郑立
- 作品数:5 被引量:14H指数:2
- 供职机构:河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学政治法律更多>>
- 中国明对虾CrusFc-2基因的重组表达及抗血清制备
- 2011年
- 利用PCR和DNA重组技术克隆了中国明对虾CrusFc-2基因的成熟肽编码序列并构建了pET-DsbA-CrusFc-2原核表达载体,转化E.coliBL21(DE3)后,经异丙基--βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导得到了重组蛋白.重组蛋白经纯化后免疫新西兰大白兔制备了抗血清,Western Blot分析表明CrusFc-2蛋白主要存在于对虾血细胞中.
- 柳峰松王晓菲李婷郑立谢松
- 关键词:中国明对虾原核表达抗血清
- 政治一体与多元融合——当代西方文化民主思想研究与批判
- 以西方资产阶级革命为肇始世界各国相继进入了现代性民族国家的建构过程中;但是却无法避免一体化整合过程所带来的诸种弊端,而族群之间的冲突就是一个最重要和最直接的问题。从当今世界的现实来看,不同族群之间的冲突几乎主导或者引发了...
- 郑立
- 关键词:政治思想公民身份
- 文献传递
- 家蝇溶菌酶2基因的克隆及其性质研究被引量:10
- 2011年
- 溶菌酶(lysozyme)作为抗菌肽重要一员,在昆虫先天免疫系统中起着重要作用。本文通过家蝇EST序列筛选并结合RACE技术克隆了家蝇Musca domestica的lysozyme2基因(Md-lysozyme 2,MdL2)全长516bp的cDNA序列。MdL2包含429bp的开放阅读框,编码142个氨基酸残基,推导的氨基酸序列N端包括20个氨基酸残基的信号肽,成熟肽由122个氨基酸残基组成,理论分子量为13.89kD,理论等电点为6.45,有8个半胱氨酸组成4对分子内二硫键。实时荧光定量PCR结果显示大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别刺激后,家蝇幼虫体内MdL2基因的表达模式发生了非常相似的变化。在刺激3~12h表达下调,12~24h出现一个短暂的恢复,在刺激24h后表达又开始下调。不同组织定量PCR结果表明MdL2表达量在肠和血细胞中较高,而在表皮和脂肪体中较低。MdL2成熟肽编码序列被克隆入pET-DsbA表达载体,并转化大肠杆菌后得到高效表达。
- 郑立李娟郭亚伟柳峰松
- 关键词:家蝇基因克隆
- 家蝇lysozyme和defensin基因的鉴定及功能分析
- 家蝇(Musca domestica)虽生活在病原菌滋生的恶劣环境中,井传播多种疾病,但自身却很少被感染。这说明家蝇在长期的进化过程中,形成了一套强大而高效的免疫防御机制来对付各种各样的病原菌侵染,其中很重要的因素就是家...
- 郑立
- 关键词:家蝇实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 家蝇Denfensin-1基因的克隆、诱导表达及启动子活性分析被引量:5
- 2013年
- 【目的】鉴定一种新的家蝇Musca domestica防御素基因,并分析其功能。【方法】从家蝇转录组数据库中鉴定了1条新的防御素基因cDNA序列,并将其命名为家蝇防御素1(Md-defensin-1)基因Mdde-1。利用生物信息学网站、软件预测其结构等信息。以实时荧光定量PCR技术研究该基因的表达模式,并且利用基因步移技术获得了启动子序列,同时采取细胞转染技术验证Mdde-1启动子活性。【结果】该序列包含一个276 bp的开放阅读框,编码91个氨基酸残基。推导的氨基酸序列N端包括1个23个氨基酸残基的信号肽和1个28个氨基酸残基的前肽。成熟肽由40个氨基酸残基组成,含有1个典型的CSαβ基序。实时荧光定量PCR结果显示,家蝇2龄幼虫受金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus(G+)刺激后Mdde-1表达明显上调,而大肠杆菌Escherichia coli(G-)刺激后表达下调;Mdde-1在家蝇幼虫受到热激时呈上调表达。为进一步研究其调控机制,克隆了Mdde-1启动子,并证明了该启动子具有活性。【结论】据此认为Mdde-1是一种新的家蝇防御素,并且在免疫革兰氏阳性菌方面发挥重要作用;同时我们首先证明了Mdde-1的启动子具有活性。本研究为进一步研究家蝇防御素的作用机制奠定了基础。
- 卢丹郑立王欣欣王凡唐婷柳峰松
- 关键词:家蝇先天免疫抗菌肽防御素启动子