分子量为43.6kDa,小白鼠出现梭菌病的典型临床症状。本实验为α毒素的鉴定及大量快速提取提供了一种参考方法,为进一步开展梭菌毒素的致病机理及制备类毒素疫苗奠定重要的实验基础。
- 于立新苏佳赵晓慧马学恩么宏强
- 关键词：产气荚膜梭菌Α毒素基因扩增
- 捕食性真菌Duddingtonia flagrans胞外蛋白质的生化性质研究被引量：4
- 2015年
- 为纯化捕食性真菌Duddingtonia flagrans分泌的胞外蛋白酶并研究其生化性质,利用枸橼酸液体培养基对D.flagrans进行培养,以灭菌的马圆线虫进行诱导,之后用盐析法粗提培养液,再使用Sephadex G-100分子筛进行层析纯化,最后对纯化物进行最适pH、温度及蛋白酶抑制剂的抑制试验。结果显示,被纯化出的3种胞外蛋白酶的分子质量分别为38、63、19ku;在pH 6.0~7.0、45~55℃条件下,其活性最高;它们都对酶抑制剂菲罗啉和抑肽素非常敏感,其中38ku的蛋白酶对抑制剂PMSF也很敏感。上述结果为进一步研究捕食性真菌分泌的胞外蛋白酶在杀线虫过程中的作用以及今后在生产中的具体应用提供了重要参考依据。
- 王瑞孙晓燕马亚囡杨晓野杨莲茹赵晓慧李军燕牛广胜张磊
- 关键词：纯化生化性质
