郑朝晖
- 作品数：31 被引量：126H指数：8
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- miR-10b对滑膜成纤维细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及分子机制被引量：4
- 2018年
- 目的:探讨miR-10b对类风湿性关节滑膜成纤维细胞(RA-FLS)炎性因子分泌、增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制。方法:首先,分离原代培养FLS细胞并进行microarray,筛选RA和OA中差异表达的miRNA分子。然后,用real-time PCR对筛选得到的结果进行验证,进而通过生物信息学分析、细胞转染等方法明确miR-10b在FLS细胞中下调的分子机制。最后,采用MTT比色法、划痕实验和Transwell实验等检测miR-10b对其FLS细胞增殖、侵袭和迁移水平的影响。结果:与OA FLS相比,芯片筛选发现176条miRNA在RA-FLS中上调,204条下调;其中,miR-10b在RA-FLS细胞中受肿瘤坏死因子(TNF-α)等多种炎性因子以NF-κB依赖的方式进行调控;miR-10b的下游靶基因为TAK1和TLR4,通过对这两个靶基因的调控,miR-10b一方面可以促进TNF-α的分泌和NF-κB的活化入核,从而激发TNF-α→NF-κB→miR-10b→TNF-α/NF-κB环路;另一方面促进FLS表面TLR4的表达以及LPS对于FLS的刺激作用,激发LPS→NF-κB→miR-10b→TLR4环路。此外,miR-10b的下调可促进FLS细胞的增殖、侵袭和迁移。结论:miR-10b在RA-FLS细胞中显著下调,其通过参与信号环路的调节可影响FLS细胞的炎性细胞因子分泌及其增殖、侵袭和迁移。
- 褚楚穆楠顾锦涛黄同列舒震赵金康郑朝晖张伟薛晓畅
- 关键词：类风湿性关节炎MICRORNAMIR-10B成纤维样滑膜细胞
- 中性粒细胞增强类风湿关节炎滑膜细胞产生基质金属蛋白酶及其细胞侵袭力被引量：12
- 2007年
- 目的:研究中性粒细胞表面CD147分子对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)产生基质金属蛋白酶(MMP)及细胞侵袭力的作用。方法:取自关节镜或骨科手术治疗的RA、骨关节炎(OA)患者的滑膜组织,体外分离培养FLS,通过流式细胞术(FCM)检测细胞表面分子及形态学方法鉴定。采用全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞(人早幼粒白血病细胞株)诱导中性粒细胞分化,并用硝基蓝四氮唑(NBT)还原反应测定其分化程度。进而以FCM测定分化前后的HL-60细胞及FLS表面CD147的表达,并通过明胶酶谱和重组基质侵袭实验检测分化前后HL-60细胞对FLS MMP表达和细胞侵袭能力的作用以及CD147拮抗肽(AP-9)对这种MMP表达和细胞侵袭能力的抑制作用。结果:成功建立了FLS分离培养和HL-60细胞分化的实验体系。培养的FLS具有典型成纤维细胞的形态,均一的高度表达CD90(>98%)而不表达CD14。分化后的HL-60细胞CD147表达上调,RAFLS细胞CD147表达水平低于分化前及分化后HL-60细胞(P<0.05)。明胶酶谱试验显示:①与OA FLS相比,单培养的RA FLS表达较高水平的酶原及活化形式的MMP-2(P<0.05);②分化前/后的HL-60细胞分别与FLS共培养,酶原及活化形式的MMP-2和MMP-9的表达水平较这些细胞单独培养均显著升高(P<0.05),且分化后的HL-60细胞与FLS共培养酶原及活化形式MMP-2表达水平较分化前HL-60细胞与FLS共培养明显升高(P<0.05);③AP-9显著抑制两共培养组中MMP-2和MMP-9的上调作用(P<0.05)。侵袭实验显示:RA FLS侵袭能力高于OA FLS(P<0.05);分化前后的HL-60均可增加RA FLS的侵袭能力(P<0.05),且分化后强于分化前(P<0.05);AP-9可抑制这一促进作用,降低FLS的侵袭能力(P<0.05)。结论:中性粒细胞可能通过CD147促进RA患者滑膜FLS MMP-2、MMP-9的表达和活化,增强FLS的侵袭能力,这种促进作用可被CD147拮抗肽所抑制,将为RA关节软骨和骨损伤机制和治疗的进一步研究提供了重
- 梁晓辉朱平杨勇汪莉郑朝晖丁进
- 关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶中性粒细胞
- 部分部队官兵类风湿关节炎及血清阴性脊柱关节病的流行病学调查被引量：13
- 2008年
- 目的:调查类风湿性关节炎(RA)及血清阴性脊柱关节病(SpA)在不同地区不同兵种部队中患病及流行特点.方法:采用COPCORD询问表,对内陆平原地区、南疆干旱地区、北疆及青海寒冷高原地区及沿海潮湿地区,包括陆、海、空三军共21750人进行四级调查.初步诊断病例行X线、RF、抗CCP抗体、抗AKA抗体及HLA-B27检测.结果:RA患病率为0.966‰,SpA患病率4.87‰,其中强直性脊柱炎(AS)患病率为2.11‰,反应性关节炎(ReA)患病率为0.276‰,未分化脊柱关节病(USpA)患病率2.39‰,).RA,AS,USpA在海军中患病率高于其他兵种.RA在不同地域间患病率无统计学差别,AS在高原寒冷地区及沿海潮湿地区的患病率高于干旱地区及内陆地区,USpA在沿海潮湿地区的患病率高于干旱地区及内陆地区.结论:RA在部队的患病率显著低于普通人群,在海军中的患病率高于其他兵种.AS,USpA在部队的患病率接近普通人群.血清阴性脊柱关节病(SpA)在高原寒冷及潮湿环境地区部队的患病率增高.
- 吴振彪朱平王宏坤郑朝晖卢宁贾筠丁进冷南刘玲张惠琴
- 关键词：患病率军事人员
- 系统性硬化并发自身免疫性甲状腺病患者外周血中CD_(23)^+细胞和CD_(19)^+细胞的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨系统性硬化(SSc)伴发自身免疫性甲状腺病(AITD)患者外周血CD23+细胞和CD19+细胞的表达及CD23+/CD19+细胞的变化情况。方法:选取40例SSc及SSc合并AITD64例患者,采用放射免疫分析法检测患者外周血甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺微粒体抗体(TMAb)的水平;外周血中分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测CD23+细胞和CD19+细胞的表达,并观察CD19+细胞/CD23+细胞比值变化,以44例健康正常人外周血为对照。结果:SSc合并AITD患者TGAb和TMAb显著高于未合并其他疾病的患者和健康人;而SSc合并AITD患者的外周血中CD23+细胞和CD19+细胞的比例,以及CD19+细胞/CD23+细胞均显著高于未合并其他疾病的SSc患者以及健康人(P<0.01)。结论:外周血中CD23+细胞、CD19+细胞及CD19+细胞/CD23+细胞的高表达,提示CD23+细胞和CD19+细胞可能在SSc合并AITD的发病中发挥重要作用。
- 杨西超吕婷婷郑朝晖巴燕娜吴振彪
- 关键词：甲状腺疾病免疫学
- 成人骨髓间充质干细胞的纯化及部分生物学特性的研究被引量：3
- 2005年
- 目的探讨成人骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells或bonemarrowstromacells,MSCs)体外纯化的方法,观察其生物学特性,为其在风湿病治疗中应用提供了初步实验体系和依据。方法抽取健康正常人骨髓3～5ml,Percoll分离液分离后低糖达氏修正依氏培养基(LG-DMEM)培养,流式细胞仪检测表面标记物与细胞周期,绘制生长曲线,并对长时间培养的传代细胞行碱性磷酸酶(AKP)染色及VonKossa染色。结果譹经分离出的细胞为MSCs;譺经自然纯化,第2代细胞(P2)与第3代细胞(P3)均质性分别达90%及98%以上;譻纯化后,细胞在第3代(P3)细胞增生旺盛,第7代(P7)后细胞呈增长缓慢趋势;譼MSCs长期培养,有向成骨细胞分化的趋势。结论利用MSCs特性,经自然纯化,是当前纯化MSCs的一种较好且行之有效的方法。
- 郑朝晖朱平樊春梅王彦宏
- 关键词：骨髓中胚层干细胞细胞培养生物学特性弥漫性结缔组织病
- PMA对THP-1细胞和RA患者单核细胞及培养上清中CD147表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的研究豆蔻佛波醇乙酯(PMA)刺激前后,体外培养的人单核细胞系THP-1细胞和类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞(humanperipheralbloodmonocytes,HPBM)上及培养上清中CD147的表达。方法以贴壁法分离RA患者HPBM。用PMA刺激体外培养的RA患者HPBM和THP-1细胞,采用流式细胞术动态检测THP-1细胞、RA患者HPBM膜表面CD147的表达。用双抗体夹心ELISA法检测培养上清中CD147分子的含量。结果PMA刺激前,THP-1细胞膜及RA患者HPBM表面CD147分子的表达均较高,培养上清中均可检测到CD147分子。PMA刺激后,THP-1细胞培养上清中CD147的含量升高,THP-1细胞上CD147的表达先升高后降低,最后进入稳定期;RA患者的HPBM上CD147的表达下降,培养上清中CD147的含量升高,于刺激后2d进入稳定期。结论THP-1细胞、RA患者HPBM膜表面CD147分子可从细胞上脱落或由细胞直接分泌到培养液中。PMA可上调可溶性CD147的表达。
- 李鸿明朱平樊春梅王彦宏郑朝晖李晓燕卢宁
- 关键词：CD147THP-1细胞
- 临床免疫学PBL案例的设计及应用分析
- 2013年
- 目的探讨PBL统编教材在临床免疫学教学中的应用策略。方法国内的PBL教学不能照搬国外的案例,而应根据PBL教学规律冷静思考、参照国外案例特点,编写适合我国特色的PBL案例。我们注重了PBL案例的内容和问题设计,注重趣味性、知识性、启发性和实用性特点。结果学生反映良好,显著提高了学生学习兴趣和参与精神,锻炼学生们多方面的能力。结论本文总结了临床免疫学PBL案例设计思路及应用分析,以期为PBL统编教材形成奠定基础。
- 李学义杨西超郑朝晖丁进吴振彪朱平
- 关键词：PBL教学法临床免疫学教学改革
- C57BL/6小鼠胶原诱导关节炎的特异性细胞及体液免疫反应被引量：6
- 2005年
- 目的观察并比较C57BL/6小鼠初次和加强免疫Ⅱ型胶原后的特异性细胞及体液免疫应答,探讨特异性免疫应答在胶原诱导关节炎发病中的意义。方法用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)在C57BL/6小鼠尾部皮内注射,诱导胶原性关节炎(CIA)。分别取初次免疫后19d及加强免疫后7、28dCIA小鼠脾脏淋巴细胞,CⅡ体外刺激扩增后,采用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法和流式细胞术分别测定其扩增情况和表型;并通过流式细胞术测定外周血中细胞内细胞因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4的水平分析Th1和Th2亚群的变化;同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定不同时期CIA模型血清中抗CⅡ抗体的表达。结果①免疫后不同时间,CIA模型组外周血中CD4+IFN-γ+细胞百分率明显高于对照组(P<0.01),但CIA模型组内不同时间CD4+IFN-γ+细胞百分率差异无统计学意义;②特异性增生实验显示,CIA模型组CD4+T细胞中BrdU+细胞率均高于对照组,但加强免疫后BrdU+细胞率明显低于初次免疫(72±6)%,并且有逐渐降低的趋势;初次免疫后CD4+IFN-γ+细胞百分率为(13±4)%,加强免疫后阳性细胞百分率也下降;③ELISA法测定不同时间血清中CIA模型组抗CⅡ抗体水平,28d吸光度(A)值达到最高,其后逐渐减低,到35d左右(即加强免疫后14d)出现较低的抗体水平。
- 李晓燕朱平樊春梅王彦宏贾俊峰郑朝晖
- 关键词：C57BL/6小鼠特异性细胞体液免疫反应C57BL/6小鼠干扰素(IFN)-Γ细胞内细胞因子脾脏淋巴细胞
- 重组人Ⅱ型胶原250-270多肽对特异性体液免疫的抑制作用被引量：4
- 2006年
- 目的:研究口服重组人Ⅱ型胶原250-270多肽(CⅡ250-270)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠特异性体液免疫反应的抑制作用,为应用口服CⅡ250-270治疗类风湿关节炎提供理论依据。方法:ELISA测定加强免疫后小鼠血清中抗原特异性抗体的表达,ELISPOT检测小鼠脾脏淋巴细胞中抗原特异性抗体形成细胞。结果:口服重组人CⅡ250-270小鼠血清中抗CⅡ和抗CⅡ250-270的IgG抗体水平[A值分别为(0.82±0.02)、(0.84±0.04)]比CⅡ免疫对照组[抗CⅡ的IgG抗体水平,A值为(1.01±0.06)]显著降低,而且特异性抗CⅡ250-270的IgG抗体反应在口服多肽组被明显抑制(P<0.01);口服重组人CⅡ250-270小鼠的CⅡ和CⅡ250-270特异性抗体形成脾细胞的增殖频率分别为(158±9计数/孔)、(181±10计数/孔),比CⅡ免疫对照组[CⅡ特异性抗体形成脾细胞的增殖频率为(247±16计数/孔)]也显著减少(P<0.05)。结论:口服重组人CⅡ250-270多肽具有抑制CIA小鼠的特异性体液免疫的作用,可能是此疗法治疗CIA多发性关节炎的重要机制。
- 王宏坤朱平李晓燕郑朝晖贾俊峰丁进樊春梅
- 关键词：类风湿关节炎胶原诱导性关节炎口服耐受
- 我军不同兵种在不同地区类风湿性关节炎患病的流行病学调查被引量：8
- 2004年
- 目的 :调查类风湿性关节炎 (RA)在不同地区不同兵种部队中的发病及流行的特点 .方法 :采用COPCORD询问表 ,对内陆平原地区、南疆干旱地区、北疆寒冷高原地区及沿海潮湿地区 ,包括陆、海、空三军共 2 175 0人进行四级调查 ,初步诊断病例行X线、RF ,抗CCP抗体、抗AKA抗体检测 .结果 :RA患病率为 0 .97‰ ,RA在高原寒冷地区及潮湿环境地区患病率高于平原地区及干旱地区 .海军中的患病率高于陆军及空军 .RF ,抗CCP抗体、抗AKA抗体的阳性率分别为76 .2 % ,38.1% ,4 2 .9% .结论 :RA在部队的患病率显著低于普通人群 ,在海军中患病率高于其他兵种 ,不同地区的患病率无明显差别 .
- 吴振彪王宏坤郑朝晖卢宁贾俊峰贾筠冷南张惠琴朱平
- 关键词：类风湿性关节炎军事人员患病率地理学
