邹桂平
- 作品数：5 被引量：57H指数：4
- 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金淡水生态与生物技术国家重点实验室开放谭题基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小量快速浓缩病毒蛋白的研究
- 2000年
- 采用甘油透析浓缩及PEG - 60 0 0沉淀相结合的方法 ,对细胞病毒培养液进行处理 ,获得了较为纯化的病毒蛋白。该方法适用于病毒蛋白小量快速分析。纯化的病毒蛋白回收率约为 53μg/ml。
- 邹桂平方勤
- 关键词：病毒蛋白
- 草鱼呼肠孤病毒在CIK细胞中复制及形态发生的研究被引量：19
- 2000年
- 以草鱼呼肠孤病毒 (GCRV)感染的草鱼肾细胞系 (CIK)为模型 ,进行了草鱼呼肠孤病毒在细胞内的形态发生的研究。当病毒以感染复数为 5～ 10PFU/CELL感染CIK细胞时 ,在病毒感染细胞 4h以内的切片中 ,可观察到脱去部分外层衣壳的不完整病毒颗粒。感染细胞 8h ,可观察到浆胞内病毒发生基质 ,其内含有大量的直径约 5 0nm的亚病毒颗粒 ,无外层蛋白结构。感染 12～ 16h后 ,这些亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构 ,形成直径为 72nm左右的成熟的病毒粒子。病毒感染细胞 8h后 ,开始出现典型的病毒包含体 ,16～ 2 0h小时病毒包含体裂解 ,继而释放出有感染性的子代病毒颗粒。
- 邹桂平方勤
- 关键词：CIK致病机理
- 草鱼出血病病毒基因组的cDNA合成、克隆及部分序列分析被引量：18
- 1999年
- 采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液。提纯的病毒粒子经蛋白酶Ｋ处理和酚氯仿抽提，在１％琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到１１条ｄｓＲＮＡ，利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段。纯化的ｄｓＲＮＡ溶于９０％的ＤＭＳＯ中，７０℃变性１５ｍｉｎ，然后采用随机引物法反转录合成各基因片段的ｃＤＮＡ，并平头连接于ｐＺＥｒＯ２．０载体的ＥｃｏＲＶ位点，电转化ＴＯＰ１０感受态细胞。重组质粒经酶切、ＰＣＲ扩增得到大小不等的插入片段，ｃＤＮＡＲＮＡ斑点杂交的结果进一步证实其插入为目的基因片段。采用循环ＰＣＲ测序的方法，对其插入片段进行了序列测定，对其中第１１片段的部分序列作了报道。
- 田静邹桂平方勤
- 关键词：草鱼出血病病毒CDNA克隆
- 四株草鱼呼肠孤病毒毒株的细胞感染特性比较研究被引量：20
- 2002年
- 本文首次对低温保存的三株草鱼呼肠孤病毒GCRV873 、GCRV875、GCRV876与新分离的GCRV991毒株进行了细胞培养与病毒感染特性等比较研究。结果表明 ,GCRV873 、GCRV875、GCRV876在 - 30℃保存 10年后仍然具有一定的感染性 ,其滴度均在 10 2 TCID50 /mL以上 ,略低于从病鱼组织分离的GCRV991毒株的滴价。经传代培养后 ,四株GCRV的毒力逐渐升高 ,并趋于稳定 ;当感染复数 (MOI)为 0 .0 5PFU/cell时 ,测定四株GCRV的滴度均高于 10 8TCID50 /mL ,但略有差异。GCRV873 的滴度最高 ,可达到 6 .4× 10 11TCID50 /mL。连续传代的GCRV毒株在不同温度 (2 8℃、31℃、34℃、37℃、41℃ )条件下 ,均可感染CIK细胞 ;在 2 8℃时 ,感染效价最高 ,随着温度的升高 。
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- 鳜鱼病毒病原及细胞感染特性的研究被引量：13
- 2000年
- 在患暴发流行性发病鳜鱼的脾、肾、肝、鳃组织细胞的超薄切片中观察到直径为 12 0 150nm的二十面体病毒粒子 ,其截面呈六角形 ,有囊膜。将病鱼内脏与 10倍体积的PBS缓冲液制成组织匀浆液 ,过滤除菌后感染对数生长期的草鱼肾细胞。结果表明 ,该感染液在 2 8℃条件下 ,培养 36 4 8h ,生长旺盛的草鱼肾细胞开始出现CPE ,5 7d感染的单层细胞逐渐脱落死亡。该细胞病毒悬液具有感染性 ,可持续稳定地进行传代培养。感染细胞的病毒培养液 ,经差异离心纯化 ,负染制片 ,电镜下观察到大量的病毒粒子 ,对照培养物中未发现任何病毒颗粒。
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- 关键词：鳜鱼病毒
