郭忠胜
- 作品数：7 被引量：40H指数：2
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- 替比夫定治疗慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞动态变化及其意义
- CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)是一群专职的主动抑制针对自身抗原或外来抗原的免疫反应T淋巴细胞，其特点是表面持续表达高水平的CD25分子和特异性地表达转录因子FoxP3。国内外文献均有报道，慢性乙型肝炎患者外...
- 潘修成陈明杨帆傅涓涓郭忠胜张言超孙莉莉
- 关键词：乙型肝炎抗病毒治疗调节性T细胞
- 文献传递
- 抑癌基因KLF6在肝癌HepG2细胞修复DNA损伤过程中的作用研究被引量：1
- 2009年
- 目的:研究抑癌基因KLF6对肝癌HepG2细胞修复DNA损伤能力的影响。方法:RT-PCR及Western blotting技术测定HepG2细胞在5mg/L顺铂作用12、24、36h后KLF6 mRNA及其蛋白水平变化。采用宿主细胞再活化反应(HCR)检测KLF6稳定表达HepG2细胞修复DNA损伤的能力。结果:在5mg/L顺铂作用下,随作用时间延长,KLF6 mRNA及其蛋白水平增高,但作用36h,KLF6蛋白水平下降。KLF6稳定表达HepG2细胞修复被顺铂损伤质粒DNA的能力明显高于对照组。结论:DNA损伤能诱导肝癌HepG2细胞KLF6基因表达,KLF6基因在细胞DNA损伤修复过程中发挥一定作用。
- 潘修成杨帆陈明郭忠胜季芳傅涓涓
- 关键词：基因肿瘤抑制基因KLF6DNA修复HEPG2细胞
- 替比夫定治疗慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞动态变化及其意义
- 目的：探讨替比夫定抗病毒治疗过程中慢乙肝患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比率变化及其临床意义。方法：选取36例慢乙肝患者给予替比夫定抗病毒治疗。在治疗前及治疗后3、6、9月时，分别以流式细胞仪检测外周血Tregs...
- 潘修成陈明杨帆傅涓涓郭忠胜张言超孙莉莉
- 关键词：慢性乙型肝炎外周血T细胞动态检测抗病毒治疗
- 文献传递
- 抑癌基因kruppel样因子6及其剪接体蛋白对HepG2细胞增殖和分化的影响
- 2008年
- 目的研究抑癌基因Kruppel样冈子（KLF）6及其剪接体蛋白对肝癌细胞株HepG2细胞增殖和分化的影响。方法RTPCR扩增肝细胞癌组织中KLF6剪接体cDNA并测定其序列；构建KLF6剪接体真核表达喷粒pcDNA3．1A（-）／KLF6V。转染HepG2细胞后，经G418筛选获得稳定表达KLF6全长和其剪接体蛋白的HepG2细胞，分别命名为HepG2／KLF6和HepG2／KLF6V。四甲基偶氮唑盐法测定该两种HepG2细胞的增殖活性；同时分别以放射免疫法或Westernblot技术测定白蛋白、甲胎蛋白或P21^WAFI、细胞周期素D1蛋白在HepG2／KLF6或HepG2／KLF6V细胞中的表达情况。结果从肝细胞癌组织中扩增出一种KLF6剪接体，序列分析提示该剪接体缺失127nt，引起KLF6蛋白近羧基端缺失42个氨基酸；KLF6VmRNA在肝癌及癌旁组织均有表达，但癌组织表达水平明艟增高。HepG2／KLF6细胞牛长速度较慢而HepG2／KLF6V细胞增殖较快，同时HepG2／KLF6细胞P21^WAFI蛋白表达及白蛋白分泌水平明显高于HepG2／KLF6V细胞，而细胞周期素D1表达及甲胎蛋白分泌水平在HepG2／KLF6V细胞高于HepG2／KLF6细胞。结论肝细胞癌组织中存在KLF6剪接体，该剪接体能对抗全长KLF6基因抑制细胞生长、促进细胞分化等的功能。
- 潘修成陈智季芳郭忠胜陈明傅涓涓
- 关键词：剪接体细胞分化
- 慢性乙型肝炎患者MoDCs表面PD-L1分子的表达及其对T淋巴细胞功能的影响被引量：4
- 2012年
- 目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞来源的树突状细胞(MoDCs)表面PD-L1的表达水平及其对MoDCs诱导的HBV特异性T淋巴细胞功能的影响。方法采用流式细胞术检测CHB患者、慢性乙型肝炎病毒携带者(ASC组)、健康对照者(NC组)外周血MoDCs表面PD-L1的表达,采用全自动生化分析仪检测ALT(正常参考值<40U/L)和荧光定量聚合酶链反应测定HBVDNA水平。替比夫定抗病毒治疗前后分别体外培养CHB患者的MoDCs。流式细胞术检测MoDCs表面PD-L1表达的变化;负载HBsAg的MoDCs和异体T淋巴细胞混合培养,以PD-L1单克隆抗体阻断PD-L1/PD-1途径后,MTT法检测HBV特异性T淋巴细胞增殖能力;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定混合淋巴细胞反应(MLR)上清液中IL-12、IFN-γ和IL-10的浓度。结果 CHB患者外周血MoDC表面PD-L1的表达高于ASC组和NC组,且与患者ALT、HBVDNA水平呈正相关。随抗病毒时间的延长,MoDCs表面PD-L1水平下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。封闭PD-L1途径后,MoDCs诱导的T淋巴细胞的增殖能力及MLR中IL-12、IFN-γ水平均升高,IL-10水平降低的程度大于相应的未封闭PD-L1途径组。结论 CHB患者外周血MoDCs表面PD-L1表达水平的升高,降低了HBV特异性T淋巴细胞免疫功能;替比夫定抗病毒治疗对MoDCs表面PD-L1的表达无显著影响;阻断PD-L1/PD-1途径能够提高MoDCs诱导的HBV特异性T淋巴细胞免疫反应。
- 杨帆潘修成陈明郭忠胜李丽冯霞张言超
- 关键词：髓样树突状细胞T淋巴细胞肝炎乙型慢性
- 替比夫定对慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞动态变化的影响及其临床意义被引量：35
- 2008年
- 目的探讨替比夫定抗病毒治疗过程中慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tregs）比例的变化及其临床意义。方法选取给予替比夫定抗病毒治疗的CHB患者36例，在治疗前及治疗后3、6、9个月时，分别以流式细胞仪检测外周血Tregs比例（以CD4^＋CD25^high T细胞作为Tregs），荧光定量PCR检测血清HBVDNA水平，酶联免疫吸附法检测HBV标志物，全自动生化分析仪检测ALT水平。结果CHB患者外周血Tregs比例明显高于对照组（P〈0．01）。替比夫定抗病毒治疗过程中，CHB患者外周血Tregs比例逐步下降，治疗6、9个月时基本恢复正常水平；HBVDNA水平降至检测水平以下的CHB患者（30例）在Tregs比例明显下降的CHB患者中所占比例（7／7，100．0％）高于Tregs比例无明显下降的CHB患者（23／29，79．3％），但两者差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗3、6、9个月时，HBeAg阴转率分别为11．1％、19．4％、25．0％，其中7例（19．4％）发生HBeAg血清学转换者在治疗3、6个月时Tregs比例均已降至正常人水平。结论替比夫定抗病毒治疗过程中，能降低CHB患者外周血Tregs比例，治疗早期Tregs比例下降的患者HBeAg血清学转换率更高。
- 潘修成杨帆陈明傅涓涓郭忠胜张言超孙莉莉
- 关键词：肝炎乙型慢性T淋巴细胞调节性
- 阻断PD-1／PD—L1信号通路对负载HBsAg的树突细胞抗HBV免疫功能的影响
- 2010年
- 目的探讨阻断PD—1／PD—L1信号通路后，负载HBsAg的树突细胞（dendritic cells，DC）诱导HBV转基因小鼠免疫应答的作用特点。方法体外诱导扩增BALB／c小鼠骨髓来源的DC，尾静脉免疫HBV转基因小鼠（其中在DC免疫前1d腹腔注射PD—L1抗体，共3次）。实验分5组进行：DC／HBsAg＋PD—L1抗体组、DC／HBsAg组、DC组、mIgG组和磷酸盐缓冲液（PBS）组，分别以流式细胞术、乳酸脱氢酶（LDH）释放法、酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量聚合酶链反应（PCR）等检测HBV转基因小鼠脾脏淋巴细胞增殖及细胞内干扰素γ（IFNγ）、特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性及血清HBsAg、HBV DNA和丙氨酸转氨酶（ALT）水平。采用SPSS13．0统计软件进行分析，组间比较采用ANOVA方差分析和q检验。结果免疫后第3天和第6天，DC／HBsAg＋PD—L1抗体组与其他各组比较在诱导CD3^＋CD8^＋T淋巴细胞增殖及IFNγ分泌方面差异有统计学意义（细胞增殖：F值分别为25．22和39．01，P值均〈0．01；IFNγ分泌：F值分别为32．35和36．98，P值均〈0．01）；而DC／HBsAg组与DC组淋巴细胞增殖能力比较仅在第3天有统计学意义（t=6．79，P=0．012）。特异性CTL的活性在DC／HBsAg＋PD—L1抗体组明显升高。各组血清HBsAg在第6天差异有统计学意义（F=6．12，P〈0．05）。DC／HBsAg＋PD—L1抗体组血清ALT水平与DC／HBsAg组比较在第3天无差异，与其他各组比较在第3和第6天差异有统计学意义（F值分别为19．22和14．30，P值均〈0．05）。各组对HBV DNA的清除能力没有差别，但DC／HBsAg＋PD—L1抗体组有1只小鼠病毒载量下降1个数量级。结论封闭PD-1／PD—L1信号通路能通过提高特异性CD^3＋CD8^＋T淋巴细胞增殖及其分泌IFNγ能力，进而促进负载HBsAg的DC诱导转基因小鼠抗HBV免疫能力。
- 郭忠胜潘修成陈明杨帆李丽张言超李秀华
- 关键词：树突细胞信号通路干扰素Γ
