郭瑶
- 作品数：5 被引量：11H指数：3
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省科技支撑计划项目江苏省高校高新技术产业发展项目更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- 内生多黏类芽孢杆菌纤溶酶的纯化及其体外溶栓作用被引量：3
- 2010年
- 植物内生菌株EJS-3发酵液经离心除菌,硫酸铵分级沉淀,Hiprep phenylFF疏水层析,RESOURCEM Q离子交换层析和Sephacryl S-300HR凝胶过滤,获得电泳纯的多黏芽孢杆菌纤溶酶(PPFE-I),聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子质量为63kD,高效液相色谱法(HPLC)鉴定其纯度为94.1%。每升发酵液中可获得1.6mg活性蛋白,每毫克蛋白活力达2096IU,纯度提高了14.5倍,回收率为3.3%。纯化后的纤溶酶PPFE-I具有明显的体外溶栓作用。
- 吕凤霞姚正颖别小妹赵海珍王煜郭瑶陆兆新
- 关键词：植物内生菌纤溶酶溶栓作用
- 内生多粘类芽胞杆菌纤溶酶基因PPFE-I在大肠杆菌中融合表达及活性分析被引量：2
- 2010年
- 以内生多粘类芽胞杆菌EJS-3基因组DNA为模板,PCR扩增PPFE-I基因,并克隆到pMD19-T载体上,构建克隆载体pMD-PPFE-I,经测序正确后,将PPFE-I基因克隆至表达载体pET-DsbA上构建重组表达质粒pET-DsbA/PPFE-I,将其转化至E.coli BL21(DE3),在IPTG诱导下实现了融合蛋白DsbA-PPFE-I的表达,表达产物酶活性达228IU/mL。表达产物用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定。SDS-PAGE电泳检测表明融合蛋白主要以可溶形式表达,占菌体总蛋白的18.4%。Western blotting结果表明在相应分子量处有一条特异性条带,证实该蛋白为DsbA-PPFE-I融合蛋白。表达产物通过Ni亲和柱、凝血酶酶切及Sephadex G-100等步骤进行分离纯化,并用MALDI-TOF质谱对重组酶进行了鉴定。纯化后的表达产物在纤维蛋白平板上表现出明显的纤溶活性。
- 吕凤霞陆兆新别小妹林谦张充曹林郭瑶汤彦翀
- 关键词：内生菌纤溶酶
- Aspergillus niger Z-25葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母中的表达
- 葡萄糖氧化酶/(Glucose Oxidase, GOD/)系统命名为β-D-葡萄糖：氧化还原酶/(EC1.1.3.4/)。该酶能够利用氧气将葡萄糖氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢,因而具有除氧、抗氧化、去除葡萄糖以及生成葡...
- 郭瑶
- 关键词：葡萄糖氧化酶黑曲霉毕赤酵母
- 文献传递
- 腐生葡萄球菌M36耐有机溶剂脂肪酶基因的克隆与原核表达被引量：3
- 2009年
- 脂肪酶是重要的工业用酶,在食品加工、生物柴油的合成等领域具有广泛的应用。但是在应用中有机溶剂对脂肪酶具有一定的毒性,因此获得耐有机溶剂的脂肪酶基因并实现高效表达是脂肪酶规模化应用的前提。本研究应用PCR技术首次从耐有机溶剂脂肪酶产生菌腐生葡萄球菌M36基因组DNA中扩增得到脂肪酶Ⅲ基因lip3(GenBank AccessionNo.FJ979867),其编码区长度为741bp,编码247个氨基酸,推测蛋白分子量大小为31.6kD。它与腐生葡萄球菌lip3推测的基因(GenBank AccessionNo.AP008934)只有83%的同源性。将该基因与大肠杆菌表达载体pET-DsbA连接,转化大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)获得重组菌株BL21(DE3)/pET-DsbA-lip3,在pH8、25oC条件下,OD600为1.0时用0.4mmol/LIPTG诱导12h酶活达到25.8U/mL。重组酶在甲醇、正己烷、异辛烷、正庚烷等有机溶剂中具有较好的耐性。lip3基因的克隆及在大肠杆菌中有效表达的研究为进一步进行基因工程改造和脂肪酶应用奠定了基础。
- 汤彦翀卢亚萍吕凤霞别小妹郭瑶陆兆新
- 关键词：腐生葡萄球菌基因克隆原核表达
- 基于氮杂冠醚和多金属氧酸盐的化合物的合成与表征
- 冠醚类化合物因其独特的结构和性质使其在材料开发、生命科学及超分子自组装方面有着极为重要作用而成为有机配体的一个重要的分支。氮杂冠醚化合物是近年来研究较多的一种有机化合物,其在离子交换、气体吸附、磁性、荧光、催化、传感器及...
- 郭瑶
- 关键词：金属-有机配合物氮杂冠醚多金属氧酸盐水热合成
