金建军
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰技术阻断小鼠巨噬细胞受体相互作用蛋白2表达的实验研究
- 2007年
- 目的观察阻断受体相互作用蛋白2(Rip2)对巨噬细胞产生炎症细胞因子的影响,以及对内毒素血症小鼠的保护作用。方法构建 Rip2小干扰 RNA(siRNA)重组表达质粒,转染细胞后RT-PCR 和 Western blot 检测 Rip2的 mRNA 和蛋白表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖水平,脂多糖(LPS)刺激后,测定 TNFα和高迁移率组蛋白1(HMGB1)的水平。Rip2 siRNA 质粒转染小鼠后,观察小鼠病死率,测定血清 TNFα水平和肝组织 Rip2和 HMGB1表达。结果 Rip2 siRNA 表达质粒可阻断 Rip2 mRNA 和蛋白表达。Rip2阻断的细胞增殖明显,LPS 刺激后产生 TNFα、HMGB1减少;Rip2阻断的小鼠生存率较其他组高(P<0.05),肝组织中 HMGB1[(40.21±11.03)pg/g]表达和血清 TNFα[(300.43±59.26)ng/L]水平均较其他组低(P<0.05)。结论 Rip2 siRNA 表达质粒可阻断 Rip2的表达,从而减少 TNFα、HMGB1等炎症细胞因子的产生,降低小鼠内毒素血症的病死率。
- 刘红春曹中伟金建军王吉耀
- 关键词：巨噬细胞RNA干扰
- 髓样分化蛋白2在脂多糖所致大鼠急性肺损伤中的作用
- 2010年
- 目的研究髓样分化蛋白2(MD-2)在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中的表达及其作用。方法 20只健康雄性SD大鼠随机分为LPS组和对照组,通过支气管肺泡灌洗分离肺泡巨噬细胞,采用RT-PCR、Western blot和免疫组化方法分别检测MD-2 mRNA和蛋白的表达,ELISA方法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。将MD-2 siRNA转染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383,以终浓度1μg/mL的LPS刺激细胞,采用RT-PCR和Western blot方法分别测定细胞MD-2mRNA和蛋白的表达,ELISA方法测定细胞培养上清液TNF-α水平。结果 LPS组大鼠肺泡巨噬细胞和肺组织标本中MD-2 mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组(P<0.01),血清TNF-α水平明显升高(P<0.01)。在LPS刺激下,NR8383细胞MD-2 mRNA和蛋白的表达显著增加(P<0.01),细胞培养上清液中TNF-α水平升高(P<0.01)。经MD-2 siRNA处理后,NR8383细胞在LPS刺激下MD-2mRNA和蛋白的表达未见明显增加(P>0.05),细胞培养上清液中TNF-α水平未见明显升高(P>0.05)。结论 MD-2在LPS所致ALI大鼠肺组织中表达显著上调,沉默肺泡巨噬细胞MD-2基因可抑制LPS刺激引起的细胞因子分泌增加,提示MD-2在LPS所致大鼠ALI中起重要作用。
- 任卫英华峰金建军曾海英朱蕾
- 关键词：急性肺损伤脂多糖肺泡巨噬细胞
- 脂多糖对大鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达及炎性因子分泌的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨脂多糖刺激大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383细胞Toll样受体4（TLR4）、髓样分化蛋白-2（MD-2）mRNA表达和炎性因子分泌的影响,以及MD-2小干扰RNA（MD-2 siRNA）对脂多糖刺激下NR8383细胞炎性因子分泌的作用.方法 体外培养NR8383细胞,以不同浓度脂多糖（0.01～10 mg/L）刺激2 h,以1 mg/L脂多糖刺激2～24 h.运用脂质体Lipofectamine 2000将MD-2siRNA转染至细胞.半定量RT-PCR方法检测细胞TLR4和MD-2 mRNA的表达,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6和IL-1β的含量.统计学处理采用单因素方差分析、独立样本t检验和Pearson相关分析.结果 对照组NR8383细胞TLR4和MD-2mRNA的相对表达量分别为0.52±0.05和0.44±0.09,0.01 mg/L浓度脂多糖刺激前后表达量无明显改变,0.1 mg/L浓度时表达增加,随脂多糖浓度的升高表达量进一步增加,10 mg/L刺激后相对表达量分别为0.72±0.06和0.65±0.10（F=17.26、6.04,P〈0.01）;TNF-αIL-6和IL-1β含量具有类似改变趋势,对照组分别为（25.8±3.4）ng/L、（62.4±4.7）ng/L和（31.6±1.7）ng/L;在10 mg/L脂多糖刺激下分别增加至（58.9±5.3）ng/L、（96.5±3.9）ng/L和（55.4±5.4）ng/L（F=29.55、54.47、31.45,P〈0.01）.在1 mr/L脂多糖刺激下,TLR4和MD-2 mRNA的表达量在2 h后明显增加,6 h达高峰,8 h开始回落,至24 h时仍高于基础值（F=5.28、4.11,P〈0.01）;TNF-α、IL-6和IL-1β含量具有类似变化（F=10.64、11.23、17.58,P〈0.01）,其中TNF-α和IL-1β含量在6 h达高峰,持续至8 h,IL-6含量在8 h达高峰,持续至12 h.TLR4和MD-2 mRNA表达呈正相关（r=0.513,P〈0.01）.MD-2 siRNA对NR8383细胞MD-2基因的干扰效率为67%,在脂多糖刺激下干扰组细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平未见明显升高.结论 高浓度脂多糖可较长时间上调大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383细胞TLR4和MD-2基因的表达,并促进TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌.MD-2 siRNA可
- 任卫英朱蕾华峰金建军蔡映云
- 关键词：TOLL样受体4肺泡髓样分化蛋白-2
- 脂质物用于制备癌症诊断试剂盒的方法及应用
- 本发明涉及一种脂质物用于制备癌症诊断试剂盒的方法及应用，属于生物医药技术领域。脂质物包括通过对血浆脂质的脂质库进行筛选，获得与健康人外周血血浆脂质相比，在特定癌症的患者中显著升高的脂质并去除除这一特定癌症外其他癌症患者中...
- 王向东宋东莉金建军张林林武多娇程韵枫
- 白细胞介素27滴鼻预防给药通过STAT1信号通路减轻卵白蛋白诱导的哮喘小鼠气道过敏性炎症被引量：2
- 2015年
- 目的从动物水平探索白细胞介素27(IL-27)是否能减轻哮喘的过敏性气道炎症,并在细胞水平进行相关机制研究。方法将60只雌性C57/6J小鼠随机分成对照组、哮喘组、IL-27滴鼻预防组和IL-27滴鼻治疗组。在卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏与滴鼻激发诱导的小鼠哮喘模型基础上,加用IL-27干预,一种为"IL-27小剂量、多次预防模型",另一种为"IL-27大剂量、寡次治疗模型"。取肺组织进行HE染色和炎症病理评分。小鼠脾脏纯化的CD4+T淋巴细胞进行体外分化实验,并加用IL-27处理,用ELISA检测IL-4的水平。CD4+T淋巴细胞在不同强度的Th2环境下诱导分化,用IL-27刺激细胞,提取总蛋白,行蛋白免疫印迹法检测信号转导与转录激活子1(STAT1)和STAT1磷酸化水平。结果 IL-27小剂量、多次预防给药,可以明显抑制支气管及血管周围的炎症细胞浸润,炎症病理评分明显低于哮喘组(P<0.05),而与治疗组比较则差异无明显的统计学意义(P>0.05)。IL-27能明显抑制初始CD4+T淋巴细胞向Th2方向分化,且这种作用不依赖于γ干扰素和IL-10。IL-27的抑制作用是通过STAT1信号通路。在哮喘小鼠或高剂量IL-4培养分化环境中,CD4+T淋巴细胞的STAT1磷酸化受损。结论 IL-27可抑制初始CD4+T淋巴细胞向Th2分化的作用,但对已朝Th2分化的细胞,其抑制作用明显减弱。IL-27的预防性效果比治疗效果显著。哮喘气道局部业已存在已分化的Th2淋巴细胞是IL-27作用降低的原因之一。
- 苏孝琼潘珏金建军徐侃邓至陈智鸿
- 关键词：白细胞介素27
- 小鼠实验性结肠炎中骨桥蛋白的变化被引量：1
- 2010年
- 目的观察骨桥蛋白（osteopontin，OPN）在右旋葡聚糖硫酸钠（dextransodiumsul—fate，DSS）诱导的小鼠结肠炎中的变化，探讨OPN在炎症性肠病（inflammatoryboweldisease，IBD）发病中的作用。方法32只雄性BALB／C小鼠随机分为对照组（予蒸馏水饮用23d）、模型组（5％DSS饮用9d后2．5％DSS维持2周）、柳氮磺胺吡啶（SASP）治疗组（在模型组基础上从第10天起予SASP600mg／kg灌胃2周）和英夫利昔治疗组（在模型组基础上在第10天予尾静脉注射英夫利昔100mg／kg1次）。酶联免疫法检测小鼠血浆OPN浓度，逆转录聚合酶链反应和Western印迹法检测小鼠结肠组织中OPN的mRNA水平和蛋白质水平表达，免疫组化法检测OPN在结肠组织中的定位表达。结果各组小鼠的血浆OPN浓度分别为（5．26±1．93）、（10．21±2．37）、（4．58±1．83）和（4．82±1．83）ng／ml；结肠组织中OPNmRNA表达量分别为（0．36±0．16）、（0．71±0．17）、（0．32±0．07）和（0．42±0．22）；结肠组织中OPN的蛋白表达量分别为（0．44±0．10）、（0．85±0．04）、（0．61±0．11）和（0．58±0．17）；结肠黏膜固有层（）PN阳性细胞数分别为（46．6±10．9）、（155．5±43．8）、（73．1±6．8）和（70．6±8．3）。与对照组相比，模型组血浆和结肠组织中OPN的表达明显增高（P均〈0．05），SASP治疗组和英夫利昔治疗组OPN的表达均较SASP治疗组下降（P均〈0．05），SASP治疗组和英夫利昔治疗组0PN的表达差异无统计学意义。结论OPN在DSS诱导的小鼠结肠炎中表达增加，经药物治疗后表达降低。OPN促进了DSS诱导的小鼠结肠炎的发生。
- 陈凤媛刘红春金建军陈世耀练晶晶宿杰阿克苏纪元
- 关键词：结肠炎骨桥蛋白右旋葡聚糖硫酸钠
