赵武玲
- 作品数:14 被引量:179H指数:7
- 供职机构:中国农业大学生物学院植物生理学与生物化学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 蛋白质工程改造的木糖异构酶活性中心对催化活性和分子构象的影响
- 赵武玲
- 关键词:蛋白质工程葡萄糖异构酶
- 光照对大豆叶片苯丙氨酸裂解酶(PAL)基因表达及异黄酮合成的调节被引量:65
- 2000年
- 异黄酮是大豆体内特别是种子中积累的一类重要的次生代谢产物 ,它具有特殊的生物效能。本实验在不同水平 (RNA/酶 /产物 )上研究不同光照条件对大豆叶片异黄酮合成过程中的第一个关键酶苯丙氨酸氨基裂解酶 (PAL)基因表达的影响。研究发现 ,在光照条件下pal表达量比黑暗条件下高 ,而且其影响程度与品种有关系 ,种子中异黄酮含量低的品种表现更敏感 ;其mRNA的合成受红光、蓝光、紫外光的促进 ,其中紫外光最有效 ;随着处理时间的延长 ,mRNA的量和酶活性增加 ;但是在异黄酮的积累水平上 ,随着紫外光照射时间的延长 。
- 谢灵玲赵武玲沈黎明
- 关键词:大豆异黄酮光照PAL基因表达生物合成
- 豌豆肌动蛋白基因在大肠杆菌中的表达被引量:2
- 2001年
- 高等植物细胞内含有肌动蛋白 ,但含量较低 ,难于提取及进行进一步研究。我们用 PCR的方法扩增肌动蛋白 c DNA,并克隆到表达质粒 p Trp His,然后转化大肠杆菌 DH5α;在 IPTG诱导下 ,肌动蛋白表达在包涵体中 ,在没有 IPTG诱导时 。
- 曹晓风赵武玲吴玮阎隆飞
- 关键词:肌动蛋白基因表达包涵体大肠杆菌豌豆
- 豌豆肌动蛋白异型体基因的特异性表达被引量:11
- 2001年
- 将分属三类豌豆 (Pisumsativum)卷须肌动蛋白异型体 (PEAc)的基因 3’端进行了亚克隆 ,并利用限制性内切酶从中切取了完整的 3’非翻译区片段 ,将之做为特异性探针进行DIG标记 ,并对不同发育时间豌豆根、茎、叶及花粉中提取的总RNA进行点杂交分析。发现其中I类 (PEAcI)和II类 (PEAcII)在根、茎、叶中都有表达 ,但存在发育时间上的表达特异性 ,尤其在叶中的差异较明显。而III类 (PEAcIII)与前二者的差别更大 ,仅发现其在 2d及 2 8d的根、7d的茎及 1 8d的叶中有表达。在花粉中 ,只有PEAcII有少量的表达 ,说明三类异型体基因的表达还存在组织特异性。
- 凌毅赵武玲
- 关键词:肌动蛋白基因特异性表达豌豆
- 豌豆肌动蛋白异型体的表达与系统发生分析(英文)被引量:5
- 2002年
- 豌豆 (PisumsativumLinn .)肌动蛋白基因至少可以分为 3类异型体 :PEAcⅠ、PEAcⅡ和PEAcⅢ ,它们的编码区序列相似性很高 ,而非编码区序列存在显著的差异。RT_PCR和以 3′端非翻译区作探针的Southern杂交结果显示豌豆肌动蛋白异型体基因在根、茎、叶、卷须、花粉和幼嫩果实中均表达 ,但表达强度存在明显差异。利用连续稀释电泳对PEAcⅠ的转录本水平进行分析后发现它倾向于在幼嫩的器官中表达 ,且在 7d的茎中表达最强 ;在一个月内的叶片中表达也较强 ,此后明显下降 ;卷须中表达变化不显著 ,在花粉中表达很弱 ,在幼嫩荚果中的表达亦较多。PEAcⅡ表达特点与PEAcⅠ具有某些相似性。根据肌动蛋白序列重建的系统发生树表明豌豆肌动蛋白 3类异型体间的分歧明显 ,但起源于单、双子叶植物分化前的共同基因祖先。推测豌豆肌动蛋白异型体基因在转录调控和细胞功能上存在差异。
- 江元清赵武玲
- 关键词:豌豆系统发生分析分子进化
- 果实菠萝蛋白酶的动力学研究被引量:19
- 1999年
- 用SephadexGSO凝胶过滤纯化果实菠萝蛋白酶在SDS-聚丙烯酸胺电泳上表现为一条带。在以酪蛋白为底物,PH7.2~35℃条件下,果实菠萝蛋白酶的KM值为0.7,Vmax为134.2mg·mL-1·min-1。果实菠萝蛋白酶的最适温度为55~65℃(以酪蛋白为底物,PH72),最适PH为7~9(以酪蛋白为底物,35℃),活化能△G为111.67kJ·mol-1。
- 赵武玲吴玮李藏铭王秀蛟
- 关键词:酶动力学热稳定性菠萝蛋白酶
- 大肠杆菌AE109青霉素G酰化酶的分离纯化及性质研究被引量:2
- 1990年
- 由发酵培养液所得大肠杆菌AE109菌体,先经高渗休克处理,继经D-苯甘氨酸-Sepharose 4B和DEAE-纤维素柱层析分离纯化得到青霉素G酰化酶,酶制品在非变性条件下的聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈一条区带,而且可以结晶。在SDS变性条件下解离为α和β两个亚基。 酶性质的研究结果表明,由大肠杆菌工程菌AE109菌株所得青霉素G酰化酶与其亲本大肠杆菌AS1.76菌株所得青霉素G酰化酶性质相同。
- 张其玖颜茂恭陈红赵武玲
- 关键词:大肠杆菌青霉素酰化酶纯化
- 谷子肌动蛋白基因的克隆及序列分析被引量:24
- 2002年
- 以谷子 (Setariaitalica)为材料 ,提取总RNA。根据植物肌动蛋白基因编码区的两端的保守序列设计了简并引物 ,用 5’RACE方法扩增出了谷子肌动蛋白基因编码区序列。以豌豆肌动蛋白cDNA作探针进行的Southern杂交分析表明扩增出了目的基因。将所获得的片段克隆到T载体后进行测序 ,序列分析结果表明 :谷子肌动蛋白基因的编码区长 1 1 3 1个核苷酸 ,编码了 3 77个氨基酸 ;所得序列 (命名为MIAc)与GenBank中注册的肌动蛋白基因序列的相似性均在 6 0 %以上 ,与其它肌动蛋白氨基酸序列的相似性达 89%以上。根据高等植物肌动蛋白序列相似性重建了进化树 ,表明谷子肌动蛋白与水稻肌动蛋白异型体RAc2和RAc3之间的亲缘关系最为密切 。
- 李园莉江元清赵武玲阎隆飞
- 关键词:谷子肌动蛋白基因克隆快速扩增CDNA末端分子进化
- 真核mRNA的3′非翻译区转录后水平调控作用研究进展被引量:16
- 2001年
- 真核生物mRNA的 3′非翻译区 (3′_UTR)在基因表达的转录后调控中起着重要作用 :3′_UTR内存在末端加工信号以指导mRNA3′末端的加工 ;3′_UTR不但控制mRNA的稳定性及降解速率、协助辨认特殊密码子 ,而且还控制着mRNA的翻译时间、位点及控制其翻译起始及效率等。
- 江元清凌毅赵武玲
- 关键词:转录后调控转录翻译
- 木糖异构酶突变体的研究──替代氨基酸对分子表面环柔性的影响
- 1996年
- 天然球蛋白分子表面暴露的和柔性的环是对蛋白质水解作用最敏感的部位,可用蛋白质部分水解来确定木糖异构酶突变体上的这些部位。枯草杆菌蛋白酶对W136E单体的水解在一级反应图上呈折线,对T89S和V134I单体的部分水解为直线。对镁-酶(MgE)的水解速度低于对脱辅基酶(ApoE)的水解速度。枯草杆菌蛋白酶对W136E的第一个水解位点在Ala28与Thr29之间,第二个水解位点在肽链的C端。
- 赵武玲阎隆飞
- 关键词:木糖异构酶突变体氨基酸