背景与目的目前研究认为侧群细胞(side population cell,SP cell)富集了肿瘤干细胞,是肿瘤生长和发展的根源;并且SP细胞对放化疗高度耐受,成为肿瘤复发转移的重要因素。为此,我们探讨了肺癌SP细胞与非SP细胞(non-SP)miRNA分子表达谱差异,旨在为进一步研究miRNA在肺癌干细胞中的作用机制打下基础。方法利用Hoechst33342染料法,通过流式细胞仪紫外激光分选功能分选出A549细胞中的SP细胞和non-SP细胞,分别采用Trizol一步法提取两者的总RNA,利用miRNA芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析。结果肺癌SP细胞和non-SP细胞miRNA表达谱存在明显差异。与non-SP细胞相比,在SP细胞中上调2倍以上的miRNA有9条,下调2倍以上的miRNA有25条。结论差异表达的miRNA可能参与肺癌干细胞的发生发展过程,为进一步揭示肺癌干细胞发生的分子机制提供了依据。
目的:应用mi RNA芯片技术检测非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549及顺铂(DDP)耐药株A549/DDP miRNAs表达的差异。方法:MTT法检测A549/DDP相对于其亲本细胞A549的耐药性和耐药倍数;分别提取2种细胞的总RNA进行质检;microRNA芯片检测NSCLC细胞株A549及对应的DDP耐药株A549/DDP中mi RNA表达差异;采用real-ti me PCR验证结果。结果:DDP对A549和A549/DDP细胞的IC50值分别为7.47和137.32μmol/L,两者差异有统计学意义(P<0.01),耐药倍数为18.38倍。microR-NA芯片结果显示,耐药株A549/DDP与亲本细胞系A549比较有34条有差异表达的miR-NA(19条上调,15条下调)差异比值>1.5倍或<0.67倍,P<0.05;real-ti me PCR的结果进一步证实miR-21、miR-31和miR-374在A549/DDP中显著上调,而miR-378、miR-886-5p、miR-886-3p和miR-520c-3p在A549/DDP中显著下调。结论:A549/DDP与A549的miRNA的表达谱存在差异,miRNA可能参与NSCLC DDP耐药,为进一步研究miRNA在NSCLC DDP耐药机制中的作用奠定基础。
